Евразийский сервер публикаций

Евразийский патент № 035506

   Библиографические данные

(11) Номер патентного документа

035506

(21) Номер евразийской заявки

201790935

(22) Дата подачи евразийской заявки

2013.05.16

(51) Индексы Международной патентной классификации

A61K 47/60 (2017.01)
A61K 47/61(2017.01)

(43)(13) Дата публикации евразийской заявки, код вида документа

A1 2017.12.29 Бюллетень № 12  тит.лист, описание 

(45)(13) Дата публикации евразийского патента, код вида документа

B1 2020.06.25 Бюллетень № 06  тит.лист, описание  SEQL 

(31) Номер заявки, на основании которой испрашивается приоритет

61/647,814
13/488,043

(32) Дата подачи заявки, на основании которой испрашивается приоритет

2012.05.16
2012.06.04

(33) Код страны, идентифицирующий ведомство или организацию, которая присвоила номер заявки, на основании которой испрашивается приоритет

US
US

(62) Номер и дата подачи отозванной заявки, из которой выделена данная заявка

201492115; 2013.05.16

(71) Сведения о заявителе(ях)

БАКСАЛТА ИНКОРПОРЕЙТИД (US); БАКСАЛТА ГМБХ (CH)

(72) Сведения об изобретателе(ях)

Зикманн Юрген, Хайдер Штефан, Роттенштайнер Ханспетер, Турецек Петер (AT)

(73) Сведения о патентовладельце(ах)

БАКСАЛТА ИНКОРПОРЕЙТИД (US); БАКСАЛТА ГМБХ (CH)

(74) Сведения о представителе(ях)
или патентном поверенном

Медведев В.Н. (RU)

(54) Название изобретения

СПОСОБ КОНЪЮГАЦИИ (ВАРИАНТЫ), МОДИФИЦИРОВАННЫЙ ТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ БЕЛОК И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВОДОРАСТВОРИМОГО ПОЛИМЕРА (ВАРИАНТЫ)
   Формула  [ENG]
(57) 1. Способ конъюгации водорастворимого полимера с окисленным углеводным компонентом терапевтического белка, включающий осуществление контакта окисленного углеводного компонента с активированным водорастворимым полимером в условиях, которые допускают конъюгацию;
причем терапевтический белок представляет собой гликопротеин или терапевтический белок, гликозилированный in vitro, и выбран из группы, состоящей из Фактора IX (FIX), Фактора VIII (FVIII), Фактора VIIa (FVIIa), гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (Г-КСФ), эритропоэтина (ЭПО), интерферона-альфа (ИФН-альфа), ИФН-гамма, ангиопоэтина-2 (Ang-2), фактора роста эндотелия сосудов (ФРЭС), эпидермального фактора роста, гормона роста человека (ГРЧ), фактора роста нервов, фактора некроза опухолей альфа (ФНО-альфа), рецептора I типа фактора некроза опухолей (ФНО1), рецептора II типа фактора некроза опухолей (ФНО2), инсулина, белка Хумира (адалимумаба), белка Пролиа (деносумаба) или их биологически активного фрагмента;
причем указанный активированный водорастворимый полимер содержит активную аминооксигруппу и представляет собой полиалкиленгликоль (ПАГ);
при этом активированный водорастворимый полимер, содержащий активную аминооксигруппу, получают способом, включающим:
a) инкубирование раствора, содержащего окисленный водорастворимый полимер с аминоокси линкером, содержащим активную аминооксигруппу, в условиях, в которых образуется стабильная оксимная связь между окисленным водорастворимым полимером и активированным аминоокси линкером, причем указанные условия включают период времени между 1 мин и 24 ч; температуру между 2 и 8°С; присутствие или отсутствие света и наличие или отсутствие перемешивания; благодаря чему образуется водорастворимый полимер, содержащий активную аминооксигруппу; и
b) очистку водорастворимого полимера, содержащего активную аминооксигруппу, способом, выбранным из группы, состоящей из
хроматографии, фильтрации, диализа и осаждения при температуре между 2 и 8°С;
причем указанный углеводный компонент окисляют путем инкубации с буферным раствором, содержащим окисляющий агент, выбранный из группы, состоящей из перйодата натрия (NaIO4), тетраацетата свинца (Pb(OAc)4) и перрутената калия (KRuO4);
при этом оксимная связь образуется между окисленным углеводным компонентом и активной аминооксигруппой водорастворимого полимера; и
при этом образование оксимной связи катализируется м-толуидином.
2. Способ конъюгации водорастворимого полимера с окисленным углеводным компонентом терапевтического белка, включающий осуществление контакта окисленного углеводного компонента с активированным водорастворимым полимером в условиях, которые допускают конъюгацию;
причем терапевтический белок представляет собой гликопротеин или терапевтический белок, гликозилированный in vitro, и выбран из группы, состоящей из Фактора IX (FIX), Фактора VIII (FVIII), Фактора VIIa (FVIIa), гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (Г-КСФ), ЭПО, интерферона-альфа (ИФН-альфа), ИФН-гамма, Ang-2, фактора роста эндотелия сосудов (ФРЭС), эпидермального фактора роста, гормона роста человека (ГРЧ), фактора роста нервов, фактора некроза опухолей альфа (ФНО-альфа), рецептора I типа фактора некроза опухолей, рецептора II типа фактора некроза опухолей, инсулина, белка Хумира (адалимумаба), белка Пролиа (деносумаба), или их биологически активного фрагмента;
причем указанный водорастворимый полимер содержит активную аминооксигруппу и представляет собой полиалкиленгликоль (ПАГ);
при этом водорастворимый полимер, содержащий активную аминооксигруппу, получают способом, включающим:
а) инкубирование раствора, содержащего неокисленный водорастворимый полимер с аминоокси линкером, содержащим активную аминооксигруппу, в условиях, в которых образуется стабильная оксимная связь между водорастворимым полимером и активированным аминоокси линкером, причем указанные условия включают период времени между 1 мин и 24 ч; температуру между 22 и 37°С; присутствие или отсутствие света и наличие или отсутствие перемешивания; благодаря чему образуется водорастворимый полимер, содержащий активную аминооксигруппу; и
b) очистку водорастворимого полимера, содержащего активную аминооксигруппу способом, выбранным из группы, состоящей из хроматографии, фильтрации, диализа и осаждения;
причем указанный углеводный компонент окисляют путем инкубации с буферным раствором, содержащим окисляющий агент, выбранный из группы, состоящей из перйодата натрия (NaIO4), тетраацетата свинца (Pb(OAc)4) и перрутената калия (KRuO4);
при этом оксимная связь образуется между окисленным углеводным компонентом и активной аминооксигруппой водорастворимого полимера; и
при этом образование оксимной связи катализируется м-толуидином.
3. Способ по п.2, где указанные условия на стадии а) дополнительно включают стадию повышения температуры раствора до температуры от 32 до 37°С и инкубацию дополнительно в течение 12-24 ч.
4. Способ по любому из пп.1-3, где водорастворимый полимер выбирают из полиэтиленгликоля (ПЭГ), полипропиленгликоля (ППГ), разветвленного ПЭГ и полиэтиленгликоля марки PolyPEGÒ (Warwick Effect Polymers; Coventry, UK).
5. Способ по любому из пп.1-3, где водорастворимый полимер выбирают из полиэтиленгликоля (ПЭГ) и полипропиленгликоля (ППГ).
6. Модифицированный терапевтический белок, полученный способом по любому из пп.1-5, содержащий терапевтический белок, конъюгированный с водорастворимым полимером через образование оксимной связи.
7. Способ получения водорастворимого полимера, содержащего активную аминооксигруппу, включающий:
а) инкубирование раствора, содержащего окисленный водорастворимый полимер с аминоокси линкером, содержащим активную аминооксигруппу, в условиях, в которых образуется стабильная оксимная связь между окисленным водорастворимым полимером и активированным аминоокси линкером, причем указанные условия включают период времени между 1 мин и 24 ч; температуру между 2 и 8°С; присутствие или отсутствие света и наличие или отсутствие перемешивания; благодаря чему образуется водорастворимый полимер, содержащий активную аминооксигруппу; и
b) очистку водорастворимого полимера, содержащего активную аминооксигруппу, способом, выбранным из группы, состоящей из хроматографии, фильтрации, диализа и осаждения при температуре между 2 и 8°С;
причем полученный водорастворимый полимер представляет собой полиалкиленгликоль (ПАГ) с оксимной связью между водорастворимым полимером и аминоокси линкером.
8. Способ получения водорастворимого полимера, содержащего активную аминооксигруппу, включающий:
a) инкубирование раствора, содержащего неокисленный водорастворимый полимер, с аминоокси линкером, содержащим активную аминооксигруппу, в условиях, в которых образуется стабильная оксимная связь между водорастворимым полимером и активированным аминоокси линкером, указанные условия включают период времени между 1 мин и 24 ч; температуру между 22 и 37°С; присутствие или отсутствие света и наличие или отсутствие перемешивания; благодаря чему образуется водорастворимый полимер, содержащий активную аминооксигруппу; и
b) очистку водорастворимого полимера, содержащего активную аминооксигруппу методом, выбранным из группы, состоящей из хроматографии, фильтрации, диализа и осаждения;
причем полученный водорастворимый полимер представляет собой полиалкиленгликоль (ПАГ) с оксимной связью между полимером и аминоокси линкером.
9. Способ получения водорастворимого полимера, содержащего активную аминооксигруппу, включающий:
а) инкубирование раствора, содержащего окисленный водорастворимый полимер, с аминоокси линкером, содержащим активную аминооксигруппу, в условиях, в которых образуется стабильная оксимная связь между окисленным водорастворимым полимером и активированным аминоокси линкером, указанные условия включают период времени 1 ч; температуру 4°С; отсутствие света и наличие перемешивания; благодаря чему образуется водорастворимый полимер, содержащая активную аминооксигруппу; и
b) очистку водорастворимого полимера, содержащего активную аминооксигруппу, анионообменной хроматографией при температуре 4°C; указанный активированный аминоокси линкер представляет собой 3-оксапентан-1,5-диоксиаминный линкер формулы:
Zoom in
причем полученный водорастворимый полимер представляет собой полиалкиленгликоль (ПАГ) с оксимной связью между водорастворимым полимером и аминоокси линкером.
10. Способ получения водорастворимого полимера, содержащего активную аминооксигруппу, включающий:
а) инкубирование раствора, содержащего неокисленный водорастворимый полимер, с аминоокси линкером, содержащим активную аминооксигруппу, в условиях, в которых образуется стабильная оксимная связь между неокисленным водорастворимым полимером и активированным аминоокси линкером, указанные условия включают период времени 2 ч; температуру 22°С; отсутствие света и наличие перемешивания; благодаря чему образуется водорастворимый полимер, содержащий активную аминооксигруппу; и
b) очистку водорастворимого полимера, содержащего активную аминооксигруппу, методом диализа при температуре 22°С;
указанный активированный аминоокси линкер представляет собой 3-оксапентан-1,5-диоксиамин­ный линкер формулы
Zoom in
причем полученный водорастворимый полимер представляет собой полиалкиленгликоль (ПАГ);
причем оксимная связь образуется между неокисленным водорастворимым полимером и аминоокси линкером.
11. Способ по п.10, где указанные условия на стадии а) дополнительно включают стадию повышения температуры раствора до температуры от 32 до 37°С и инкубацию дополнительно в течение 12-24 ч.
12. Способ по любому из пп.7-11, где водорастворимый полимер выбирают из полиэтиленгликоля (ПЭГ), полипропиленгликоля (ППГ), разветвленного ПЭГ и полиэтиленгликоля марки PolyPEGÒ (Warwick Effect Polymers; Coventry, UK).
13. Способ по любому из пп.7-11, где водорастворимый полимер выбирают из полиэтиленгликоля (ПЭГ) и полипропиленгликоля (ППГ).


 
Назад|  Новый поиск