Евразийский сервер публикаций

Евразийский патент № 037238

   Библиографические данные
(11)037238    (13) B1
(21)201691542

 A ]   B ]   C ]   D ]   E ]   F ]   G ]   H ] 

Текущий раздел:      


Документ опубликован 2021.02.25
Текущий бюллетень: 2021-02  
Все публикации: 037238  
Реестр евразийского патента: 037238  

(22)2015.01.29
(51) A61K 39/395(2006.01)
(43)A1 2016.12.30 Бюллетень № 12  тит.лист, описание 
(45)B1 2021.02.25 Бюллетень № 02  тит.лист, описание 
(31)61/933,665
(32)2014.01.30
(33)US
(86)US2015/013524
(87)2015/116820 2015.08.06
(71)КОХЕРУС БАЙОСАЙЕНСИС, ИНК. (US)
(72)Пухач Эла, Грув Джеймс Расселл (US)
(73)КОХЕРУС БАЙОСАЙЕНСИС, ИНК. (US)
(74)Медведев В.Н. (RU)
(54)ПЕРФУЗИОННАЯ СРЕДА
   Формула 
(57) 1. Способ производства белка, включающий стадию получения белка посредством перфузии в присутствии питательной среды с суммарной концентрацией аминокислот от 15 до менее 70 мМ, где в стадии получения белка достигается титр белка, составляющий по меньшей мере 300 мкг/мл, и где указанный белок представляет собой слитый белок TNFR-Fc.
2. Способ по п.1, где питательная среда содержит суммарную концентрацию аминокислот в диапазоне, выбранном из группы, состоящей из от 15 до 20 мМ; от 20 до 25 мМ; от 25 до 30 мМ; от 30 до 35 мМ; от 35 до 40 мМ; от 40 до 45 мМ; от 45 до 50 мМ; от 50 до 55 мМ; от 55 до 60 мМ; от 60 до 65 мМ и между 65 и 70 мМ.
3. Способ по п.1, где слитый белок TNFR-Fc представляет собой этанерцепт.
4. Способ по п.1, где питательная среда содержит один или более из следующих компонентов: базовая среда SFM4CHOÒ, базовая среда BalanCD, базовая среда Hycell, гидролизат хлопковых семян, декса­метазон, ManNAc и/или D-(+)-галактоза.
5. Способ по п.1, включающий следующие стадии: (a) подготовка смеси, содержащей клетки, способные экспрессировать требуемый терапевтический белок, и культуральной среды, подходящей для осуществления такой экспрессии; (b) экспрессия указанного терапевтического белка в подходящем сосуде, содержащем указанную смесь, посредством инициирования производства белка клетками и (с) периодическое или непрерывное удаление отработанной культуральной среды из реакционного сосуда и добавление в него свежей культуральной среды.
6. Способ по п.5, где клетки являются клетками СНО.
7. Способ по п.5, где перед стадией (а) клетки, способные к экспрессии белка, выращивают в фазе роста при температуре, выбранной из (i) от 28 до 37°C и (ii) от 35 до 36°C.
8. Способ по п.7, где фазу производства, обособленную от фазы роста и следующую за ней, проводят при температуре, выбранной из (i) больше чем 32°C; (ii) больше чем 34°C; (iii) больше чем 35°C; (iv) диапазона от 33 до 36°C; (v) диапазона от 35 до 36°C; (vi) 32,5°C; (vii) 33,5°C; (viii) 34,5°C и (ix) 35,5°C.
9. Способ по п.8, где вырабатываемый белок представляет собой этанерцепт.
10. Перфузионный способ получения терапевтического белка, включающий следующие стадии: (а) подготовка смеси, содержащей клетки СНО, способные к экспрессии белка, и культуральной среды, подходящей для проведения такой экспрессии; (b) в подходящем сосуде, содержащем указанную смесь, инициирование производства белка клетками и (с) периодическое или непрерывное удаление отработанной культуральной среды из и добавление свежей культуральной среды в реакционный сосуд, где культуральная среда содержит по меньшей мере одно соединение, выбранное из группы, состоящей из сложной химически определенной питательной среды, дексаметазона, ManNAc, гидролизата хлопковых семян и D-(+)-галактозы, и указанная культуральная среда имеет суммарную концентрацию аминокислот от 15 до 65 мМ, где в стадии получения белка достигается титр белка, составляющий по меньшей мере 300 мкг/мл, и где указанный белок представляет собой слитый белок TNFR-Fc.
11. Способ по п.10, где слитый белок TNFR-Fc представляет собой этанерцепт.
12. Перфузионный способ по п.11, где перед стадией (а) клетки, способные к экспрессии этанерцепта, выращивают в фазе роста при температуре, выбранной из (i) от 28 до 37°C и (ii) от 35 до 36°C.
13. Перфузионный способ по п.12, где во время производства этанерцепта, происходящего на стадиях (b) и (с), в реакционном сосуде поддерживают температуру, выбранную из (i) больше чем 32°C; (ii) больше чем 34°C; (iii) больше чем 35°C; (iv) из диапазона от 33 до 36°C; (v) из диапазона от 35 до 36°C; (vi) 32,5°C; (vii) 33,5°C; (viii) 34,5°C и (ix) 35,5°C.
14. Композиция питательной среды для получения терапевтического слитого белка TNFR-Fc в сосуде перфузионной реакции, содержащая суммарную концентрацию аминокислот в диапазоне, выбранном из группы, состоящей из концентраций от 15 до 20 мМ; от 20 до 25 мМ; от 25 до 30 мМ; от 30 до 35 мМ; от 35 до 40 мМ; от 40 до 45 мМ; от 45 до 50 мМ; от 50 до 55 мМ; от 55 до 60 мМ; от 60 до 65 мМ, и по меньшей мере одно из гидролизата хлопковых семян, дексаметазона, ManNAc и D-(+)-галактозы.
Zoom in