(57) 1. Двухцепочечный PHKi-агент, который ингибирует экспрессию пропротеин конвертазы субтилизин/кексин 9 (PCSK9) в клетке,
где указанный двухцепочечный PHKi-агент содержит смысловую цепь, комплементарную антисмысловой цепи, образуя двухцепочечный участок;
где указанная антисмысловая цепь содержит участок, комплементарный части мРНК, кодирующей PCSK9;
где длина каждой цепи независимо составляет от 19 до 30 нуклеотидов;
где указанная антисмысловая цепь содержит по крайней мере 19 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности

где указанный двухцепочечный PHKi-агент содержит по крайней мере один модифицированный нуклеотид, выбранный из группы, состоящей из 2'-O-метила, 2'-фтора и 2'-дезокситимидина (dT);
где антисмысловая цепь содержит две фосфоротиоатные межнуклеотидные связи между тремя нуклеотидами на 3'-конце и две фосфоротиоатные межнуклеотидные связи между тремя нуклеотидами на 5'-конце; и
где смысловая цепь содержит две фосфоротиоатные межнуклеотидные связи между тремя нуклеотидами на 5'-конце; и
где по меньшей мере одна смысловая цепь конъюгирована с лигандом, содержащим одно или несколько производных GalNAc, присоединенных посредством двухвалентного или трехвалентного разветвленного линкера.
2. Двухцепочечный PHKi-агент по п.1, в котором длина двухцепочечной области составляет 19-25 пар нуклеотидов.
3. Двухцепочечный PHKi-агент по п.1, в котором длина двухцепочечной области составляет 19-23 пар нуклеотидов.
4. Двухцепочечный PHKi-агент по п.1, в котором длина двухцепочечной области составляет 21-25 пар нуклеотидов.
5. Двухцепочечный PHKi-агент по п.1, в котором длина двухцепочечной области составляет 23-27 пар нуклеотидов.
6. Двухцепочечный PHKi-агент по п.1, в котором длина двухцепочечной области составляет 19-21 пар нуклеотидов.
7. Двухцепочечный PHKi-агент по п.1, в котором длина двухцепочечной области составляет 21-23 пар нуклеотидов.
8. Двухцепочечный PHKi-агент по п.1, в котором каждая цепь состоит из 19-25 нуклеотидов.
9. Двухцепочечный PHKi-агент по п.1, в котором смысловая цепь имеет всего 21 нуклеотид и антисмысловая цепь имеет всего 23 нуклеотида.
10. Двухцепочечный PHKi-агент по п.1, в котором область, комплементарная части мРНК, кодирующей PCSK9, содержит нуклеотидную последовательность

11. Двухцепочечный PHKi-агент по п.1, в котором смысловая цепь состоит из нуклеотидной последовательности

и антисмысловая цепь состоит из нуклеотидной последовательности

12. Двухцепочечный PHKi-агент по п.1, в котором антисмысловая цепь содержит нуклеотидную последовательность

и смысловая цепь содержит нуклеотидную последовательность

13. Двухцепочечный PHKi-агент по п.1, в котором смысловая цепь состоит из нуклеотидной последовательности

и смысловая цепь состоит из нуклеотидной последовательности

14. Двухцепочечный PHKi-агент по п.1, в котором смысловая цепь содержит нуклеотидную последовательность

и антисмысловая цепь содержит нуклеотидную последовательность

где а, с, g и u представляют собой 2'-O-метил (2'-ОМе) А, С, G и U соответственно; Af, Cf, Gf и Uf представляют собой 2'-фтор А, С, G и U соответственно; dT представляет собой 2'-дезокситимидин; и s представляет собой фосфоротиоатную связь.
15. Двухцепочечный PHKi-агент по п.1, в котором двухцепочечный PHKi-агент содержит
(а) антисмысловую цепь, состоящую из нуклеотидной последовательности

и смысловую цепь, состоящую из нуклеотидной последовательности

(b) антисмысловую цепь, состоящую из нуклеотидной последовательности

и смысловую цепь, состоящую из нуклеотидной последовательности

(с) антисмысловую цепь, состоящую из нуклеотидной последовательности

и смысловую цепь, состоящую из нуклеотидной последовательности

(d) антисмысловую цепь, состоящую из нуклеотидной последовательности

и смысловую цепь, состоящую из нуклеотидной последовательности

(е) антисмысловую цепь, состоящую из нуклеотидной последовательности

и смысловую цепь, состоящую из нуклеотидной последовательности

(f) антисмысловую цепь, состоящую из нуклеотидной последовательности

и смысловую цепь, состоящую из нуклеотидной последовательности

(g) антисмысловую цепь, состоящую из нуклеотидной последовательности

и смысловую цепь, состоящую из нуклеотидной последовательности
 или
(h) антисмысловую цепь, состоящую из нуклеотидной последовательности

и смысловую цепь, состоящую из нуклеотидной последовательности

где a, g, c и u представляют собой модифицированные 2'-О-метилом (2'-ОМе) А, С, G и U; Af, Gf, Cf и Uf представляют собой модифицированные 2'-фтором А, С, G и U нуклеотиды; dT представляет собой 2'-дезокситимидиновый нуклеотид; и s представляет собой фосфоротиоатную связь.
16. Двухцепочечный PHKi-агент по п.1, в котором производное GalNAc присоединено к смысловой цепи.
17. Двухцепочечный PHKi-агент по п.1, в котором практически все нуклеотиды смысловой цепи и практически все нуклеотиды антисмысловой цепи являются модифицированными нуклеотидами.
18. PHKi-агент по п.1, в котором все нуклеотиды смысловой цепи и все нуклеотиды антисмысловой цепи модифицированы.
19. Двухцепочечный PHKi-агент по п.1, в котором лиганд представляет собой

20. Двухцепочечный PHKi-агент по п.19, в котором лиганд присоединен к смысловой цепи на 3-конце.
21. Двухцепочечный PHKi-агент по п.20, который конъюгирован с лигандом, как показано на следующей схеме:

где X представляет собой О или S.
22. Фармацевтическая композиция, содержащая двухцепочечный PHKi-агент по п.1, для лечения индивида с расстройством, опосредованным экспрессией PCSK9.
23. Двухцепочечный PHKi-агент, который ингибирует экспрессию пропротеин конвертазы субтилизин/кексин 9 (PCSK9) в клетке, содержащий смысловую цепь и антисмысловую цепь, где смысловая цепь содержит нуклеотидную последовательность

и антисмысловая цепь содержит нуклеотидную последовательность

где а, с, g и u представляют собой 2'-O-метил (2'-OMe) А, С, G и U соответственно; Af, Cf, Gf и Uf представляют собой 2'-фтор А, С, G и U соответственно; s представляет собой фосфоротиоатную связь; dT представляет собой 2'-дезокситимидин, где L96 представляет собой
, и
где L96 конъюгирован с 3'-концом смысловой цепи, как показано ниже на схеме:

где X представляет собой О.
24. Фармацевтическая композиция, содержащая двухцепочечный PHKi-агент по п.23, используемая в способе для лечения индивида с расстройством, опосредованным экспрессией PCSK9.
25. Фармацевтическая композиция по п.24, дополнительно содержащая незабуференный раствор.
26. Фармацевтическая композиция по п.25, в которой незабуференный раствор представляет собой физиологический раствор или воду.
27. Фармацевтическая композиция по п.24, дополнительно содержащая буферный раствор.
28. Фармацевтическая композиция по п.27, в которой буферный раствор содержит ацетат, цитрат, проламин, карбонат или фосфат или любую их комбинацию.
29. Двухцепочечный PHKi-агент, который ингибирует экспрессию пропротеин конвертазы субтилизин/кексин 9 (PCSK9) в клетке, содержащий смысловую цепь и антисмысловую цепь,
где смысловая цепь состоит из нуклеотидной последовательности

и антисмысловая цепь состоит из нуклеотидной последовательности

где а, с, g и u представляют собой 2'-O-метил (2'-OMe) А, С, G и U соответственно; Af, Cf, Gf и Uf представляют собой 2'-фтор А, С, G и U соответственно; s представляет собой фосфоротиоатную связь; dT представляет собой 2'-дезокситимидин, и
где L96 представляет собой
, и
где L96 конъюгирован с 3-концом смысловой цепи, как показано ниже на схеме:

где X представляет собой О.
30. Фармацевтическая композиция, содержащая двухцепочечный PHKi-агент по п.29, используемая в способе для лечения индивида с расстройством, опосредованным экспрессией PCSK9.
31. Двухцепочечный PHKi-агент, который ингибирует экспрессию пропротеин конвертазы субтилизин/кексин 9 (PCSK9) в клетке, содержащий антисмысловую цепь, которая отличается не более чем 4 основаниями от нуклеотидной последовательности

и смысловую цепь, которая отличается не более чем 4 основаниями от нуклеотидной последовательности

где a, c, g и u представляют собой 2'-O-метил (2'-ОМе) А, С, G и U соответственно; Af, Cf, Gf и Uf представляют собой 2'-фтор А, С, G и U соответственно; s представляет собой фосфоротиоатную связь; dT представляет собой 2'-дезокситимидин; и L96 представляет собой

и где L96 конъюгирован на 3'-конце смысловой цепи, как показано на следующей схеме:

где X представляет собой О.
32. Двухцепочечный PHKi-агент по по п.31, где антисмысловая цепь отличается не более чем 3 основаниями от нуклеотидной последовательности

и смысловая цепь отличается не более чем 3 основаниями от нуклеотидной последовательности

33. Двухцепочечный PHKi-агент по п.31, где антисмысловая цепь отличается не более чем 2 основаниями от нуклеотидной последовательности

и смысловая цепь отличается не более чем 2 основаниями от нуклеотидной последовательности

34. Фармацевтическая композиция, содержащая двухцепочечный PHKi-агент по п.61, используемая в способе для лечения индивида с расстройством, опосредованным экспрессией PCSK9.
35. Способ ингибирования экспрессии PCSK9 в клетке, включающий:
(a) приведение клетки в контакт с двухцепочечным PHKi-агентом по любому из пп.1, 29 или 31 или с фармацевтической композицией по любому из пп.22, 30 или 34; и
(b) поддержание клетки, полученной на стадии (а), в период времени, достаточный для получения деградации транскрипта мРНК гена PCSK9, тем самым ингибируя экспрессию гена PCSK9 в клетке.
36. Применение терапевтически эффективного количества двухцепочечного PHKi-агента по любому из пп.1, 29 или 31 или фармацевтической композиции по любому из пп.22, 30 или 34 для лечения индивида с липидемей, опосредованной экспрессией PCSK9.
37. Применение по п.36, при котором индивидом является человек.
38. Применение по п.37, при котором у человека имеется гиперхолестеринемия.
39. Применение по п.36, где двухцепочечный PHKi-агент предназначен для введения в дозе от приблизительно 0,01 мг/кг до приблизительно 10 мг/кг или от приблизительно 0,5 мг/кг до приблизительно 50 мг/кг.
40. Применение по п.36, при котором двухцепочечный PHKi-агент предназначен для введения в двух или более дозах.
41. Применение по п.40, при котором двухцепочечный PHKi-агент предназначен для введения в режиме дозирования, который включает фазу загрузки с последующей стадией поддержания.
42. Применение по п.41, при котором фаза поддержания включает дозу двухцепочечного PHKi-агента для введения индивиду один раз в три месяца.
43. Применение по п.41, при котором фаза поддержания включает введение дозы двухцепочечного PHKi-агента индивиду один раз в шесть месяцев.
44. Применение по п.36, при котором двухцепочечный PHKi-агент или фармацевтическая композиция предназначены для введения индивиду подкожно или внутривенно.
45. Способ ингибирования экспрессии PCSK9 в клетке, включающий:
(a) приведение клетки в контакт с двухцепочечным PHKi-агентом по п.23 или с фармацевтической композицией по п.24; и
(b) поддержание клетки, полученной на стадии (а), в течение периода времени, достаточного для получения деградации транскрипта мРНК гена PCSK9, тем самым ингибируя экспрессию гена PCSK9 в клетке.
46. Применение терапевтически эффективного количества двухцепочечного PHKi-агента по п.23 или фармацевтической композиции по п.24 для лечения индивида с липидемией, опосредованной экспрессией PCSK9.
47. Применение по п.46, при котором индивидом является человек.
48. Применение по п.47, при котором у человека имеется гиперхолестеринемия.
49. Применение по п.46, при котором двухцепочечный PHKi-агент или фармацевтическая композиция предназначены для введения индивиду подкожно или внутривенно.
50. Применение по п.46, где двухцепочечный PHKi-агент предназначен для введения в дозе от приблизительно 0,01 мг/кг до приблизительно 10 мг/кг или от приблизительно 0,5 мг/кг до приблизительно 50 мг/кг.
51. Применение по п.46, при котором двухцепочечный PHKi-агент предназначен для введения в двух или более дозах.
52. Применение по п.46, при котором двухцепочечный PHKi-агент предназначен для введения в режиме дозирования, который включает фазу загрузки с последующей стадией поддержания.
53. Применение по п.52, при котором фаза поддержания включает дозу двухцепочечного PHKi-агента для введения индивиду один раз в три месяца.
54. Применение по п.52, при котором фаза поддержания включает дозу двухцепочечного PHKi-агента для введения индивиду один раз в шесть месяцев.

---