Евразийский сервер публикаций

Евразийский патент № 036577

   Библиографические данные
(11)036577    (13) B1
(21)201690803

 A ]   B ]   C ]   D ]   E ]   F ]   G ]   H ] 

Текущий раздел: C     


Документ опубликован 2020.11.25
Текущий бюллетень: 2020-11  
Все публикации: 036577  
Реестр евразийского патента: 036577  

(22)2014.11.04
(51) C07K 16/46 (2006.01)
B01D 15/38(2006.01)
(43)A1 2016.09.30 Бюллетень № 09  тит.лист, описание 
(45)B1 2020.11.25 Бюллетень № 11  тит.лист, описание  последовательности 
(31)13191386.5
(32)2013.11.04
(33)EP
(86)EP2014/073738
(87)2015/063339 2015.05.07
(71)ИКНОС САЙЕНСИЗ СА (CH)
(72)Блейн Станислас, Оллиер Ромейн, Хоу Самюэль, Скегро Дарко (CH)
(73)ИКНОС САЙЕНСИЗ СА (CH)
(74)Нилова М.И. (RU)
(54)ПОЛУЧЕНИЕ ПЕРЕОРИЕНТИРУЮЩИХ Т-КЛЕТКИ ГЕТЕРОДИМЕРНЫХ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ
   Формула 
(57) 1. Гетеродимерный иммуноглобулин, который содержит:
(a) первый полипептид, содержащий область связывания эпитопа, которая связывает первый эпитоп, и константную область иммуноглобулина; и
(b) второй полипептид, содержащий область связывания эпитопа, которая связывает второй эпитоп, и константную область иммуноглобулина;
при этом указанный гетеродимерный иммуноглобулин способен связываться с
i) белковым комплексом CD3 и HER2, причем указанный первый полипептид имеет последовательность аминокислот SEQ ID NO: 159, соединен с легкой цепью с последовательностью аминокислот SEQ ID NO: 47 и связывает CD3-эпсилон; и указанный второй полипептид имеет последовательность аминокислот SEQ ID NO: 160 и связывает HER2;
ii) белковым комплексом CD3 и HER2, причем указанный первый полипептид имеет последовательность аминокислот SEQ ID NO: 161, соединен с когнатной легкой цепью с последовательностью аминокислот SEQ ID NO: 3 и связывает HER2; и указанный второй полипептид имеет последовательность аминокислот SEQ ID NO: 162 и связывает CD3-эпсилон;
iii) белковым комплексом CD3 и HER2, причем указанный первый полипептид имеет последовательность аминокислот SEQ ID NO: 163, соединен с легкой цепью с последовательностью аминокислот SEQ ID NO: 47 и связывает CD3-эпсилон; и указанный второй полипептид имеет последовательность аминокислот SEQ ID NO: 164 и связывает HER2;
iv) белковым комплексом CD3 и HER2, причем указанный первый полипептид имеет последовательность аминокислот SEQ ID NO: 165, соединен с легкой цепью с последовательностью аминокислот SEQ ID NO: 166 и связывает CD3-эпсилон; и указанный второй полипептид имеет последовательность аминокислот SEQ ID NO: 167 и связывает HER2;
v) белковым комплексом CD3 и HER2, причем указанный первый полипептид имеет последовательность аминокислот SEQ ID NO: 168, соединен с легкой цепью с последовательностью аминокислот SEQ ID NO: 89 и связывает CD3-эпсилон; и указанный второй полипептид имеет последовательность аминокислот SEQ ID NO: 167 и связывает HER2.
2. Способ получения гетеродимерного иммуноглобулина in vitro по п.1, включающий следующие этапы:
ia) обеспечение ДНК-вектора, кодирующего тяжелую цепь первого полипептида, и ДНК-вектора, кодирующего тяжелую цепь второго полипептида, при этом один или оба ДНК-вектора или третий ДНК-вектор кодируют общую легкую цепь, или легкую цепь, соединяемую с тяжелой цепью указанного первого или второго полипептида; или
ib) обеспечение одного ДНК-вектора, кодирующего тяжелые цепи указанных первого и второго полипептидов, при этом указанный ДНК-вектор кодирует общую легкую цепь или легкую цепь, соединяемую с тяжелой цепью указанного первого или второго полипептида; и при этом указанные ДНК-векторы подходят для транзиентной или стабильной экспрессии в клетке-хозяине млекопитающего;
ii) трансфекция или совместная трансфекция ДНК-вектором(ами) по (ia) или (ib) клеток-хозяев линии клеток млекопитающих;
iii) культивирование трансфицированной клеточной линии или ее стабильно селектируемого клона и сбор клеточного культурального супернатанта;
iv) приведение в контакт клеточного культурального супернатанта со смолой для аффинной хроматографии с белком А и
v) элюирование и сбор указанного гетеродимерного иммуноглобулина.
3. Способ по п.2, отличающийся тем, что чистота указанного гетеродимерного иммуноглобулина, обнаруживаемого в очищенном материале этапа (v), составляет по меньшей мере 95% по оценке с применением капиллярного электрофореза.