Евразийский сервер публикаций

Евразийский патент № 036569

   Библиографические данные
(11)036569    (13) B1
(21)201500485

 A ]   B ]   C ]   D ]   E ]   F ]   G ]   H ] 

Текущий раздел: C     


Документ опубликован 2020.11.24
Текущий бюллетень: 2020-11  
Все публикации: 036569  
Реестр евразийского патента: 036569  

(22)2009.12.09
(51) C12N 9/26 (2006.01)
C12N 15/00(2006.01)
(43)A1 2015.11.30 Бюллетень № 11  тит.лист, описание 
(45)B1 2020.11.24 Бюллетень № 11  тит.лист, описание  последовательности 
(31)61/201,384; 61/281,240
(32)2008.12.09; 2009.11.13
(33)US; US
(62)201100908; 2009.12.09
(71)ГАЛОЗИМ, ИНК. (US)
(72)Веи Ги, Панниирселвам Кришнасами, Фрост Грегори Ай, Букбиндер Луис (US)
(73)ГАЛОЗИМ, ИНК. (US)
(74)Стояченко И.Л. (RU)
(54)СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИПЕПТИДА ГИАЛУРОНИДАЗЫ PH20
   Формула 
(57) 1. Способ получения полипептида гиалуронидазы PH20, включающий культивирование клеток, содержащих нуклеиновую кислоту, кодирующую гиалуронидазу PH20, в условиях, обеспечивающих продуцирование гиалуронидазы PH20 в клетках, где указанная гиалуронидаза PH20 является растворимой и активной в нейтральной среде и выбрана из:
а) полипептида, состоящего из последовательности аминокислот 36-469, 36-470, 36-471, 36-495, 36-496, 36-497, 36-498, 36-499 или 36-500 из SEQ ID NO: 107; и
б) полипептида, идентичного по меньшей мере на 85, 87, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более полипептиду по п. a) и включающего только аминокислотные замены в последовательностях, указанных в п. a).
2. Способ по п.1, дополнительно включающий выделение продуцированного полипептида гиалуронидазы PH20.
3. Способ получения полипептида гиалуронидазы PH20, включающий культивирование клеток, содержащих вектор, который содержит нуклеиновую кислоту, кодирующую гиалуронидазу PH20, в условиях, обеспечивающих продуцирование указанной гиалуронидазы PH20 в клетках, причем указанная гиалуронидаза PH20 является растворимой и активной в нейтральной среде и выбрана из:
а) полипептида, состоящего из последовательности аминокислот 36-469, 36-470, 36-471, 36-495, 36-496, 36-497, 36-498, 36-499 или 36-500 из SEQ ID NO: 107; и
б) полипептида, идентичного по меньшей мере на 85, 87, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более полипептиду по п. a) и включающего только аминокислотные замены в последовательностях, указанных в п. a).
4. Способ по п.3, дополнительно включающий выделение продуцированного полипептида гиалуронидазы PH20.
5. Способ по п.3 или 4, где нуклеиновая кислота, кодирующая гиалуронидазу PH20, содержит стоп-кодон, функционально встроенный непосредственно после кодона C-концевой аминокислоты.
6. Способ по любому из пп.1-5, где гиалуронидаза PH20 состоит из последовательности аминокислот 36-495, 36-496, 36-497, 36-498, 36-499 или 36-500 из SEQ ID NO: 107.
7. Способ по любому из пп.1-5, где гиалуронидаза PH20 состоит из последовательности аминокислот 36-469, 36-470 или 36-471 из SEQ ID NO:107.
8. Способ по любому из пп.1-7, где гиалуронидаза PH20 N-гликозилирована.
9. Способ по любому из пп.1-7, где гиалуронидаза PH20 содержит фрагмент N-ацетилглюкозамина, связанный по меньшей мере с тремя остатками аспарагина (N).
10. Способ по п.9, где три остатка аспарагина представляют собой аминокислотные остатки 235, 368 и 393 из SEQ ID NO: 107.
11. Способ по любому из пп.1-10, где гиалуронидаза PH20 модифицирована путем сиалирования, альбуминирования, фарнезилирования, карбоксилирования, гидроксилирования и/или фосфорилирования.
12. Способ по любому из пп.1-10, где гиалуронидаза PH20 модифицирована путем присоединения полимера.
13. Способ по п.12, в котором полимер представляет собой декстран или ПЭГ.
14. Способ по любому из пп.1-13, где клетка является эукариотической клеткой.
15. Способ по п.14, где эукариотическая клетка выбрана из клеток млекопитающих, клеток насекомых, маммалинизированных клеток насекомых, клеток дрожжей или клеток растений.
16. Способ по п.15, где клетка является клеткой CHO.