Евразийский сервер публикаций

Евразийский патент № 036396

   Библиографические данные
(11)036396    (13) B1
(21)201790288

 A ]   B ]   C ]   D ]   E ]   F ]   G ]   H ] 

Текущий раздел: C     


Документ опубликован 2020.11.05
Текущий бюллетень: 2020-11  
Все публикации: 036396  
Реестр евразийского патента: 036396  

(22)2015.07.31
(51) C07K 16/28 (2006.01)
C12N 15/13 (2006.01)
A61K 39/395 (2006.01)
A61P 35/00 (2006.01)
A61P 37/04 (2006.01)
G01N 33/577 (2006.01)
C12N 1/21 (2006.01)
C12N 5/10 (2006.01)
C12N 15/63 (2006.01)
C07K 19/00(2006.01)
(43)A1 2017.06.30 Бюллетень № 06  тит.лист, описание 
(45)B1 2020.11.05 Бюллетень № 11  тит.лист, описание  последовательности 
(31)201410377352.9
(32)2014.08.01
(33)CN
(86)CN2015/085721
(87)2016/015675 2016.02.04
(71)АКЕСО БАЙОФАРМА, ИНК. (CN)
(72)Ли Байюн, Ся Юй, Ван Чжунминь, Чжан Пэн, Пан Синхуа (CN)
(73)АКЕСО БАЙОФАРМА, ИНК. (CN)
(74)Медведев В.Н. (RU)
(54)АНТИ-CTLA4 МОНОКЛОНАЛЬНОЕ АНТИТЕЛО ИЛИ ЕГО АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩИЙ ФРАГМЕНТ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ
   Формула 
(57) 1. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые связываются с CTLA4 человека, содержащие вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, где:
(a) вариабельная область тяжелой цепи содержит
HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 27,
HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 28, и
HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29; и
(b) вариабельная область легкой цепи содержит
LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30,
LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 31, и
LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 33 и SEQ ID NO: 34.
2. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.1, где вариабельная область тяжелой цепи и вариабельная область легкой цепи выбраны из группы, состоящей из:
(a) вариабельной области тяжелой цепи, содержащей HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 27, HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 28, и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29, и вариабельной области легкой цепи, содержащей LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30, LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 31, и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 32;
(b) вариабельной области тяжелой цепи, содержащей HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 27, HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 28, и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29, и вариабельной области легкой цепи, содержащей LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30, LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 31, и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 33; и
(с) вариабельной области тяжелой цепи, содержащей HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 27, HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 28, и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29, и вариабельной области легкой цепи, содержащей LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30, LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 31, и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 34.
3. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.2, где антителом является антитело, содержащее вариабельную область тяжелой цепи, содержащую HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 27, HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 28, и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29, вариабельную область легкой цепи, содержащую LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30, LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 31, и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 32.
4. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-3, где аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 10 и любой из SEQ ID NO: 14, 6 и 10, где метионин в аминокислотном положении 18 SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 6 и SEQ ID NO: 10 заменен лейцином, и аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) выбрана из SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 8 и SEQ ID NO: 12.
5. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-4, где вариабельная область тяжелой цепи и вариабельная область легкой цепи выбраны из группы, состоящей из:
(a) вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 6 и вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 8;
(b) вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 10 и вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 12;
(c) вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 14 и вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 16;
(d) вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 18 и вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 20;
(e) вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 14 и вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 22; и
(f) вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 14 и вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 24;
g) вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 6, где метионин в аминокислотном положении 18 заменен лейцином, и вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 8;
(h) вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 10, где метионин в аминокислотном положении 18 заменен лейцином, и вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 12;
(i) вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 14, где метионин в аминокислотном положении 18 заменен лейцином, и вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 16;
(k) вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 14, где метионин в аминокислотном положении 18 заменен лейцином, и вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 22; и
(l) вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 14, где метионин в аминокислотном положении 18 заменен лейцином, и вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 24.
6. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-5, которое связывается с CTLA4 человека, содержащее вариабельную область тяжелой цепи SEQ ID NO: 14, где метионин в положении 18 SEQ ID NO: 14 заменен лейцином, и вариабельную область легкой цепи SEQ ID NO: 16.
7. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-6, которое представляет собой гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент.
8. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-7, которые связываются с CTLA4 человека с KD менее чем примерно 10-5 М, как определено при помощи поверхностного плазмонного резонанса.
9. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-8, где антитело или его антигенсвязывающий фрагмент:
(a) блокирует связывание CTLA4 с В7;
(b) регулирует активность CTLA4;
(c) снимает иммуносупрессию организма CTLA4;
(d) активирует Т-лимфоциты, и/или
(e) повышает уровень экспрессии IL-2 в Т-лимфоцитах.
10. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая вариабельную область тяжелой цепи антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-5, где выделенная молекула нуклеиновой кислоты содержит:
(a) нуклеотидную последовательность, кодирующую вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 18 или SEQ ID NO: 6, 10 или 14, где метионин в аминокислотном положении 18 каждой из SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 6 и SEQ ID NO: 10 заменен лейцином; или
(b) нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 13 и SEQ ID NO: 17.
11. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая вариабельную область легкой цепи антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-5, где выделенная молекула нуклеиновой кислоты содержит:
(а) нуклеотидную последовательность, кодирующую вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22 и SEQ ID NO: 24; или
(b) нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21 и SEQ ID NO: 23.
12. Вектор экспрессии, содержащий выделенную молекулу нуклеиновой кислоты по п.10 и/или 11.
13. Клетка-хозяин, содержащая выделенную молекулу нуклеиновой кислоты по п.10 и/или 11 или вектор по п.12.
14. Способ получения антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-9, включающий культивирование клетки-хозяина в подходящих условиях, где клетка хозяин содержит:
i) нуклеотидную последовательность, кодирующую вариабельную область тяжелой цепи антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, где:
(a) нуклеотидная последовательность кодирует вариабельную область тяжелой цепи антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, представленную аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 14 SEQ ID NO: 18; или
(b) нуклеотидная последовательность кодирует вариабельную область тяжелой цепи антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, представленную аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 10, и SEQ ID NO: 14, где метионин в аминокислотном положении 18 каждой из SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 10 и SEQ ID NO: 14 заменен лейцином, или
(c) нуклеотидная последовательность выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 13 и SEQ ID NO: 17; и
ii) нуклеотидную последовательность, кодирующую вариабельную область легкой цепи антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, где:
(а) нуклеотидная последовательность кодирует вариабельную область легкой цепи антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, представленную аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22 и SEQ ID NO: 24; или
(b) нуклеотидная последовательность кодирует вариабельную область легкой цепи антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, представленную аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21 и SEQ ID NO: 23; и
выделение антитела или его антигенсвязывающего фрагмента из культуры клеток.
15. Фармацевтическая композиция для блокирования связывания CTLA4 с В7, содержащая антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-9 и фармацевтически приемлемый носитель и/или вспомогательное вещество.
16. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания, связанного с повышенной активностью CTLA4, содержащая антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-9 и фармацевтически приемлемый носитель и/или вспомогательное вещество.
17. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания, связанного с повышенной активностью CTLA4, где заболеванием является меланома, опухоль почки, рак простаты, рак мочевого пузыря, колоректальный рак, рак желудочно-кишечного тракта или рак печени, где фармацевтическая композиция содержит антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-9 и фармацевтически приемлемый носитель и/или вспомогательное вещество.
18. Способ лечения заболевания, связанного с повышенной активностью CTLA4, у субъекта-человека, включающий в себя введение этому субъекту эффективного количества антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, где антитело или его антигенсвязывающий фрагмент связывается с CTLA4 человека и содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, где:
(а) вариабельная область тяжелой цепи содержит
HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 27,
HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 28, и
HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29; и
(b) вариабельная область легкой цепи содержит
LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30,
LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 31, и
LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 33 и SEQ ID NO: 34.
19. In vitro способ блокирования связывания CTLA4 с В7, включающий следующие стадии:
(a) обнаружения уровня CTLA4 в образце;
(b) введения в клетки эффективного количества антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-9, таким образом блокируя связывание CTLA4 с В7.
20. In vitro способ регуляции активности CTLA4 или уровня CTLA4, включающий следующие стадии:
(a) обнаружения уровня CTLA4 в образце;
(b) введения в клетки эффективного количества антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-9, таким образом регулируя активность CTLA4 или уровень CTLA4.
21. Применение антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-9 для изготовления лекарственного препарата для лечения заболевания, связанного с повышенной активностью CTLA4.
22. Применение антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-9 для изготовления лекарственного препарата для лечения заболевания, связанного с повышенной активностью CTLA4, где заболеванием является меланома, опухоль почки, рак простаты, рак мочевого пузыря, колоректальный рак, рак желудочно-кишечного тракта или рак печени.