Евразийский сервер публикаций

Евразийский патент № 035896

   Библиографические данные
(11)035896    (13) B1
(21)201791775

 A ]   B ]   C ]   [ D ]   E ]   F ]   G ]   H ] 

Текущий раздел: C     


Документ опубликован 2020.08.27
Текущий бюллетень: 2020-08  
Все публикации: 035896  
Реестр евразийского патента: 035896  

(22)2016.02.12
(51) C12N 9/24(2006.01)
(43)A1 2018.02.28 Бюллетень № 02  тит.лист, описание 
(45)B1 2020.08.27 Бюллетень № 08  тит.лист, описание  последовательности 
(31)1502305.4
(32)2015.02.12
(33)GB
(86)EP2016/053054
(87)2016/128559 2016.08.18
(71)ХАНСА МЕДИКАЛ АБ (SE)
(72)Челльман Кристиан, Ярнум София, Нордаль Эмма (SE)
(73)ХАНСА БИОФАРМА АБ (SE)
(74)Осипов К.В., Ильмер Е.Г., Пантелеев А.С., Хмара М.В., Дощечкина В.В., Новоселова С.В., Липатова И.И. (RU)
(54)ЦИСТЕИНОВАЯ ПРОТЕАЗА
   Формула 
(57) 1. Полипептид, обладающий активностью цистеиновой протеазы в отношении IgG и включающий вариант последовательности SEQ ID NO: 4 или 5, причем этот вариант:
(a) по меньшей мере на 85% идентичен SEQ ID NO: 4 или 5;
(b) имеет цистеин (C) в том положении указанного варианта последовательности, которое соответствует положению 102 в SEQ ID NO: 3; и
(c) имеет в тех положениях указанного варианта последовательности, которые соответствуют положениям 92, 272, 294 и 296 в SEQ ID NO: 3, лизин (K), гистидин (H), аспарагиновую кислоту (D) и аспарагиновую кислоту (D) соответственно,
где указанный полипептид более эффективно расщепляет человеческий IgG, чем IdeZ, и/или, по меньшей мере, расщепляет человеческий IgG с той же эффективностью, что и IdeS; и
в котором указанный вариант последовательности SEQ ID NO: 4 или 5:
(1) имеет положительно заряженную аминокислоту в том положении варианта, которое соответствует положению 138 в SEQ ID NO: 3; и/или
(2) имеет положительно заряженную аминокислоту в том положении варианта, которое соответствует положению 139 в SEQ ID NO: 3; и/или
(3) с полностью удаленными первыми двадцатью остатками на N-конце (содержащими непрерывную последовательность DDYQRNATEA YAKEVPHQIT); и/или
(4) имеет по меньшей мере одну из следующих модификаций:
i. удаление остатков лейцина (L) и треонина (T) в тех положениях указанного варианта, которые соответствуют положениям 64 и 65 в SEQ ID NO: 3;
ii. треонин (T) вместо аргинина (R) в том положении варианта, которое соответствует положению 70 в SEQ ID NO: 3;
iii. удаление тирозина (Y) в том положении варианта, которое соответствует положению 71 в SEQ ID NO: 3;
iv. глутамин (Q) вместо аспарагина (N) в том положении варианта, которое соответствует положению 72 в SEQ ID NO: 3;
v. глицин (G) вместо аспарагина (N) в том положении варианта, которое соответствует положению 73 в SEQ ID NO: 3;
vi. аланин (A) вместо глутаминовой кислоты (E) в том положении варианта, которое соответствует положению 67 в SEQ ID NO: 3;
vii. аспарагин (N) вместо глутамина (Q) в том положении варианта, которое соответствует положению 68 в SEQ ID NO: 3.
2. Полипептид, обладающий активностью цистеиновой протеазы в отношении IgG и включающий вариант последовательности SEQ ID NO: 4, причем этот вариант:
(a) по меньшей мере на 80% идентичен SEQ ID NO: 4;
(b) имеет цистеин (C) в том положении указанного варианта последовательности, которое соответствует положению 102 в SEQ ID NO: 3; и
(c) имеет в тех положениях указанного варианта последовательности, которые соответствуют положениям 92, 272, 294 и 296 в SEQ ID NO: 3, лизин (K), гистидин (H), аспарагиновую кислоту (D) и аспарагиновую кислоту (D) соответственно,
где указанный полипептид более эффективно расщепляет человеческий IgG, чем IdeZ, и/или, по меньшей мере, расщепляет человеческий IgG с той же эффективностью, что и IdeS; и
в котором указанный вариант последовательности SEQ ID NO: 4:
(1) имеет положительно заряженную аминокислоту в том положении варианта, которое соответствует положению 138 в SEQ ID NO: 3; и/или
(2) имеет положительно заряженную аминокислоту в том положении варианта, которое соответствует положению 139 в SEQ ID NO: 3; и/или
(3) с полностью удаленными первыми двадцатью остатками на N-конце (содержащими непрерывную последовательность DDYQRNATEA YAKEVPHQIT); и/или
(4) имеет по меньшей мере одну из следующих модификаций:
i. удаление остатков лейцина (L) и треонина (T) в тех положениях указанного варианта, которые соответствуют положениям 64 и 65 в SEQ ID NO: 3;
ii. треонин (T) вместо аргинина (R) в том положении варианта, которое соответствует положению 70 в SEQ ID NO: 3;
iii. удаление тирозина (Y) в том положении варианта, которое соответствует положению 71 в SEQ ID NO: 3;
iv. глутамин (Q) вместо аспарагина (N) в том положении варианта, которое соответствует положению 72 в SEQ ID NO: 3;
v. глицин (G) вместо аспарагина (N) в том положении варианта, которое соответствует положению 73 в SEQ ID NO: 3;
vi. аланин (A) вместо глутаминовой кислоты (E) в том положении варианта, которое соответствует положению 67 в SEQ ID NO: 3;
vii. аспарагин (N) вместо глутамина (Q) в том положении варианта, которое соответствует положению 68 в SEQ ID NO: 3.
3. Полипептид, обладающий активностью цистеиновой протеазы в отношении IgG и включающий вариант последовательности SEQ ID NO: 5, причем этот вариант:
(a) по меньшей мере на 85% идентичен SEQ ID NO: 5;
(b) имеет цистеин (С) в том положении указанного варианта последовательности, которое соответствует положению 102 в SEQ ID NO: 3; и
(c) имеет в тех положениях указанного варианта последовательности, которые соответствуют положениям 92, 272, 294 и 296 в SEQ ID NO: 3, лизин (K), гистидин (H), аспарагиновую кислоту (D) и аспарагиновую кислоту (D) соответственно,
где указанный полипептид более эффективно расщепляет человеческий IgG, чем IdeZ, и/или, по меньшей мере, расщепляет человеческий IgG с той же эффективностью, что и IdeS.
4. Полипептид по п.3, в котором указанный вариант последовательности SEQ ID NO: 5:
(1) имеет положительно заряженную аминокислоту в том положении варианта, которое соответствует положению 138 в SEQ ID NO: 3; и/или
(2) имеет положительно заряженную аминокислоту в том положении варианта, которое соответствует положению 139 в SEQ ID NO: 3; и/или
(3) с полностью удаленными первыми двадцатью остатками на N-конце (содержащими непрерывную последовательность DDYQRNATEA YAKEVPHQIT); и/или
(4) имеет по меньшей мере одну из следующих модификаций:
i. удаление остатков лейцина (L) и треонина (T) в тех положениях указанного варианта, которые соответствуют положениям 64 и 65 в SEQ ID NO: 3;
ii. треонин (T) вместо аргинина (R) в том положении варианта, которое соответствует положению 70 в SEQ ID NO: 3;
iii. удаление тирозина (Y) в том положении варианта, которое соответствует положению 71 в SEQ ID NO: 3;
iv. глутамин (Q) вместо аспарагина (N) в том положении варианта, которое соответствует положению 72 в SEQ ID NO: 3;
v. глицин (G) вместо аспарагина (N) в том положении варианта, которое соответствует положению 73 в SEQ ID NO: 3;
vi. аланин (A) вместо глутаминовой кислоты (E) в том положении варианта, которое соответствует положению 67 в SEQ ID NO: 3;
vii. аспарагин (N) вместо глутамина (Q) в том положении варианта, которое соответствует положению 68 в SEQ ID NO: 3.
5. Полипептид по любому из пп.1-4, где указанный вариант имеет положительно заряженную аминокислоту в том положении варианта, которое соответствует положению 138 в SEQ ID NO: 3, и положительно заряженная аминокислота представляет собой аргинин (R) или лизин (K), и/или где указанный вариант имеет положительно заряженную аминокислоту в том положении варианта, которое соответствует положению 139 в SEQ ID NO: 3, и положительно заряженная аминокислота представляет собой аргинин (R) или лизин (K).
6. Полипептид по любому из пп.1-5, в котором вариант последовательности SEQ ID NO: 4 или 5 по меньшей мере на 90, 95 или 99% идентичен SEQ ID NO: 4 или 5, соответственно, и/или указанный полипептид обладает меньшей иммуногенностью, чем IdeS, и предпочтительно не большей иммуногенностью, чем IdeZ или IdeS/Z, причем иммуногенность определяют с помощью одного и того же анализа.
7. Полипептид по любому из пп.1-6, который включает или состоит из любой из последовательностей SEQ ID NO: 6-25, где указанная последовательность необязательно включает дополнительный метионин на N-конце и/или гистидиновую метку на C-конце.
8. Полипептид по любому из пп.1-7, отличающийся тем, что полипептид по меньшей мере в 2,0 раза более эффективно, чем IdeZ, расщепляет человеческий IgG, причем расщепление оценивают с помощью одного и того же анализа.
9. Полипептид по любому из пп.1-8, который обладает меньшей иммуногенностью, чем IdeS, и предпочтительно иммуногенность указанного полипептида составляет не более 85% от иммуногенности IdeS, определяемой с помощью одного и того же анализа.
10. Полинуклеотид или экспрессионный вектор, который включает последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую полипептид по любому из пп.1-9.
11. Клетка-хозяин, включающая полинуклеотид или экспрессионный вектор по п.10, которая предпочтительно представляет собой бактериальную клетку, наиболее предпочтительно клетку E.coli.
12. Композиция, включающая полипептид по любому из пп.1-9 и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.
13. Применение полипептида по любому из пп.1-9 для лечения человека или животного.
14. Способ профилактики или лечения заболевания или состояния у субъекта, отличающийся тем, что способ включает введение полипептида по любому из пп.1-9 в профилактически или терапевтически эффективном количестве.
15. Способ по п.14, где указанное заболевание или состояние представляет собой заболевание или состояние, полностью или частично опосредуемое патогенными IgG антителами, и предпочтительно заболевание или состояние упомянуто в табл. D.
16. Способ расщепления IgG, который включает контакт образца, содержащего IgG, с полипептидом по любому из пп.1-9 в условиях, позволяющих проявиться активности IgG-цистеиновой протеазы.
17. Способ по п.16, который выполняют ex vivo и/или выполняют для получения Fc и Fab фрагментов и/или в котором образец представляет собой образец крови, отобранный у субъекта, имеющего заболевание или состояние, определенное в п.15.