Евразийский сервер публикаций

Евразийский патент № 035563

   Библиографические данные
(11)035563    (13) B1
(21)201200199

 A ]   B ]   C ]   D ]   E ]   F ]   G ]   H ] 

Текущий раздел: C     


Документ опубликован 2020.07.08
Текущий бюллетень: 2020-07  
Все публикации: 035563  
Реестр евразийского патента: 035563  

(22)2010.07.30
(51) C07K 14/235 (2006.01)
C12N 15/82(2006.01)
(43)A1 2012.06.29 Бюллетень № 06  тит.лист, описание 
(45)B1 2020.07.08 Бюллетень № 07  тит.лист, описание 
(31)61/230,659
(32)2009.07.31
(33)US
(86)US2010/043871
(87)2011/014749 2011.02.03
(71)БАСФ АГРИКАЛЧЕРАЛ СОЛЮШНС СИД ЮС ЛЛК (US)
(72)Сэмпсон Кимберли С., Томсо Дэниел Джон, Го Жун (US)
(73)БАСФ АГРИКАЛЧЕРАЛ СОЛЮШНС СИД ЮС ЛЛК (US)
(74)Веселицкий М.Б., Веселицкая И.А., Кузенкова Н.В., Каксис Р.А., Белоусов Ю.В., Куликов А.В., Кузнецова Е.В. (RU)
(54)МОЛЕКУЛА РЕКОМБИНАНТНОЙ НУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ, КОДИРУЮЩЕЙ ПОЛИПЕПТИД С ПЕСТИЦИДНОЙ АКТИВНОСТЬЮ ПРОТИВ ЧЕШУЕКРЫЛЫХ, ЖЕСТКОКРЫЛЫХ ИЛИ НЕМАТОДНЫХ ВРЕДИТЕЛЕЙ, ЕЕ ПОЛУЧЕНИЕ И ПРИМЕНЕНИЕ
   Формула 
(57) 1. Молекула рекомбинантной нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид с пестицидной активностью против чешуекрылых, жесткокрылых или нематодных вредителей, содержащая нуклеотидную последовательность, выбранную из:
a) нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:7 или комплементарной ей последовательности;
b) нуклеотидной последовательности, которая кодирует полипептид, включающий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:34 или 35;
c) нуклеотидной последовательности, которая кодирует полипептид, включающий аминокислотную последовательность, идентичную по меньшей мере на 95% аминокислотной последовательности SEQ ID NO:34 или 35, где указанная аминокислотная последовательность обеспечивает полипептиду пестицидную активность против чешуекрылых, жесткокрылых или нематодных вредителей; и
d) нуклеотидной последовательности, гибридизирующейся с последовательностью, комплементарной нуклеотидной последовательности согласно (а), (b) или (с), в жестких условиях, где указанные жесткие условия включают гибридизацию в 50%-ном формамиде, 1 M NaCl, 1% SDS при 37°C и промывку в 0,1´SSC при 60-65°C.
2. Молекула рекомбинантной нуклеиновой кислоты по п.1, где указанная нуклеотидная последовательность является синтетической последовательностью, которая предназначена для экспрессии в растении.
3. Молекула рекомбинантной нуклеиновой кислоты по п.1, где указанная нуклеотидная последовательность функционально связана с промотором, регулирующим экспрессию указанной нуклеотидной последовательности в растительной клетке.
4. Кассета экспрессии, содержащая молекулу рекомбинантной нуклеиновой кислоты по п.3.
5. Кассета экспрессии по п.4, дополнительно включающая молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую гетерологичный полипептид.
6. Клетка-хозяин, которая содержит кассету экспрессии по п.4.
7. Клетка-хозяин по п.6, которая представляет собой бактериальную клетку-хозяина.
8. Клетка-хозяин по п.6, которая представляет собой растительную клетку.
9. Трансгенное растение, включающее молекулу рекомбинантной нуклеиновой кислоты по любому из пп.1-3.
10. Трансгенное растение по п.9, где указанное растение выбрано из кукурузы, сорго, пшеницы, капусты, подсолнечника, томата, крестоцветных, перцев, картофеля, хлопчатника, риса, сои, сахарной свеклы, сахарного тростника, табака, ячменя или масличного рапса.
11. Рекомбинантный полипептид с пестицидной активностью против чешуекрылых, жесткокрылых или нематодных вредителей, выбранный из группы, состоящей из:
a) полипептида, включающего аминокислотную последовательность SEQ ID NO:34 или 35;
b) полипептида, включающего аминокислотную последовательность, идентичную по меньшей мере на 95% аминокислотной последовательности SEQ ID NO:34 или 35;
c) полипептида, кодируемого нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO:7; и полипептида, кодируемого нуклеотидной последовательностью, гибридизирующейся с последовательностью, комплементарной нуклеотидной последовательности согласно (а), (b) или (с), в жестких условиях, где указанные жесткие условия включают гибридизацию в 50%-ном формамиде, 1 М NaCl, 1% SDS при 37°C и промывку в 0,1´SSC при 60-65°C; и
d) полипептида, кодируемого нуклеотидной последовательностью, гибридизирующейся с последовательностью, комплементарной нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:7, в жестких условиях.
12. Полипептид по п.11, дополнительно включающий гетерологичные аминокислотные последовательности.
13. Антитело, которое селективно связывается с полипептидом по п.11.
14. Композиция для борьбы с чешуекрылыми, жесткокрылыми или нематодными вредителями, включающая полипептид по п.11.
15. Композиция по п.14, выполненная в форме, выбранной из порошка, пылевидного препарата, пеллеты, гранулы, раствора для опрыскивания, эмульсии, коллоида или раствора.
16. Композиция по п.14, приготовленная путем высушивания, лиофилизации, гомогенизации, экстракции, фильтрации, центрифугирования, седиментации или концентрирования культуры клеток по п.6.
17. Композиция по п.14, включающая приблизительно от 1 до 99 вес.% указанного полипептида.
18. Способ борьбы с популяцией чешуекрылых, жесткокрылых или нематодных вредителей, включающий осуществление контакта указанной популяции с пестицидно-эффективным количеством полипептида по п.11.
19. Способ получения полипептида по п.11, включающий культивирование клетки-хозяина по п.6 в условиях, в которых экспрессируется молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая указанный полипептид.
20. Растение с устойчиво-интегрированной в его геном конструкцией ДНК, включающей нуклеотидную последовательность, которая кодирует полипептид с пестицидной активностью против чешуекрылых, жесткокрылых или нематодных вредителей, где указанная нуклеотидная последовательность выбрана из группы, состоящей из:
a) нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:7;
b) нуклеотидной последовательности, которая кодирует полипептид, включающий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:34 или 35;
c) нуклеотидной последовательности, которая кодирует полипептид, включающий аминокислотную последовательность, идентичную по меньшей мере на 95% аминокислотной последовательности SEQ ID NO:34 или 35, где указанная аминокислотная последовательность обеспечивает полипептиду пестицидную активность против чешуекрылых, жесткокрылых или нематодных вредителей; и
d) нуклеотидной последовательности, гибридизирующейся с последовательностью, комплементарной нуклеотидной последовательности согласно (а), (b) или (с), в жестких условиях, где указанные жесткие условия включают гибридизацию в 50%-ном формамиде, 1 M NaCl, 1% SDS при 37°C и промывку в 0,1´SSC при 60-65°C;
где указанная нуклеотидная последовательность функционально связана с промотором, регулирующим экспрессию указанной нуклеотидной последовательности в растительной клетке.
21. Семя растения по п.20.
22. Способ защиты растения от чешуекрылых, жесткокрылых или нематодных вредителей, включающий экспрессию в клетках растения по меньшей мере одного вектора экспрессии, содержащего нуклеотидную последовательность, которая кодирует пестицидный полипептид против чешуекрылых, жесткокрылых или нематодных вредителей, где указанная нуклеотидная последовательность выбрана из группы, состоящей из:
a) нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:7;
b) нуклеотидной последовательности, которая кодирует полипептид, включающий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:34 или 35;
c) нуклеотидной последовательности, которая кодирует полипептид, включающий аминокислотную последовательность, идентичную по меньшей мере на 95% аминокислотной последовательности SEQ ID NO:34 или 35, где указанная аминокислотная последовательность обеспечивает полипептиду пестицидную активность против чешуекрылых, жесткокрылых или нематодных вредителей; и
d) нуклеотидной последовательности, гибридизирующейся с последовательностью, комплементарной нуклеотидной последовательности согласно (а), (b) или (с), в жестких условиях, где указанные жесткие условия включают гибридизацию в 50%-ном формамиде, 1 M NaCl, 1% SDS при 37°C и промывку в 0,1´SSC при 60-65°C.
23. Способ увеличения урожайности растения, включающий выращивание в поле семян указанного растения с устойчиво-включенной в его геном конструкцией ДНК, включающей нуклеотидную последовательность, которая кодирует полипептид с пестицидной активностью против чешуекрылых, жесткокрылых или нематодных вредителей, где указанная нуклеотидная последовательность выбрана из группы, состоящей из:
a) нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:7;
b) нуклеотидной последовательности, которая кодирует полипептид, включающий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:34 или 35;
c) нуклеотидной последовательности, которая кодирует полипептид, включающий аминокислотную последовательность, идентичную по меньшей мере на 95% аминокислотной последовательности SEQ ID NO:34 или 35, где указанная аминокислотная последовательность обеспечивает полипептиду пестицидную активность против чешуекрылых, жесткокрылых или нематодных вредителей; и
d) нуклеотидной последовательности, гибридизирующейся с последовательностью, комплементарной нуклеотидной последовательности согласно (а), (b) или (с), в жестких условиях, где указанные жесткие условия включают гибридизацию в 50%-ном формамиде, 1 M NaCl, 1% SDS при 37°C и промывку в 0,1´SSC при 60-65°C;
где указанное поле заражено чешуекрылым, жесткокрылым или нематодным вредителем.
24. Способ выделения молекулы рекомбинантной нуклеиновой кислоты по п.1, кодирующей полипептид с пестицидной активностью против чешуекрылых, жесткокрылых или нематодных вредителей, из образца, содержащего последовательности нуклеиновой кислоты, который включает:
a) обеспечение полинуклеотидного зонда, содержащего последовательность SEQ ID NO:7 или ее фрагмент;
b) осуществление контакта указанного образца с указанным полинуклеотидным зондом в жестких условиях гибридизации; и
c) выделение из указанного образца указанной молекулы рекомбинантной нуклеиновой кислоты, которая специфично гибридизуется с указанным полинуклеотидным зондом и которая кодирует полипептид с пестицидной активностью против чешуекрылых, жесткокрылых или нематодных вредителей.