Евразийский сервер публикаций

Евразийский патент № 035507

   Библиографические данные
(11)035507    (13) B1
(21)201650120

 A ]   B ]   C ]   D ]   E ]   F ]   G ]   H ] 

Текущий раздел: C     


Документ опубликован 2020.06.26
Текущий бюллетень: 2020-06  
Все публикации: 035507  
Реестр евразийского патента: 035507  

(22)2016.12.01
(51) C12N 1/21 (2006.01)
C12N 15/52 (2006.01)
C12N 15/55 (2006.01)
C12N 15/72 (2006.01)
C12N 9/02(2006.01)
(43)A1 2018.06.29 Бюллетень № 06  тит.лист, описание 
A8 2018.10.31 Бюллетень № 10  тит.лист, описание 
(45)B1 2020.06.26 Бюллетень № 06  тит.лист, описание  последовательности 
(96)2016000108 (RU) 2016.12.01
(71)ОБЩЕСТВО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ "ЭКСИФАРМ" (ООО "ЭКСИФАРМ") (RU)
(72)Духовлинов Илья Владимирович, Симбирцев Андрей Семенович (RU)
(73)ОБЩЕСТВО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ "ЭКСИФАРМ" (ООО "ЭКСИФАРМ") (RU)
(74)Федорова Е.А. (RU)
(54)ШТАММ-ПРОДУЦЕНТ ECSOD НА ОСНОВЕ КЛЕТОК E.coli Rosetta (DE3)pLysS И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ECSOD
   Формула 
(57) 1. Штамм-продуцент экстраклеточной супероксид-дисмутазы (ECSOD) E.coli Rosetta (DE3)pLysS, содержащий плазмидную ДНК pColdIV, которая несет ген, оптимизированный по кодонам для экспрессии в клетках E.coli и кодирующий субъединицу ECSOD, которая представлена аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 1 либо аминокислотными остатками 1-209 последовательности SEQ ID NO: 1.
2. Способ получения ECSOD, заключающийся в том, что культивируют клетки штамма-продуцента по п.1 с использованием индуктора экспрессии целевого белка, лизируют клетки, отмывают тельца включения, выделяют белок из телец включения с использованием солюбилизирующего буфера (2 М мочевина, 100 мМ трис-HCl, 5 мМ метионин, 0,013% бридж 35, рН 12,5), осуществляют анионообменную хроматографию, гидрофобную хроматографию, диализ в присутствии агента, восстанавливающего дисульфидные связи, и гель-фильтрацию в присутствии ионов Cu и Zn.