Евразийский сервер публикаций

Евразийский патент № 035419

   Библиографические данные
(11)035419    (13) B1
(21)201692504

 A ]   B ]   C ]   D ]   E ]   F ]   G ]   H ] 

Текущий раздел: C     


Документ опубликован 2020.06.10
Текущий бюллетень: 2020-06  
Все публикации: 035419  
Реестр евразийского патента: 035419  

(22)2015.05.29
(51) C07K 16/18(2006.01)
(43)A1 2017.05.31 Бюллетень № 05  тит.лист, описание 
(45)B1 2020.06.10 Бюллетень № 06  тит.лист, описание  последовательности 
(31)62/004,571; 62/008,229; 62/107,824
(32)2014.05.29; 2014.06.05; 2015.01.26
(33)US; US; US
(86)US2015/033076
(87)2015/184203 2015.12.03
(71)МЭКРОУДЖЕНИКС, ИНК. (US)
(72)Джонсон Лесли С., Хуан Лин, Чичили Гурунад Редди, Шах Калпана, Лам Чиа-Ин Као, Бёрк Стивен Джеймс, Лиу Лицинь, Мур Пол А., Бонвини Эзио, Барат Бхасвати (US)
(73)МЭКРОУДЖЕНИКС, ИНК. (US)
(74)Фелицына С.Б. (RU)
(54)ТРИСПЕЦИФИЧНЫЕ СВЯЗЫВАЮЩИЕ МОЛЕКУЛЫ И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
   Формула 
(57) 1. Триспецифичная связывающая молекула, способная иммуноспецифично связывать три различных эпитопа, включающая:
(I) четыре различные полипептидные цепи, ковалентно связанные вместе в виде комплекса;
(II) антигенсвязывающий домен I, который способен иммуноспецифично связываться с эпитопом I, присутствующем на первом антигене, и антигенсвязывающий домен II, который способен иммуноспецифично связываться с эпитопом II на втором антигене;
(III) антигенсвязывающий домен III, который способен иммуноспецифично связываться с эпитопом III на третьем антигене; и
(IV) Fc-домен, где
(A) первая полипептидная цепь содержит по направлению от N-конца к С-концу
(VLI домен)-(линкер 1)-(VHII домен)-(линкер 2)-(домен, стимулирующий гетеродимеризацию)-(линкер 3)-(CH2-CH3-домен); или
(CH2-СН3-домен)-(линкер 4)-(VLI домен)-(линкер 1)-(VHII домен)-(линкер 2)-(домен, стимулирующий гетеродимеризацию); или
(цистеинсодержащий домен)-(CH2-CH3-домен)-(линкер 4)-(VLI домен)-(линкер 1)-(VHII домен)-(линкер 2)-(домен, стимулирующий гетеродимеризацию);
(B) вторая полипептидная цепь содержит по направлению от N-конца к С-концу
(VLII домен)-(линкер 1)-(VHI домен)-(линкер 2)-(домен, стимулирующий гетеродимеризацию);
(C) третья полипептидная цепь, которая включает по направлению от N-конца к С-концу
(VHIII домен)-(цистеинсодержащий домен)-(CH2-CH3-домен);
(D) четвертая полипептидная цепь, которая включает по направлению от N-конца к С-концу
(VLIII домен)-(цистеинсодержащий домен);
(E) VLI домен представляет собой вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, способный связывать эпитоп I, VHI домен представляет собой вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, способный связывать эпитоп I, VLII домен представляет собой вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, способный связывать эпитоп II, VHII домен представляет собой вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, способный связывать эпитоп II, VLIII домен представляет собой вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, способный связывать эпитоп III, и VHIII домен представляет собой вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, способный связывать эпитоп III;
(F) VLI домен и VHI домен ассоциируются с образованием антигенсвязывающего домена I, VLII домен и VHII домен ассоциируются с образованием антигенсвязывающего домена II, VLIII домен и VHIII домен ассоциируются с образованием антигенсвязывающего домена III, и CH2-CH3-домен первой полипептидной цепи и CH2-CH3-домен третьей полипептидной цепи ассоциируются с образованием Fc-домена; и
(G) первый, второй и третий антигены являются одинаковым антигеном или независимо одинаковы или отличны от других антигенов.
2. Триспецифичная связывающая молекула по п.1, в которой цистеинсодержащая полипептидная цепь выбирается из CH1-домена и/или шарнирного домена и цистеинсодержащий домен четвертой полипептидной цепи представляет собой CL-домен.
3. Триспецифичная связывающая молекула, способная иммуноспецифически связывать три различных эпитопа, включающая:
(I) три различные полипептидные цепи, ковалентно связанные вместе в виде комплекса;
(II) антигенсвязывающий домен I, который способен иммуноспецифично связываться с эпитопом I, присутствующим на первом антигене, и антигенсвязывающий домен II, который способен иммуноспецифично связываться с эпитопом II на втором антигене;
(III) антигенсвязывающий домен III, который способен иммуноспецифично связываться с эпитопом III на третьем антигене; и
(IV) Fc-домен, где
(A) первая полипептидная цепь содержит по направлению от N-конца к С-концу
(VLI домен)-(линкер 1)-(VHII домен)-(линкер 2)-(домен, стимулирующий гетеродимеризацию)-(линкер 3)-(CH2-CH3-домен); или
(CH2-СН3-домен)-(линкер 4)-(VLI домен)-(линкер 1)-(VHII домен)-(линкер 2)-(домен, стимулирующий гетеродимеризацию); или
(цистеинсодержащий домен)-(CH2-CH3-домен)-(линкер 4)-(VLI домен)-(линкер 1)-(VHII домен)-(линкер 2)-(домен, стимулирующий гетеродимеризацию);
(B) вторая полипептидная цепь содержит по направлению от N-конца к С-концу
(VLII домен)-(линкер 1)-(VHI домен)-(линкер 2)-(домен, стимулирующий гетеродимеризацию);
(C) третья полипептидная цепь, которая включает по направлению от N-конца к С-концу
(VLIII домен)-(гибкий линкер)-(VHIII домен)-(цистеинсодержащий домен)-(CH2-CH3-домен); или
(цистеинсодержащий домен 1)-(VLIII домен)-(гибкий линкер)-(VHIII домен)-(цистеинсодержащий домен 2)-(цистеинсодержащий домен)-(CH2-CH3-домен);
(D) VLI домен представляет собой вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, способного связывать эпитоп I, VHI домен представляет собой вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, способного связывать эпитоп I, VLII домен представляет собой вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, способного связывать эпитоп II, VHII домен представляет собой вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, способного связывать эпитоп II, VLIII домен представляет собой вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, способного связывать эпитоп III, и VHIII домен представляет собой вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, способного связывать эпитоп III;
(E) VLI домен и VHI домен ассоциируются с образованием антигенсвязывающего домена I, VLII домен и VHII домен ассоциируются с образованием антигенсвязывающего домена II, VLIII домен и VHIII домен ассоциируются с образованием антигенсвязывающего домена III, и CH2-CH3-домен первой полипептидной цепи и CH2-CH3-домен третьей полипептидной цепи ассоциируются с образованием Fc-домена; и
(F) первый, второй и третий антигены являются одинаковым антигеном или независимо одинаковы или отличны от других антигенов.
4. Триспецифичная связывающая молекула по п.3, в которой цистеинсодержащий домен 1 третьей полипептидной цепи представляет собой CL-домен и цистеинсодержащий домен 2 третьей полипептидной цепи выбирают из CH1-домена и/или шарнирного домена.
5. Триспецифичная связывающая молекула, способная иммуноспецифически связывать три различных эпитопа, включающая:
(I) четыре различные полипептидные цепи, ковалентно связанные вместе в виде комплекса;
(II) антигенсвязывающий домен I, который способен иммуноспецифично связываться с эпитопом I, присутствующим на первом антигене, и антигенсвязывающий домен II, который способен иммуноспецифично связываться с эпитопом II на втором антигене;
(III) связывающий домен рецепторного типа и
(IV) Fc-домен, где
(A) первая полипептидная цепь содержит по направлению от N-конца к С-концу
(VLI домен)-(линкер 1)-(VHII домен)-(линкер 2)-(домен, стимулирующий гетеродимеризацию)-(линкер 3)-(CH2-CH3-домен); или
(CH2-СН3-домен)-(линкер 4)-(VLI домен)-(линкер 1)-(VHII домен)-(линкер 2)-(домен, стимулирующий гетеродимеризацию); или
(цистеинсодержащий домен)-(CH2-СН3-домен)-(линкер 4)-(VLI домен)-(линкер 1)-(VHII домен)-(линкер 2)-(домен, стимулирующий гетеродимеризацию);
(B) вторая полипептидная цепь содержит по направлению от N-конца к С-концу
(VLII домен)-(линкер 1)-(VHI домен)-(линкер 2)-(домен, стимулирующий гетеродимеризацию);
(C) третья полипептидная цепь, которая включает по направлению от N-конца к С-концу
(первый полипептид связывающего домена рецепторного типа)-(цистеинсодержащий домен)-(CH2-CH3-домен);
(D) четвертая цепь включает по направлению от N-конца к С-концу
(второй полипептид связывающего домена рецепторного типа)-(цистеинсодержащий домен);
(E) VLI домен представляет собой вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, способного связывать эпитоп I, VHI домен представляет собой вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, способного связывать эпитоп I, VLII домен представляет собой вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, способного связывать эпитоп II, VHII домен представляет собой вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, способного связывать эпитоп II;
(F) VLI домен и VHI домен ассоциируются с образованием антигенсвязывающего домена I, VLII домен и VHII домен ассоциируются с образованием антигенсвязывающего домена II, первый полипептид связывающего домена рецепторного типа и второй полипетид связывающего домена рецепторного типа ассоциируются с образованием связывающего домена рецепторного типа и CH2-СН3-домен первой полипептидной цепи и CH2-СН3-домен третьей полипептидной цепи ассоциируются с образованием Fc-домена; и
(G) первый, второй и третий антигены являются одинаковым антигеном или независимо одинаковы или отличны от других антигенов.
6. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.1, 2 и 5, в которой (i) первая полипептидная цепь и вторая полипептидная цепь ковалентно связаны друг с другом; (ii) первая полипептидная цепь и третья полипептидная цепь ковалентно связаны друг с другом; и (iii) третья полипептидная цепь и четвертая полипептидная цепь ковалентно связаны друг с другом.
7. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.1-6, в которой линкер 2 включает остаток цистеина, или домен, стимулирующий гетеродимеризацию, включает остаток цистеина, или линкер 2 включает остаток цистеина и домен, стимулирующий гетеродимеризацию, включает остаток цистеина.
8. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.1-7, в которой CH2-CH3-домен первой полипептидной цепи представляет собой несущий выпуклость CH2-CH3-домен и CH2-CH3-домен третьей полипептидной цепи представляет собой CH2-СН3-домен, несущий углубление; или CH2-CH3-домен третьей полипептидной цепи представляет собой несущий выпуклость CH2-CH3-домен и CH2-CH3-домен первой полипептидной цепи представляет собой CH2-CH3-домен, несущий углубление.
9. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.1-8, в которой CH2-CH3-домен первой полипептидной цепи и третьей полипептидной цепи содержат по меньшей мере одну аминокислотную замену по отношению к последовательности SEQ ID NO: 6 таким образом, что Fc-домен, образованный при их объединении, демонстрирует видоизмененную FcgR-опосредованную эффекторную функцию.
10. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.1-9, в которой
домен, содействующий гетеродимеризации, на первой полипептидной цепи является E-спиральным доменом, а домен, содействующий гетеродимеризации, на второй полипептидной цепи является K-спиральным доменом; или
домен, содействующий гетеродимеризации, на первой полипептидной цепи является K-спиральным доменом, а домен, содействующий гетеродимеризации, на второй полипептидной цепи является E-спиральным доменом.
11. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.1-10, в которой
линкер 1 включает последовательность SEQ ID NO: 1;
линкер 2 включает последовательность SEQ ID NO: 2 или 131;
домен, стимулирующий гетеродимеризацию, включает последовательность SEQ ID NO: 3, 4, 115 или 116;
линкер 3 включает последовательность SEQ ID NO: 5 или GGG;
линкер 4 включает последовательность SEQ ID NO: 15, 16, 131 или 132 или GGG;
CH2-СН3-домен включает последовательность SEQ ID NO: 7 или 8;
CH1-шарнирный домен включает последовательность SEQ ID NO: 9 или 10;
цистеинсодержащий домен включает последовательность SEQ ID NO: 2, 5, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 127, 128, 129, 130 или 133; или
комбинацию вышеуказанного.
12. Триспецифичная связывающая молекула по п.11, в которой домен, стимулирующий гетеродимеризацию, из SEQ ID NO: 115 или 116 присутствует, когда линкер 2 содержит последовательность SEQ ID NO: 131, или домен, стимулирующий гетеродимеризацию, из SEQ ID NO: 3, 4, 115 или 116 присутствует, когда линкер 2 содержит последовательность SEQ ID NO: 2.
13. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.1-12, в которой один из эпитопа I, эпитопа II или эпитопа III представляет собой эпитоп
эффекторной клетки, выбранный из числа CD2, CD3, CD16, CD19, CD20, CD22, CD32B, CD64, В-клеточного рецептора (BCR), Т-клеточного рецептора (TCR) или NKG2D-рецептора; или
CD8; или
антигена, ассоциированного с заболеванием.
14. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.1-13, в которой
(A) эпитоп I, эпитоп II и эпитоп III представляют собой, соответственно, эпитоп CD3, эпитоп CD8 и эпитоп антигена, ассоциированного с заболеванием;
(B) эпитоп I, эпитоп II и эпитоп III представляют собой, соответственно, эпитоп CD3, эпитоп антигена, ассоциированного с заболеванием, и эпитоп CD8;
(C) эпитоп I, эпитоп II и эпитоп III представляют собой, соответственно, эпитоп CD8, эпитоп CD3 и эпитоп антигена, ассоциированного с заболеванием;
(D) эпитоп I, эпитоп II и эпитоп III представляют собой, соответственно, эпитоп CD8, эпитоп антигена, ассоциированного с заболеванием, и эпитоп CD3;
(E) эпитоп I, эпитоп II и эпитоп III представляют собой, соответственно, эпитоп антигена, ассоциированного с заболеванием, эпитоп CD3 и эпитоп CD8; или
(F) эпитоп I, эпитоп II и эпитоп III представляют собой, соответственно, эпитоп антигена, ассоциированного с заболеванием, эпитоп CD8 и эпитоп CD3.
15. Триспецифичная связывающая молекула по п.13 или 14, в которой один из эпитопа I, эпитопа II или эпитопа III представляет собой эпитоп CD3 и антигенсвязывающий домен, который способен иммуноспецифически связывать эпитоп CD3, включает шесть CDR SEQ ID NO: 17 и 18; 19 и 20; 21 и 22; 23 и 25; 22 и 25; 26 и 27; 26 и 28 или 101 и 102; или содержит одну или более SEQ ID NO: 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 101 и 102.
16. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.13-15, в которой один из эпитопа I, эпитопа II или эпитопа III представляет собой эпитоп CD8 и антигенсвязывающий домен, который способен иммуноспецифически связывать эпитоп CD8, включает шесть CDR SEQ ID NO: 29 и 30; или 31 и 32; или включает одну или несколько из числа SEQ ID NO: 29, 30, 31 и 32.
17. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.13-16, в которой ассоциированный с заболеванием антиген представляет собой антиген злокачественной опухоли, который расположен на поверхности клетки злокачественной опухоли.
18. Триспецифичная связывающая молекула по п.17, в которой антиген представляет собой антиген 19.9 рака толстой кишки; антиген муцина 4.2 рака желудка; антиген A33 колоректального рака A33; ADAM-9; онкофетальный AFP антиген-a-фетопротеин; ALCAM; B7-H3; BAGE; b-катенин; СА125; карбоксипептидазу М; В1; CD5; CD19; CD20; CD22; CD23; CD25; CD27; CD28; CD30; CD33; CD36; CD40/CD154; CD45; CD56; CD46; CD52; CD79a/CD79b; CD103; CD317; CDK4; СЕА карциноэмбриональный антиген; СЕАСАМ5 и СЕАСАМ6; СО-43 (группа крови Leb) и СО-514 (группа крови Lea); CTLA-1 и CTLA-4; цитокератин 8; DR5; Е1 серии (группа крови В); рецептор эпидермального фактора роста EGF-R; рецепторы эфрина (и в частности, EphA2); Erb (ErbB1; ErbB3; ErbB4); антиген аденокарциномы легкого F3; антиген FC10.2; GAGE (GAGE-1; GAGE-2); GD2/GD3/GD49/GM2/GM3; GICA 19-9; gp37 (Т-клеточный антиген лейкоза человека); gp75 (антиген меланомы); gp100; HER-2/neu; антиген CD20 В-клеточной лимфомы человека; антиген жировых глобул человеческого молока; вирус папилломы человека-E6/вирус папилломы человека-Е7; HMW-MAA (антиген меланомы высокой молекулярной массы); I антиген (дифференцировочный антиген); I(Ма), обнаруженный при аденокарциномах желудка; интегрин a-V-b-6, интегрин b6 (ITGB6); рецептор a2 интерлейкина-13 (IL13Ra2); JAM-3; KID3; KID31; антиген KS 1/4 пан-карциномы; KSA (17-1A); антигены L6 и L20 карциномы легкого человека; LEA; LUCA-2; M1:22:25:8, M18, М39; MAGE (MAGE-1; MAGE-3); MART; Myl, MUC-1; MUM-1; N-ацетилглюкозаминилтрансферазу; неогликопротеин; NS-10; OFA-1 и OFA-2; онкостатин М (рецептор онкостатина b); r15; PSA (простат-специфический антиген); PSMA; РЕМА (антиген полиморфного эпителиального муцина); PIPA; фосфат простатической кислоты; R24; ROR1; SSEA-1, SSEA-3 и SSEA-4; sTn; пептид, выделенный из Т-клеточного рецептора; Т5А7; тканевые антигены 37; TAG-72; TL5 (группа крови А); TNF-рецептор (TNF-a рецептор, TNF-b рецептор или TNF-g рецептор); TRA-1-85 (группа крови Н); рецептор трансферрина; TSTA опухолеспецифичный трансплантационный антиген; VEGF-R, Y-гаптен, Ley или 5Т4.
19. Триспецифичная связывающая молекула по п.18, в которой один из эпитопа I, эпитопа II или эпитопа III представляет собой эпитоп B7-H3, A33, 5Т4 или ROR1 и антигенсвязывающий домен, который способен иммуноспецифически связывать эпитоп B7-H3, A33, 5Т4 или ROR1, включает шесть CDR SEQ ID NO: 39 и 40; 41 и 42; 43 и 44; 45 и 46; 47 и 48; 49 и 50; 51 и 52; 53 и 54; 55 и 56 или 57 и 58; или включает одну или несколько из числа SEQ ID NO: 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57 и 58.
20. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.13-16, отличающаяся тем, что ассоциированный с заболеванием антиген представляет собой антиген патогена, который расположен на поверхности патогена или инфицированной патогеном клетки.
21. Триспецифичная связывающая молекула по п.8, в которой патоген представляет собой вирус, и/или патоген представляет собой вирус иммунодифицита человека (HIV) или респираторный синцитиальный вирус (RSV), и/или антиген патогена представляет собой HIV gp41, HIV gp120 или RSV гликопротеин F.
22. Триспецифичная связывающая молекула по п.21, в которой один из числа эпитопа I, эпитопа II или эпитопа III представляет собой эпитоп HIV gp41, HIV gp120 или RSV гликопротеина F и антигенсвязывающий домен, который способен иммуноспецифически связывать эпитоп HTV gp41, HIV gp120 или RSV гликопротеина F, включает шесть CDR SEQ ID NO: 33 и 34; 35 и 36 или 37 и 38; или включает одну или несколько из числа SEQ ID NO: 33, 34, 35, 36, 37 и 38.
23. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.20-22, в которой эпитоп I представляет собой эпитоп HIV, эпитоп II представляет собой эпитоп CD3 и эпитоп III представляет собой эпитоп CD8, или эпитоп I представляет собой эпитоп CD3, эпитоп II представляет собой эпитоп HIV, эпитоп III представляет собой эпитоп CD8.
24. Триспецифичная связывающая молекула, включающая четыре полипептидные цепи, в которой
(A) первая полипептидная цепь, которая включает по направлению от N-конца к С-концу
(1) вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, способный связываться с эпитопом антигена 5Т4 (VLI);
(2) вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, способный связываться с эпитопом антигена CD3 (VHII);
(3) первый цистеинсодержащий домен;
(4) домен, стимулирующий гетеродимеризацию;
(5) второй цистеинсодержащий домен и
(6) CH2 и CH3-домены IgG;
(B) вторая полипептидная цепь, которая включает по направлению от N-конца к С-концу
(1) вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, способный связываться с эпитопом антигена CD3 (VLII);
(2) вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, способный связываться с эпитопом антигена 5Т4 (VHI);
(3) цистеинсодержащий домен и
(4) домен, стимулирующий гетеродимеризацию, где домен, стимулирующий гетеродимеризацию, второй полипептидной цепи комплементарен домену, стимулирующему гетеродимеризацию, первой полипептидной цепи;
(C) третья полипептидная цепь включает по направлению от N-конца к С-концу
(1) вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, способный связываться с эпитопом антигена CD8 (VHIII);
(2)CH1-домен;
(3) CH2-СН3-домен IgG; и
(D) четвертая полипептидная цепь включает по направлению от N-конца к С-концу
(1) вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, способный связываться с эпитопом антигена CD8 (VLIII); и
(2) цистеинсодержащий константный домен легкой цепи (CL); где
(i) VLI и VHI домены ассоциируются с образованием домена, способного связывать эпитоп 5Т4-антигена;
(ii) VLII и VHII домены ассоциируются с образованием домена, способного связывать эпитоп CD3-антигена;
(iii) VLIII и VHIII домены ассоциируются с образованием домена, способного связывать эпитоп CD8-антигена;
(iv) CH2-CH3-домен первой полипептидной цепи и CH2-СН3-домен третьей полипептидной цепи ассоциируются с образованием Fc-домена;
(v) первая и вторая полипептидные цепи ковалентно связаны друг с другом;
(vi) первая и третья полипептидные цепи ковалентно связаны друг с другом;
(vii) третья и четвертая полипептидные цепи ковалентно связаны друг с другом.
25. Триспецифичная связывающая молекула по п.24, в которой
VLI включает CDRL1, имеющий последовательность RASQGISNYLA, CDRL2, имеющий последовательность RANRLQS, и CDRL3, имеющий последовательность LQYDDFPWT; и
VHI включает CDRH1, имеющий последовательность GYTFTSFWMH, CDRH2, имеющий последовательность RIDPNRGGTEYNEKAKS, и CDRH3, имеющий последовательность GNPYYPMDY.
26. Триспецифичная связывающая молекула по п.24 или 25, в которой
VLI включает последовательность SEQ ID NO: 47 и VHI включает последовательность SEQ ID NO: 48;
VLII включает последовательность SEQ ID NO: 26 и VHII включает последовательность SEQ ID NO: 27 или 28;
VLIII включает последовательность SEQ ID NO: 29 и VHIII включает последовательность SEQ ID NO: 30;
VLIII включает последовательность SEQ ID NO: 31 и VHIII включает последовательность SEQ ID NO: 32;
или комбинацию вышеуказанного.
27. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.24-26, отличающаяся тем, что
первый цистеинсодержащий домен первой полипептидной цепи включает последовательность SEQ ID NO: 2, а домен, стимулирующий гетеродимеризацию, первой полипептидной цепи включает последовательность SEQ ID NO: 3;
первый цистеинсодержащий домен второй полипептидной цепи включает последовательность SEQ ID NO: 2, а домен, стимулирующий гетеродимеризацию, первой полипептидной цепи включает последовательность SEQ ID NO: 4;
CH1-домен третьей полипептидной цепи включает последовательность SEQ ID NO: 9;
CL-домен четвертой полипептидной цепи включает последовательность SEQ ID NO: 13;
CH2- и CH3-домены первой полипептидной цепи и третьей полипептидной цепи отличаются друг от друга, и каждый имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7 или SEQ ID NO: 8;
или комбинацию вышеуказанного.
28. Триспецифичная связывающая молекула по любому из пп.24-27, в которой
первая полипептидная цепь включает последовательность SEQ ID NO: 103;
вторая полипептидная цепь включает последовательность SEQ ID NO: 104;
третья полипептидная цепь включает последовательность SEQ ID NO: 105;
четвертая полипептидная цепь включает последовательность SEQ ID NO: 106.
29. Триспецифическая связывающая молекула по п.15, включающая:
(A) вариабельный домен легкой цепи, включающий CDRL1, имеющий последовательность RSSTGAVTTSNYAN, CDRL2, имеющий последовательность ALWYSNLWV; и
(B) вариабельный домен тяжелой цепи, включающий CDRH1, имеющий последовательность GFTFSTYAMN, CDRH2, имеющий последовательность RIRSKYNNYATYYADSVKG, и CDRH3, имеющий последовательность HKNFGNSYVTWFAY.
30. Триспецифическая связывающая молекула по п.29, в которой вариабельный домен легкой цепи включает последовательность SEQ ID NO: 101, а вариабельный домен тяжелой цепи включает последовательность SEQ ID NO: 102.
31. Триспецифическая связывающая молекула по п.19, включающая:
(A) вариабельный домен легкой цепи, включающий CDRL1, имеющий последовательность RASQGISNYLA, CDRL2, имеющий последовательность RANRLQS, и CDRL3, имеющий последовательность LQYDDFPWT; или CDRL1, имеющий последовательность RSSQSIVYSNGNTYLE, CDRL2, имеющий последовательность KVSNRFS, и CDRL3, имеющий последовательность FQGSHVPFT; и
(B) вариабельный домен легкой цепи, включающий CDRL1, имеющий последовательность GYTFTSFWMH, CDRL2, имеющий последовательность RIDPNRGGTEYNEKAKS, и CDRL3, имеющий последовательность GNPYYPMDY; или CDRL1, имеющий последовательность GYTFTSYWIT, CDRL2, имеющий последовательность DIYPGSGRANYNEKFKS, и CDRL3, имеющий последовательность YGPLFTTVVDPNSYAMDY.
32. Триспецифическая связывающая молекула п.31, в которой вариабельный домен легкой цепи включает последовательность SEQ ID NO: 47; вариабельный домен тяжелой цепи включает последовательность SEQ ID NO: 48; вариабельный домен легкой цепи включает последовательность SEQ ID NO: 49 и вариабельный домен тяжелой цепи включает последовательность SEQ ID NO: 50.
33. Триспецифическая связывающая молекула по п.19, включающая:
(A) вариабельный домен легкой цепи, включающий CDRL1, имеющий последовательность SEQ ID NO: 117, CDRL2, имеющий последовательность SEQ ID NO: 118, и CDRL3, имеющий последовательность SEQ ID NO: 119; и
(B) вариабельный домен тяжелой цепи, включающий CDRL1, имеющий последовательность SEQ ID NO: 120, CDRL2, имеющий последовательность SEQ ID NO: 121, и CDRL3, имеющий последовательность SEQ ID NO: 122.
34. Триспецифическая связывающая молекула по п.33, в которой вариабельный домен легкой цепи включает последовательность SEQ ID NO: 51 и вариабельный домен тяжелой цепи включает последовательность SEQ ID NO: 52.
35. Композиция нуклеиновой кислоты для лечения злокачественной опухоли или патогенной инфекции, включающая полинуклеотиды, которые кодируют полипептидные цепи триспецифичной молекулы по любому из пп.1-34.
36. Фармацевтическая композиция для лечения злокачественной опухоли или патогенной инфекции, включающая триспецифичную связывающую молекулу по любому из пп.1-34 и и фармацевтически приемлемый носитель, вспомогательное вещество или разбавитель.
37. Применение триспецифичной связывающей молекулы по любому из пп.1-34 в качестве медикамента для лечения злокачественной опухоли или патогенной инфекции.
38. Применение композиции по п.36 в качестве медикамента для лечения злокачественной опухоли или патогенной инфекции.
39. Применение триспецифичной связывающей молекулы по любому из пп.1-34 для изготовления медикамента для лечения злокачественной опухоли или патогенной инфекции.
40. Применение композиции по п.36 для изготовления медикамента для лечения злокачественной опухоли или патогенной инфекции.
Zoom in