Евразийский сервер публикаций

Евразийский патент № 035103

   Библиографические данные
(11)035103    (13) B1
(21)201071323

 A ]   B ]   C ]   D ]   E ]   F ]   G ]   H ] 

Текущий раздел: C     


Документ опубликован 2020.04.28
Текущий бюллетень: 2020-04  
Все публикации: 035103  
Реестр евразийского патента: 035103  

(22)2009.07.02
(51) C07K 14/325 (2006.01)
C12N 15/82 (2006.01)
A01H 5/00(2006.01)
(43)A1 2011.06.30 Бюллетень № 03  тит.лист, описание 
(45)B1 2020.04.28 Бюллетень № 04  тит.лист, описание  последовательности 
(31)61/077,812; 61/158,953
(32)2008.07.02; 2009.03.10
(33)US; US
(86)US2009/049527
(87)2010/003065 2010.01.07
(71)АТЕНИКС КОРПОРЕЙШН (US)
(72)Сэмпсон Кимберли С., Агарвал Шрути, Кэмпбелл Крис, МакНалти Брайан, Томсо Дэниел Дж., Кароцци Надин, Харджисс Трейси, Козил Майкл Г., Дак Николас Б., Хайнрихс Фолькер (US)
(73)АТЕНИКС КОРПОРЕЙШН (US)
(74)Медведев В.Н. (RU)
(54)ИНСЕКТИЦИДНЫЙ ПОЛИПЕПТИД AXMI-115 ДЕЛЬТА-ЭНДОТОКСИНА И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ
   Формула 
(57) 1. Выделенная или рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты, которая включает нуклеотидную последовательность, кодирующую инсектицидный полипептид AXMI-115 дельта-эндотоксина, выбранную из
a) нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 3 или комплементарной ей последовательности;
b) нуклеотидной последовательности, которая по меньшей мере на 90% идентична последовательности SEQ ID NO: 3, или комплементарной ей последовательности;
c) нуклеотидной последовательности, которая кодирует полипептид с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 6;
d) нуклеотидной последовательности, которая кодирует полипептид с аминокислотной последовательностью, идентичной по меньшей мере на 90% последовательности SEQ ID NO: 6;
e) нуклеотидной последовательности, которая кодирует полипептид с вариантной аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 6, образованной путем обмена одного или более доменов последовательностей SEQ ID NO: 4, 5, 13 или 14 с соответствующим доменом(ами) последовательности SEQ ID NO: 6, где указанные домены выбраны из доменов, обозначенных на фиг. 2; и
f) нуклеотидной последовательности, способной гибридизоваться с нуклеотидной последовательностью, комплементарной последовательности по п/п.b), в жестких условиях, которые включают гибридизацию в 50% формамиде, 1М NaCl, 1% SDS при 37°С и промывку в 0,1´SSC при 60-65°С.
2. Выделенная или рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты по п.1, в которой указанная нуклеотидная последовательность функционально связана с промотором, управляющим экспрессией нуклеотидной последовательности в клетке растения.
3. Выделенная или рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты по п.1 или 2, в которой указанная нуклеотидная последовательность представляет собой синтетическую последовательность, разработанную для экспрессии в растении.
4. Выделенная или рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты по п.1, в которой указанная нуклеотидная последовательность выбрана из SEQ ID NO: 15 или 16.
5. Экспрессионная кассета, включающая молекулу нуклеиновой кислоты по п.1 или 2.
6. Экспрессионная кассета по п.5, дополнительно содержащая молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую гетерологичный полипептид.
7. Бактериальная клетка-хозяин, содержащая экспрессионную кассету по п.5.
8. Выделенный полипептид AXMI-115 дельта-эндотоксина с инсектицидной активностью, выбранный из
a) полипептида с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 6;
b) полипептида с аминокислотной последовательностью, которая по меньшей мере на 90% идентична последовательности SEQ ID NO: 6;
c) полипептида, который кодируется нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 3;
d) полипептида, который кодируется нуклеотидной последовательностью, идентичной по меньшей мере на 90% последовательности SEQ ID NO: 3; и
e) полипептида с вариантной аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 6, образованной путем обмена одного или более доменов последовательностей SEQ ID NO: 4, 5, 13 или 14 с соответствующим доменом(ами) последовательности SEQ ID NO: 6, где указанные домены выбраны из доменов, обозначенных на фиг. 2.
9. Антитело, которое селективно связывается с полипептидом по п.8.
10. Инсектицидная композиция, включающая полипептид по п.8.
11. Композиция по п.10, выполненная в форме порошка, присыпки, пеллеты, гранулы, спрея, эмульсии, коллоида или раствора.
12. Способ контроля или уничтожения популяции чешуекрылых или жесткокрылых насекомых-вредителей, включающий приведение указанной популяции в контакт с инсектицидно эффективным количеством полипептида по п.8, где указанное инсектицидно эффективное количество способно вызвать гибель по меньшей мере одного чешуекрылого или жесткокрылого насекомого-вредителя или способно заметно замедлить рост, питание или нормальное физиологическое развитие чешуекрылого или жесткокрылого насекомого-вредителя.
13. Способ получения полипептида с инсектицидной активностью, включающий культивирование клетки-хозяина по п.7 в условиях, при которых экспрессируется молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид с инсектицидной активностью.
14. Растение или растительная клетка, содержащие стабильно встроенную в свой геном конструкцию ДНК, которая включает нуклеотидную последовательность, кодирующую инсектицидный полипептид, выбранную из
a) нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 3 или комплементарной ей последовательности;
b) нуклеотидной последовательности, которая по меньшей мере на 90% идентична последовательности SEQ ID NO: 3, или комплементарной ей последовательности;
c) нуклеотидной последовательности, которая кодирует полипептид с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 6;
d) нуклеотидной последовательности, которая кодирует полипептид с аминокислотной последовательностью, идентичной по меньшей мере на 90% последовательности SEQ ID NO: 6;
e) нуклеотидной последовательности, которая кодирует полипептид с вариантной аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 6, образованной путем обмена одного или более доменов последовательностей SEQ ID NO: 4, 5, 13 или 14 с соответствующим доменом(ами) последовательности SEQ ID NO: 6, где указанные домены выбраны из доменов, обозначенных на фиг. 2; и
f) нуклеотидной последовательности, способной гибридизоваться с нуклеотидной последовательностью, комплементарной последовательности по п/п.b), в жестких условиях, которые включают гибридизацию в 50% формамиде, 1М NaCl, 1% SDS при 37°С и промывку в 0,1´SSC при 60-65°С;
где указанная нуклеотидная последовательность функционально связана с промотором, управляющим ее экспрессией в клетке растения.
15. Трансгенное семя растения по п.14, включающее нуклеотидную последовательность, кодирующую инсектицидный полипептид, выбранную из
a) нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 3 или комплементарной ей последовательности;
b) нуклеотидной последовательности, которая по меньшей мере на 90% идентична последовательности SEQ ID NO: 3, или комплементарной ей последовательности;
c) нуклеотидной последовательности, которая кодирует полипептид с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 6;
d) нуклеотидной последовательности, которая кодирует полипептид с аминокислотной последовательностью, идентичной по меньшей мере на 90% последовательности SEQ ID NO: 6;
e) нуклеотидной последовательности, которая кодирует полипептид с вариантной аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 6, образованной путем обмена одного или более доменов последовательностей SEQ ID NO: 4, 5, 13 или 14 с соответствующим доменом(ами) последовательности SEQ ID NO: 6, где указанные домены выбраны из доменов, обозначенных на фиг. 2; и
f) нуклеотидной последовательности, способной гибридизоваться с нуклеотидной последовательностью, комплементарной последовательности по п/п.b), в жестких условиях, которые включают гибридизацию в 50% формамиде, 1М NaCl, 1% SDS при 37°С и промывку в 0,1´SSC при 60-65°С.
16. Растение или растительная клетка по п.14 либо трансгенное семя растения по п.15, где указанное растение выбрано из кукурузы, сорго, пшеницы, капусты, подсолнечника, помидора, крестоцветных, перцев, картофеля, хлопка, риса, сои, сахарной свеклы, сахарного тростника, табака, ячменя и масличного рапса.
17. Способ защиты растения от чешуекрылых и жесткокрылых насекомых-вредителей, включающий введение в указанное растение или его клетку по меньшей мере один экспрессионный вектор, который содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую инсектицидный полипептид, выбранную из
a) нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 3 или комплементарной ей последовательности;
b) нуклеотидной последовательности, которая по меньшей мере на 90% идентична последовательности SEQ ID NO: 3, или комплементарной ей последовательности;
c) нуклеотидной последовательности, которая кодирует полипептид с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 6;
d) нуклеотидной последовательности, которая кодирует полипептид с аминокислотной последовательностью, идентичной по меньшей мере на 90% последовательности SEQ ID NO: 6;
e) нуклеотидной последовательности, которая кодирует полипептид с вариантной аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 6, образованной путем обмена одного или более доменов последовательностей SEQ ID NO: 4, 5, 13 или 14 с соответствующим доменом(ами) последовательности SEQ ID NO: 6, где указанные домены выбраны из доменов, обозначенных на фиг. 2; и
f) нуклеотидной последовательности, способной гибридизоваться с нуклеотидной последовательностью, комплементарной последовательности по п/п.b), в жестких условиях, которые включают гибридизацию в 50% формамиде, 1М NaCl, 1% SDS при 37°С и промывку в 0,1´SSC при 60-65°С.
18. Способ по п.17, где указанное растение выбрано из кукурузы, сорго, пшеницы, капусты, подсолнечника, помидора, крестоцветных, перцев, картофеля, хлопка, риса, сои, сахарной свеклы, сахарного тростника, табака, ячменя и масличного рапса.