Бюллетень ЕАПВ "Изобретения (евразийские заявки и патенты)"
Бюллетень 06´2019

  

(11) 

032557 (13) B1       Разделы: A B C E F G H    

(21) 

201592174

(22) 

2014.05.06

(51) 

C12M 1/00 (2006.01)
C12N 1/02
(2006.01)

(31) 

2013-456

(32) 

2013.06.14

(33) 

CZ

(43) 

2016.04.29

(86) 

PCT/CZ2014/000052

(87) 

WO 2014/198242 2014.12.18

(71) 

(73) МЕТАСЕЛЛ, С.Р.О. (CZ)

(72) 

Бобек Владимир (CZ), Колостова Катарина (SK)

(74) 

Явкина Е.В. (RU)

(54) 

СПОСОБ СЕПАРАЦИИ СПОРАДИЧЕСКИХ КЛЕТОК ИЗ ОРГАНИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЕЙ И АППАРАТ ДЛЯ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ УКАЗАННОГО СПОСОБА

(57) 1. Способ сепарации спорадических циркулирующих опухолевых клеток (ЦОК) или распространяющихся опухолевых клеток (РОК), циркулирующих эндометриальных клеток и циркулирующих фетальных трофобластных клеток (ЦФТК), присутствующих в органической жидкости пациента, без химического или механического их изменения с обеспечением возможности их последующей эффективной культивации, включающий следующие шаги:

предоставление фильтрационной мембраны, имеющей первую и вторую стороны, при этом отверстия мембраны меньше диаметра спорадических клеток,

предоставление абсорбентного материала и размещение его в плотном контакте со второй стороной указанной фильтрационной мембраны,

обеспечение прохождения органической жидкости со спорадическими клетками через первую сторону фильтрационной мембраны таким образом, что органическая жидкость, проходя через фильтрационную мембрану за счет капиллярной силы в абсорбентный материал, освобождается от спорадических клеток,

получение указанных спорадических клеток, захваченных на мембране, при этом спорадические клетки остаются механически и химически неизменными и поэтому живыми, что позволяет проводить их последующую эффективную культивацию.

2. Способ по п.1, характеризующийся тем, что органическую жидкость предварительно отбирают из периферической или центральной крови, костного мозга, асцитных жидкостей, плеврального выпота, перитонеальной жидкости лаважа, бронхоальвеолярного лаважа и околоплодной жидкости.

3. Способ по пп.1, 2, характеризующийся тем, что указанная органическая жидкость - это органическая жидкость пациентов с меланомой, раком груди, опухолью желудочно-кишечного тракта, такой как карцинома желудка, карцинома кишечника, карцинома поджелудочной железы и карцинома печени; урогенитальными опухолями и опухолями мягких тканей, такими как головные и шейные опухоли и другие плотные опухоли.

4. Способ по п.3, характеризующийся тем, что периферическая кровь отбирается как антикоагулированная периферическая кровь.

5. Способ по пп.1-4, характеризующийся тем, что после сепарации осуществляют определение, и/или количественное определение, и/или культивирование спорадических клеток, выделенных на фильтрационной мембране, или клеток, смытых с фильтрационной мембраны в сосуд для культивирования.

6. Способ по п.5, характеризующийся тем, что предварительно до сепарации органическую жидкость разбавляют питательной средой, в частности средой для культур клеток и тканей (RPMI), для повышения успешности последующей культивации.

7. Аппарат для реализации способа по п.1, характеризующийся тем, что он включает в себя открытый сверху и снизу полый резервуар (3) для приема смеси спорадических клеток, присутствующих в органической жидкости, при этом нижняя часть резервуара (3) находится в плотном контакте по крайней мере с частью первой стороны фильтрационной мембраны (1), диаметр пор которой составляет 7-10 мкм, при этом она выполнена из биосовместимого материала, по крайней мере часть второй стороны мембраны (1) находится в плотном контакте с абсорбентным материалом (2), таким образом фильтрационная мембрана (1) отделяет внутреннее пространство резервуара (3) от указанного абсорбентного материала (2).

8. Аппарат по п.7, характеризующийся тем, что абсорбентный материал (2) размещен в накопительном базовом контейнере (4), снабженном верхней крышкой (5), причем к указанной крышке сверху с возможностью снятия закреплен периметрический держатель мембраны (6), который посредством прижимного кольца (7) плотно, с возможностью снятия удерживает мембрану (1) по ее окружности, при этом резервуар (3) плотно закреплен к держателю (6) по его периметру.

9. Аппарат по п.7 или 8, характеризующийся тем, что фильтрационная мембрана (1) имеет размер пор 8 мкм.

10. Аппарат по пп.7-9, характеризующийся тем, что фильтрационная мембрана (1) изготовлена из поликарбоната.

11. Аппарат по пп.7-10, характеризующийся тем, что абсорбентный материал (2) состоит из целлюлозы, тонкой бумаги, текстильного волокна или их комбинации.

Увеличить масштаб


наверх