Бюллетень ЕАПВ "Изобретения (евразийские заявки и патенты)"
Бюллетень 06´2019

  

(11) 

032489 (13) B1       Разделы: A B C E F G H    

(21) 

201700085

(22) 

2017.02.03

(51) 

C12Q 1/68 (2006.01)
C12N 15/11
(2006.01)

(43) 

2018.08.31

(96) 

2017000005 (RU) 2017.02.03

(71) 

(73) ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ НАУЧНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ "НАУЧНЫЙ ЦЕНТР ПРОБЛЕМ ЗДОРОВЬЯ СЕМЬИ И РЕПРОДУКЦИИ ЧЕЛОВЕКА" (RU)

(72) 

Огарков Олег Борисович, Синьков Вячеслав Владимирович, Жданова Светлана Николаевна, Рычкова Любовь Владимировна (RU)

(54) 

ОЛИГОНУКЛЕОТИДНЫЕ ПРАЙМЕРЫ, ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЕ ДНК-ЗОНДЫ И СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS КЛОНАЛЬНОГО КОМПЛЕКСА 2-W148 ГЕНОТИПА BEIJING В КЛИНИЧЕСКИХ ОБРАЗЦАХ

(57) 1. Олигонуклеотидные праймеры и флуоресцентные ДНК-зонды, используемые для выявления Mycobacterium tuberculosis клонального комплекса 2-W148 генотипа Beijing в клинических образцах, имеющие следующий нуклеотидный состав:

kdpD F 5'-GGCGGCACGATTTCG GCTAC-3',

kdpD R 5'-TCGTCGTCAATCACCAAGACGA-3',

PROBE37 FAM-5'-GGCGGGCTCA(LNA-C)AG(LNA-T)GGTGATC-3'-RTQ1,

PROBE48 R6G-5'-GGCGGG CTCA(LNA-G)TGGTGATCG(LNA-A)T-3'-BHQ2.

2. Способ выявления Mycobacterium tuberculosis клонального комплекса 2-W148 генотипа Beijing в клинических образцах, включающий выделение ДНК из клинических образцов или суспензии штаммов, проведение полимеразной цепной реакции в режиме реального времени с использованием специфических олигонуклеотидных праймеров и флуоресцентных ДНК-зондов, которые имеют следующие нуклеотидные составы:

kdpD F 5'-GGCGGCACGATTTCGGCTAC-3',

kdpD R 5'-TCGTCGTCAATCACCAAGACGA-3',

PROBE37 FAM-5'-GGCGGGCTCA(LNA-C)AG(LNA-T)GGTGATC-3'-RTQ1,

PROBE48 R6G-5'-GGCGGG CTCA(LNA-G)TGGTGATCG(LNA-A)T-3'-BHQ2,

при этом режим амплификации 1 цикл 95°C - 15 мин; 45 циклов 95°C -15 с, 65°C - 30 с, а оценку результатов производят путем регистрации сигнала флуоресценции по каналам FAM (520 нм) и R6G (557 нм) и при наблюдении экспоненциального роста сигнала флуоресценции ПЦР по каналу R6G в диапазоне 18-38 цикл амплификации определяют наличие в образце ДНК Mycobacterium tuberculosis клонального комплекса 2-W148 генотипа Beijing.


наверх