Бюллетень ЕАПВ "Изобретения (евразийские заявки и патенты)"
Бюллетень 04´2019

  

(11) 

032056 (13) B1       Разделы: A B C D E F G H    

(21) 

201390940

(22) 

2011.12.16

(51) 

A61K 47/48 (2006.01)
A61P 7/00
(2006.01)

(31) 

61/426,356

(32) 

2010.12.22

(33) 

US

(43) 

2014.04.30

(86) 

PCT/US2011/065591

(87) 

WO 2012/087838 2012.06.28

(71) 

(73) БАКСАЛТА ИНКОРПОРЕЙТИД (US); БАКСАЛТА ГМБХ (CH)

(72) 

Зикманн Юрген, Шайнекер Рихард, Роттенштайнер Ханспетер, Турецек Петер (AT)

(74) 

Медведев В.Н. (RU)

(54) 

КОНЪЮГАТ ТЕРАПЕВТИЧЕСКОГО БЕЛКА И ПРОИЗВОДНОГО ЖИРНОЙ КИСЛОТЫ, СПОСОБЫ ПОЛУЧЕНИЯ КОНЪЮГАТА ТЕРАПЕВТИЧЕСКОГО БЕЛКА И ПРОИЗВОДНОГО ЖИРНОЙ КИСЛОТЫ (ВАРИАНТЫ)

(57) 1. Конъюгат терапевтического белка и производного жирной кислоты, содержащий водорастворимое производное жирной кислоты, включающее жирную кислоту или эфир жирной кислоты, присоединенные к водорастворимому линкеру, причем указанное производное жирной кислоты стабильно присоединено к терапевтическому белку, где водорастворимый линкер включает полиэтиленгликоль (ПЭГ) или разветвленный ПЭГ, по меньшей мере одну аминооксигруппу, присоединенную к терапевтическому белку, и вторую аминооксигруппу, присоединенную к жирной кислоте или эфиру жирной кислоты, где жирная кислота включает цепь длиной С10-С24.

2. Конъюгат терапевтического белка и производного жирной кислоты по п.1, который связывает сывороточный альбумин человека (HSA) in vitro или in vivo, обладает повышенным временем полужизни по сравнению с нативным терапевтическим белком и в котором жирная кислота является насыщенной жирной кислотой или ненасыщенной жирной кислотой.

3. Конъюгат терапевтического белка и производного жирной кислоты по п.2, где жирная кислота является жирной кислотой с разветвленной цепью.

4. Конъюгат терапевтического белка и производного жирной кислоты по п.1, где жирная кислота включает цепь длиной, выбранной из группы, состоящей из C10, С12, С14, С16, С18, С20, С22 и С24.

5. Конъюгат терапевтического белка и производного жирной кислоты по п.1, где жирная кислота присоединена к водорастворимому линкеру по группе жирной кислоты, выбранной из группы, состоящей из концевой карбоксильной группы и w-группы, в которой w-группа выбрана из группы, состоящей из гидроксила, амино-, тио- и карбоксила.

6. Конъюгат терапевтического белка и производного жирной кислоты по п.1, где жирная кислота представляет собой 16-гидроксигексадекановую кислоту.

7. Конъюгат терапевтического белка и производного жирной кислоты по п.1, где сложный эфир жирной кислоты выбран из группы, состоящей из метилового эфира и этилового эфира.

8. Конъюгат терапевтического белка и производного жирной кислоты по п.7, где сложный эфир жирной кислоты представляет собой метиловый эфир 16-гидроксигексадекановой кислоты.

9. Конъюгат терапевтического белка и производного жирной кислоты по п.1, где ПЭГ включает цепь длиной, выбранной из группы, состоящей из O3, O5, O7, O9, O11, O13 и O15.

10. Конъюгат терапевтического белка и производного жирной кислоты по п.9, где водорастворимый линкер выбран из группы, состоящей из:

а) 3-оксапентан-1,5-диоксамина формулы

Увеличить масштаб

b) 3,6,9-триоксаундекан-1,11-диоксиамина формулы

Увеличить масштаб

с) 3,6,9,12,15-пентаоксагептадекан-1,17-диоксиамина формулы

Увеличить масштаб

d) 3,6,9,12,15,18,21-гептаоксатрикозан-1,23-диоксиамина формулы

Увеличить масштаб

11. Конъюгат терапевтического белка и производного жирной кислоты по п.1, где производное жирной кислоты стабильно присоединено к терапевтическому белку посредством оксимной связи, где оксимная связь образована между оксимной группой водорастворимого линкера и альдегидной группой окисленного углевода в составе терапевтического белка.

12. Конъюгат терапевтического белка и производного жирной кислоты по п.1, где производное жирной кислоты выбрано из группы, состоящей из:

а) натриевой соли 16-(2-(2-(2-(2-аминооксиэтокси)этокси)этокси)этоксиимино)гексадекановой кислоты формулы

Увеличить масштаб

b) метилового эфира 16-(2-(2-(2-(2-аминооксиэтокси)этокси)этокси)этоксиамино)гексадекановой кислоты

Увеличить масштаб

13. Конъюгат терапевтического белка и производного жирной кислоты по п.1, где терапевтический белок представляет собой гликопротеин или терапевтический белок, гликозилированный in vitro, и выбран из группы, состоящей из фактора IX (FIX), фактора VIII (FVIII), фактора VIIa (FVIIa), фактора Виллебранда (ФВ), фактора FV (FV), фактора X (FX), фактора XI (FXI), фактора XII (FXII), тромбина (FII), белка С, белка S, tPA, PAI-1, тканевого фактора (TF), протеазы ADAMTS 13, IL-1-альфа, IL-1-бета, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-11, колониестимулирующего фактора-1 (КСФ-1), М-КСФ, SCF, ГМ-КСФ, гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (Г-КСФ), ЕРО, интерферона-альфа (IFN-альфа), консенсусного интерферона, IFN-бета, IFN-гамма, IFN-омега, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-12, IL-13, IL-14, IL-15, IL-16, IL-17, IL-18, IL-19, IL-20, IL-21, IL-22, IL-23, IL-24, IL-31, IL-32-альфа, IL-33, тромбопоэтина (ТРО), Ang-1, Ang-2, Ang-4, Ang-Y, ангиопоэтинподобного полипептида 1 (ANGPTL1), ангиопоэтинподобного полипептида 2 (ANGPTL2), ангиопоэтинподобного полипептида 3 (ANGPTL3), ангиопоэтинподобного полипептида 4 (ANGPTL4), ангиопоэтинподобного полипептида 5 (ANGPTL5), ангиопоэтинподобного полипептида 6 (ANGPTL6), ангиопоэтинподобного полипептида 7 (ANGPTL7), витронектина, фактора роста эндотелия сосудов (ФРЭС), ангиогенина, активина А, активина В, активина С, костного морфогенетического белка-1, костного морфогенетического белка-2, костного морфогенетического белка-3, костного морфогенетического белка-4, костного морфогенетического белка-5, костного морфогенетического белка-6, костного морфогенетического белка-7, костного морфогенетического белка-8, костного морфогенетического белка-9, костного морфогенетического белка-10, костного морфогенетического белка-11, костного морфогенетического белка-12, костного морфогенетического белка-13, костного морфогенетического белка-14, костного морфогенетического белка-15, рецептора костного морфогенетического белка IA, рецептора костного морфогенетического белка IB, рецептора костного морфогенетического белка II, нейротрофического фактора головного мозга, кардиотрофина-1, цилиарного нейротрофического фактора, рецептора цилиарного нейротрофического фактора, cripto, cryptic, цитокин индуцируемого фактора хемотаксиса нейтрофилов 1, цитокин индуцируемого фактора хемотаксиса нейтрофилов 2α, цитокин индуцируемого фактора хемотаксиса нейтрофилов 2β, фактора роста эндотелиальных клеток β, эндотелина 1, эпидермального фактора роста, эпигена, эпирегулина, эпителиального аттрактанта нейтрофилов, фактора роста фибробластов 4, фактора роста фибробластов 5, фактора роста фибробластов 6, фактора роста фибробластов 7, фактора роста фибробластов 8, фактора роста фибробластов 8b, фактора роста фибробластов 8с, фактора роста фибробластов 9, фактора роста фибробластов 10, фактора роста фибробластов 11, фактора роста фибробластов 12, фактора роста фибробластов 13, фактора роста фибробластов 16, фактора роста фибробластов 17, фактора роста фибробластов 19, фактора роста фибробластов 20, фактора роста фибробластов 21, кислого фактора роста фибробластов, основного фактора роста фибробластов, рецептора глиального нейротрофического фактора α1, рецептора глиального нейротрофического фактора α2, белка, связанного с ростом, белка α, связанного с ростом, белка β, связанного с ростом, белка γ, связанного с ростом, гепаринсвязывающего эпидермального фактора роста, фактора роста гепатоцитов, рецептора фактора роста гепатоцитов, гепатомного фактора роста, инсулиноподобного фактора роста I, рецептора инсулиноподобного фактора роста, инсулиноподобного фактора роста II, белка, связывающего инсулиноподобный фактор роста, фактора роста кератиноцитов, лейкоз-ингибирующего фактора, рецептора α лейкоз-ингибирующего фактора, фактора роста нервов, рецептора фактора роста нервов, нейропоэтина, нейротрофина-3, нейротрофина-4, онкостатина М (OSM), плацентарного фактора роста, плацентарного фактора роста 2, тромбоцитарного фактора роста эндотелиальных клеток, тромбоцитарного фактора роста, А-цепи тромбоцитарного фактора роста, тромбоцитарного фактора роста АА, тромбоцитарного фактора роста АВ, В-цепи тромбоцитарного фактора роста, тромбоцитарного фактора роста ВВ, рецептора α тромбоцитарного фактора роста, рецептора β тромбоцитарного фактора роста, фактора, стимулирующего рост предшественников В-клеток, фактора стволовых клеток (SCF), рецептора фактора стволовых клеток, ФНО, ФНО0, ФНО1, ФНО2, трансформирующего фактора роста α, трансформирующего фактора роста β, трансформирующего фактора роста β1, трансформирующего фактора роста β1.2, трансформирующего фактора роста β2, трансформирующего фактора роста β3, трансформирующего фактора роста β5, латентного трансформирующего фактора роста β1, белка I, связывающего трансформирующий фактор роста β, белка II, связывающего трансформирующий фактор роста β, белка III, связывающего трансформирующий фактор роста β, лимфопоэтина стромы тимуса (TSLP), рецептора I типа фактора некроза опухолей, рецептора II типа фактора некроза опухолей, рецептора активатора плазминогена урокиназного типа, фосфолипаза-активирующего белка (PUP), инсулина, лектина, рицина, пролактина, хориогонадотропина, фолликулостимулирующего гормона, тиреотропного гормона, тканевого активатора плазминогена, IgG, IgE, IgM, IgA и IgD, α-галактозидазы, β-галактозидазы, ДНКазы, фетуина, лютеинизирующего гормона, эстрогена, инсулина, альбумина, липопротеинов, фетопротеина, трансферрина, тромбопоэтина, урокиназы, интегрина, тромбина, лептина, адалимумаба, деносумаба, этанерцепта, белка из таблицы.

14. Конъюгат терапевтического белка и производного жирной кислоты по п.13, где терапевтическим белком является FVIIa.

15. Конъюгат терапевтического белка и производного жирной кислоты по п.13, где терапевтическим белком является FVIII.

16. Конъюгат терапевтического белка и производного жирной кислоты по п.13, где терапевтическим белком является FIX.

17. Способ получения конъюгата терапевтического белка и производного жирной кислоты по п.1, включающий:

a) окисление w-гидроксигруппы жирной кислоты с получением альдегидной группы в составе жирной кислоты;

b) присоединение водорастворимого линкера, включающего (i) полиэтиленгликоль (ПЭГ) или разветвленный ПЭГ и (ii) активную аминооксигруппу, к указанной альдегидной группе с образованием стабильной оксимной связи, таким образом получая производное жирной кислоты; и

c) конъюгирование производного жирной кислоты с окисленной углеводной группой терапевтического белка;

причем указанное производное жирной кислоты растворимо в воде; где w-гидроксигруппу окисляют окислителем, выбранным из группы, состоящей из периодинанового реагента Десса-Мартина, реагента Tempo, оксалилхлорида/ДМСО, тетрапропиламмонийперрутената (ТРАР) и реагентов на основе хрома (VI) (реагента Коллинза, пиридинийхлорхромата (РСС) и бихромата пиридиния); где жирной кислотой является насыщенная жирная кислота или ненасыщенная жирная кислота.

18. Способ по п.17, в котором жирной кислотой является жирная кислота с разветвленной цепью.

19. Способ по п.17, в котором жирная кислота включает цепь длиной, выбранной из группы, состоящей из C10, С12, С14, С16, С18, С20, С22 и С24.

20. Способ по п.19, в котором жирная кислота представляет собой 16-гидроксигексадекановую кислоту.

21. Способ по п.17, в котором ПЭГ включает цепь длиной, выбранной из группы, состоящей из O3, O5, O7, O9, O11, O13 и O15.

22. Способ по п.21, в котором водорастворимый линкер выбран из группы, состоящей из:

а) 3-оксапентан-1,5-диоксамина формулы

Увеличить масштаб

b) 3,6,9-триоксаундекан-1,11-диоксиамина формулы

Увеличить масштаб

с) 3,6,9,12,15-пентаоксагептадекан-1,17-диоксиамина формулы

Увеличить масштаб

d) 3,6,9,12,15,18,21-гептаоксатрикозан-1,23-диоксиамина формулы

Увеличить масштаб

23. Способ получения конъюгата терапевтического белка и производного жирной кислоты по п.1, включающий:

a) этерификацию карбоксильной группы жирной кислоты с получением эфира жирной кислоты;

b) активацию w-гидроксигруппы жирной кислоты с получением мезильной группы в составе жирной кислоты со стадии а);

c) присоединение водорастворимого линкера, включающего (i) полиэтиленгликоль (ПЭГ) или разветвленный ПЭГ и (ii) активную аминооксигруппу, путем замещения мезильной группы со стадии b) с образованием стабильной оксиимин-метиленовой связи, таким образом получая производное жирной кислоты; и

d) конъюгирование производного жирной кислоты с окисленной углеводной группой терапевтического белка;

причем указанное производное жирной кислоты растворимо в воде; где карбоксильную группу этерифицируют этерифицирующим агентом, выбранным из группы, состоящей из ацетилхлорида, метанола в присутствии кислоты, этанола в присутствии кислоты, диазометана и метилиодида; где w-гидроксигруппу активируют активирующим агентом, выбранным из группы, состоящей из мезилхлорида, тозилхлорида и нозилхлорида; и где жирная кислота представляет собой насыщенную жирную кислоту или ненасыщенную жирную кислоту.

24. Способ по п.23, в котором жирная кислота является жирной кислотой с разветвленной цепью.

25. Способ по п.23, в котором жирная кислота включает цепь, выбранную из группы, состоящей из C10, С12, С14, С16, С18, С20, С22 и С24.

26. Способ по п.25, в котором жирная кислота представляет собой 16-гидроксигексадекановую кислоту.

27. Способ по п.23, в котором ПЭГ включает цепь длиной, выбранной из группы, состоящей из O3, O5, O7, O9, O11, O13 и O15.

28. Способ по п.27, в котором водорастворимый линкер выбран из группы, состоящей из:

а) 3-оксапентан-1,5-диоксамина формулы

Увеличить масштаб

b) 3,6,9-триоксаундекан-1,11-диоксиамина формулы

Увеличить масштаб

с) 3,6,9,12,15-пентаоксагептадекан-1,17-диоксиамина формулы

Увеличить масштаб

d) 3,6,9,12,15,18,21-гептаоксатрикозан-1,23-диоксиамина формулы

Увеличить масштаб

29. Способ получения конъюгата терапевтического белка и производного жирной кислоты по п.1, включающий контакт окисленной углеводной группы терапевтического белка с производным жирной кислоты в условиях, обеспечивающих конъюгирование;

причем указанную углеводную группу окисляют путем инкубирования с буфером, включающим окислитель, выбранный из группы, состоящей из периодата натрия (NaIO4), тетраацетата свинца (Pb(OAc)4) и перрутената калия (KRuO4);

где производное жирной кислоты включает жирную кислоту или эфир жирной кислоты, присоединенные к водорастворимому линкеру, включающему (i) полиэтиленгликоль (ПЭГ) или разветвленный ПЭГ и (ii) активную аминооксигруппу;

где между окисленной углеводной группой и активной аминооксигруппой производного жирной кислоты образуется оксимная связь;

где образование указанной оксимной связи катализируется нуклеофильным катализатором, выбранным из группы, включающей анилин, о-аминобензойную кислоту, м-аминобензойную кислоту, п-аминобензойную кислоту, сульфаниловую кислоту, о-аминобензамид, о-толуидин, м-толуидин, п-толуидин, о-анизидин, м-анизидин и п-анизидин.

30. Способ по п.29, в котором терапевтический белок представляет собой гликопротеин или терапевтический белок, гликозилированный in vitro, и выбран из группы, состоящей из фактора IX (FIX), фактора VIII (FVIII), фактора VIIa (FVIIa), фактора Виллебранда (ФВ), фактора FV (FV), фактора X (FX), фактора XI (FXI), фактора XII (FXII), тромбина (FII), белка С, белка S, tPA, PAI-1, тканевого фактора (TF), протеазы ADAMTS 13, IL-1-альфа, IL-1-бета, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-11, колониестимулирующего фактора-1 (КСФ-1), М-КСФ, SCF, ГМ-КСФ, гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (Г-КСФ), ЕРО, интерферона-альфа (IFN-альфа), консенсусного интерферона, IFN-бета, IFN-гамма, IFN-омега, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-12, IL-13, IL-14, IL-15, IL-16, IL-17, IL-18, IL-19, IL-20, IL-21, IL-22, IL-23, IL-24, IL-31, IL-32-альфа, IL-33, тромбопоэтина (ТРО), Ang-1, Ang-2, Ang-4, Ang-Y, ангиопоэтинподобного полипептида 1 (ANGPTL1), ангиопоэтинподобного полипептида 2 (ANGPTL2), ангиопоэтинподобного полипептида 3 (ANGPTL3), ангиопоэтинподобного полипептида 4 (ANGPTL4), ангиопоэтинподобного полипептида 5 (ANGPTL5), ангиопоэтинподобного полипептида 6 (ANGPTL6), ангиопоэтинподобного полипептида 7 (ANGPTL7), витронектина, фактора роста эндотелия сосудов (ФРЭС), ангиогенина, активина А, активина В, активина С, костного морфогенетического белка-1, костного морфогенетического белка-2, костного морфогенетического белка-3, костного морфогенетического белка-4, костного морфогенетического белка-5, костного морфогенетического белка-6, костного морфогенетического белка-7, костного морфогенетического белка-8, костного морфогенетического белка-9, костного морфогенетического белка-10, костного морфогенетического белка-11, костного морфогенетического белка-12, костного морфогенетического белка-13, костного морфогенетического белка-14, костного морфогенетического белка-15, рецептора костного морфогенетического белка IA, рецептора костного морфогенетического белка IB, рецептора костного морфогенетического белка II, нейротрофического фактора головного мозга, кардиотрофина-1, цилиарного нейротрофического фактора, рецептора цилиарного нейротрофического фактора, cripto, cryptic, цитокин индуцируемого фактора хемотаксиса нейтрофилов 1, цитокин индуцируемого фактора хемотаксиса нейтрофилов 2α, цитокин индуцируемого фактора хемотаксиса нейтрофилов 2β, фактора роста эндотелиальных клеток β, эндотелина 1, эпидермального фактора роста, эпигена, эпирегулина, эпителиального аттрактанта нейтрофилов, фактора роста фибробластов 4, фактора роста фибробластов 5, фактора роста фибробластов 6, фактора роста фибробластов 7, фактора роста фибробластов 8, фактора роста фибробластов 8b, фактора роста фибробластов 8с, фактора роста фибробластов 9, фактора роста фибробластов 10, фактора роста фибробластов 11, фактора роста фибробластов 12, фактора роста фибробластов 13, фактора роста фибробластов 16, фактора роста фибробластов 17, фактора роста фибробластов 19, фактора роста фибробластов 20, фактора роста фибробластов 21, кислого фактора роста фибробластов, основного фактора роста фибробластов, рецептора глиального нейротрофического фактора α1, рецептора глиального нейротрофического фактора α2, белка, связанного с ростом, белка α, связанного с ростом, белка β, связанного с ростом, белка γ, связанного с ростом, гепаринсвязывающего эпидермального фактора роста, фактора роста гепатоцитов, рецептора фактора роста гепатоцитов, гепатомного фактора роста, инсулиноподобного фактора роста I, рецептора инсулиноподобного фактора роста, инсулиноподобного фактора роста II, белка, связывающего инсулиноподобный фактор роста, фактора роста кератиноцитов, лейкоз-ингибирующего фактора, рецептора α лейкоз-ингибирующего фактора, фактора роста нервов, рецептора фактора роста нервов, нейропоэтина, нейротрофина-3, нейротрофина-4, онкостатина М (OSM), плацентарного фактора роста, плацентарного фактора роста 2, тромбоцитарного фактора роста эндотелиальных клеток, тромбоцитарного фактора роста, А-цепи тромбоцитарного фактора роста, тромбоцитарного фактора роста АА, тромбоцитарного фактора роста АВ, В-цепи тромбоцитарного фактора роста, тромбоцитарного фактора роста ВВ, рецептора α тромбоцитарного фактора роста, рецептора β тромбоцитарного фактора роста, фактора, стимулирующего рост предшественников В-клеток, фактора стволовых клеток (SCF), рецептора фактора стволовых клеток, ФНО, ФНО0, ФНО1, ФНО2, трансформирующего фактора роста α, трансформирующего фактора роста β, трансформирующего фактора роста β1, трансформирующего фактора роста β1.2, трансформирующего фактора роста β2, трансформирующего фактора роста β3, трансформирующего фактора роста β5, латентного трансформирующего фактора роста β1, белка I, связывающего трансформирующий фактор роста β, белка II, связывающего трансформирующий фактор роста β, белка III, связывающего трансформирующий фактор роста β, лимфопоэтина стромы тимуса (TSLP), рецептора I типа фактора некроза опухолей, рецептора II типа фактора некроза опухолей, рецептора активатора плазминогена урокиназного типа, фосфолипаза-активирующего белка (PUP), инсулина, лектина, рицина, пролактина, хориогонадотропина, фолликулостимулирующего гормона, тиреотропного гормона, тканевого активатора плазминогена, IgG, IgE, IgM, IgA и IgD, α-галактозидазы, β-галактозидазы, ДНКазы, фетуина, лютеинизирующего гормона, эстрогена, инсулина, альбумина, липопротеинов, фетопротеина, трансферрина, тромбопоэтина, урокиназы, интегрина, тромбина, лептина, адалимумаба, деносумаба, энбрела этанерцепта, белка из таблицы.

31. Способ по п.30, в котором терапевтическим белком является FVIIa.

32. Способ по п.30, в котором терапевтическим белком является FVIII.

33. Способ по п.30, в котором терапевтическим белком является FIX.

34. Способ по п.17, в котором окислителем является периодинан Десса-Мартина.


наверх