Бюллетень ЕАПВ "Изобретения (евразийские заявки и патенты)"
Бюллетень 01´2018

  

(21) 

201600526 (13) A1       Разделы: A B C D E F G H    

(22) 

2016.06.29

(51) 

G01N 21/59 (2006.01)

(96) 

2016000055 (RU) 2016.06.29

(71) 

ТИТОВ АНДРЕЙ ВЛАДИМИРОВИЧ; БЕЛЬСКАЯ ЛЮДМИЛА ВЛАДИМИРОВНА; КОВАЛЕНКО ДМИТРИЙ АНАТОЛЬЕВИЧ; ХАРИТОНАШВИЛИ ИРАКЛИЙ ТЕЙМУРАЗОВИЧ; ЗАЙЧЕНКО НИКОЛАЙ МИХАЙЛОВИЧ (RU)

(72) 

Бельская Людмила Владимировна, Титов Андрей Владимирович, Сарф Елена Александровна (RU)

(74) 

Зайченко Н.М. (RU)

(54) 

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ЩЕЛОЧНОЙ ФОСФАТАЗЫ В БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ

(57) Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для определения активности щелочной фосфатазы в биологических жидкостях, в частности в слюне человека. Сущность изобретения - получают исходную смесь реагента с образцом биологической жидкости, проводят инкубацию полученной смеси с перемешиванием и определяют концентрацию белка после инкубации путем измерения оптической плотности смеси относительно холостой пробы и последующего расчета, причем при получении исходной смеси в качестве биологической жидкости используют слюну человека, а реагент готовят путем смешивания буферного раствора диэтаноламина 1 ммоль/мл с магнием хлористым 0,5 мкмоль/мл и раствором р-нитрофенилфосфата 5 мкмоль/мл, после чего к 1 мл при получении смеси к реагенту прибавляют 100 мкл образца биологической жидкости, после перемешивания полученной смеси инкубацию проводят в течение 5 мин при температуре 37°С, добавляют в нее 1 мл раствора натрия гидроокиси 0,5 моль/л (20 г/л) и перемешивают с последующим измерением оптическую плотность против холостой пробы при длине волны 405 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм в течение времени до 30 мин, а активность щелочной фосфатазы в Е/л рассчитывают, используя значение фактора, рассчитанное как отношение общего объема раствора в кювете к коэффициенту миллимолярного поглощения п-нитрофенола 18,75 и объему образца биологической жидкости, при этом холостую пробу готовят в виде смеси реагента с дистиллированной водой в тех же количествах, что и исходной смеси, с проведением над ней тех же операций, что и для исходной смеси.


наверх