Бюллетень ЕАПВ "Изобретения (евразийские заявки и евразийские патенты)"
Бюллетень 07´2017

  

(11) 

027218 (13) B1       Разделы: A B C E F G H    

(21) 

201391666

(22) 

2012.05.21

(51) 

C12N 1/21 (2006.01)
C07K 14/555
(2006.01)
C12N 9/02
(2006.01)
C12N 9/00
(2006.01)

(31) 

11167761.3

(32) 

2011.05.26

(33) 

EP

(43) 

2014.03.31

(86) 

PCT/EP2012/059373

(87) 

WO 2012/160027 2012.11.29

(71) 

(73) РИХТЕР-ХЕЛЬМ БИОТЕК ГМБХ УНД КО. КГ (DE)

(72) 

Шиллинг Ральф, Дидерих Беттина (DE)

(74) 

Попова А.О. (RU)

(54) 

РЕКОМБИНАНТНАЯ ЭКСПРЕССИЯ РАСТВОРИМОГО ИНТЕРФЕРОНА

(57) 1. Клетка-хозяин для рекомбинантной экспрессии белка интерферона млекопитающего, причем упомянутая клетка содержит:

(a) функциональный эндогенный trxB ген,

(b) инактивированный эндогенный gor ген,

(c) полинуклеотидную последовательность, кодирующую экзогенный белок интерферон,

(d) ген полимеразы Т7 РНК.

2. Клетка-хозяин по п.1, отличающаяся тем, что упомянутая полинуклеотидная последовательность включена в экспрессирующий вектор.

3. Клетка-хозяин по п.1 или 2, отличающаяся тем, что упомянутый интерферон выбирают из группы, состоящей из интерферона-α, интерферона-β и интерферона-γ или их активного фрагмента.

4. Клетка-хозяин по п.3, отличающаяся тем, что упомянутый белок интерферон является человеческим белком интерфероном или его биологически активным фрагментом.

5. Клетка-хозяин по п.4, отличающаяся тем, что упомянутый белок интерферон является человеческим интерфероном α2а или его биологически активным фрагментом.

6. Клетка-хозяин по любому из пп.1-5, отличающаяся тем, что упомянутая клетка-хозяин является бактериальной клеткой.

7. Клетка-хозяин по п.6, отличающаяся тем, что упомянутая бактериальная клетка является клеткой Escherichia coli.

8. Клетка-хозяин по п.7, отличающаяся тем, что упомянутая клетка Escherichia coli получена из штамма BL21 Escherichia coli.

9. Клетка-хозяин по любому из пп.1-8, отличающаяся тем, что упомянутый ген полимеразы Т7 РНК вставлен в геном клетки-хозяина.

10. Способ рекомбинантной экспрессии растворимого интерферона в клетке-хозяине, включающий:

(a) предоставление клетки-хозяина по любому из пп.2-10;

(b) культивирование клетки-хозяина в условиях, которые позволяют экспрессировать белок интерферон,

(c) получение растворимого белка интерферона из клетки-хозяина.

11. Способ по п.10, отличающийся тем, что этап (с) включает разрушение клеток.

12. Способ по п.11, отличающийся тем, что этап (с), кроме того, включает очистку белка хроматографией.

13. Использование клетки-хозяина по любому из пп.1-9 для рекомбинантной экспрессии растворимого интерферона.

Увеличить масштаб


наверх