Бюллетень ЕАПВ "Изобретения (евразийские заявки и патенты)"
Бюллетень 03´2017

  

(11) 

026193 (13) B1       Разделы: A B C D E F G H    

(21) 

201301277

(22) 

2012.05.17

(51) 

A61K 48/00 (2006.01)
A61P 27/02
(2006.01)
A61P 27/00
(2006.01)

(31) 

61/487,419

(32) 

2011.05.18

(33) 

US

(43) 

2014.04.30

(86) 

PCT/US2012/038342

(87) 

WO 2012/158910 2012.11.22

(71) 

(73) ТЕ РИДЖЕНТС ОФ ТЕ ЮНИВЕРСИТИ ОФ КАЛИФОРНИЯ (US)

(72) 

Классен Генри, Ян Цзин (US)

(74) 

Саломатина И.С. (RU)

(54) 

КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ СЕТЧАТКИ

(57) 1. Клеточная популяция, содержащая клетки-предшественники сетчатки человека, в которых экспрессируются один или более маркеров, выбираемых из группы, состоящей из нестина, Sox2, Ki-67, белков МНС класса I и Fas/CD95, и в которой нестин экспрессируется более чем в 90% клеток популяции, Sox2 экспрессируется более чем в 80% клеток популяции, Ki-67 экспрессируется более чем в 30% клеток популяции, белки МНС класса I экспрессируются более чем в 70% клеток популяции, Fas/CD95 экспрессируется более чем в 30% клеток популяции.

2. Клеточная популяция по п.1, в которой в клетках популяции экспрессируются также один или более маркеров, выбираемых из группы, состоящей из виментина, CD9, CD81, AQP4, CXCR4, CD15/LeX/SSEA1, ганглиозида GD2, CD133, β3-тубулина, МАР2, GFAP, OPN/SPP1, PTN, KDR и TEK.

3. Способ получения популяции клеток-предшественников сетчатки человека, экспрессирующих один или более маркеров, выбираемых из группы, состоящей из нестина, Sox2, Ki-67, белков МНС класса I и Fas/CD95, включающий

извлечение ткани сетчатки эмбриона человека на стадии, после которой формируется сетчатка, но прежде чем по всей сетчатке полностью сформируются наружные сегменты фоторецепторов и завершится или завершится в основном васкуляризация сетчатки, где указанные ткани берут из сетчатки человеческого эмбриона внутриутробного возраста от около 12 недель до около 28 недель;

диссоциацию взятой ткани механически или ферментативно для получения диссоциированной суспензии клеток и конгломератов клеток и

культивирование диссоциированной суспензии клеток при атмосферной концентрации кислорода, или при низкой концентрации кислорода, которая имитирует содержание кислорода в развивающейся сетчатке в процессе внутриутробного развития, или в гипоксических условиях, в бессывороточной среде в культуральных флаконах или чашках, покрытых фибронектином без ксеногенной контаминации, орнитином, полилизином, ламинином или их эквивалентами, на протяжении 10-30 пассажей, в которой после культивирования в клетках-предшественниках сетчатки человека экспрессируются один или более маркеров, выбираемых из группы, состоящей из нестина, Sox2, Ki-67, белков МНС класса I и Fas/CD95, и в которой нестин экспрессируется более чем в 90% клеток популяции, Sox2 экспрессируется более чем в 80% клеток популяции, Ki-67 экспрессируется более чем в 30% клеток популяции, белки МНС класса I экспрессируются более чем в 70% клеток популяции, Fas/CD95 экспрессируется более чем в 30% клеток популяции.

4. Способ по п.3, в котором указанные клетки культивируют при атмосферной концентрации кислорода.

5. Способ по п.3, в котором указанные клетки культивируют при концентрации кислорода от около 0,5 до около 7%.

6. Способ по п.3, в котором указанные клетки культивируют в бессывороточной среде или в среде с пониженным содержанием сыворотки, при необходимости содержащей витамин С и альбумин.

7. Способ по п.3, в котором в клетках указанной популяции также экспрессируются один или более маркеров, выбираемых из группы, состоящей из виментина, CD9, CD81, AQP4, CXCR4, CD15/LeX/SSEA1, ганглиозида GD2, CD133, β3-тубулина, МАР2, GFAP, OPN/SPP1, PTN, KDR и TEK.

8. Способ по п.3, в котором фермент представляет собой трипсин.

9. Способ по п.3, в котором фибронектин без ксеногенной контаминации представляет собой человеческий фибронектин плазмы крови.

10. Способ по п.3, дополнительно включающий сбор или выделения культивируемых клеток.

11. Способ по п.3, дополнительно включающий криоконсервирование собранных или выделенных клеток.

12. Способ по п.3, в котором клетки-предшественники сетчатки человека экспрессируют на своей поверхности один или более маркеров, выбираемых из группы, состоящей из нестина, Sox2, Ki-67, белков МНС класса I и Fas/CD95.

13. Способ по п.3, в котором низкая концентрация кислорода, которая имитирует содержание кислорода в развивающейся сетчатке в процессе внутриутробного развития, составляет около 3%.

14. Способ лечения заболевания или состояния сетчатки у нуждающегося в том индивида, включающий введение этому индивиду эффективного количества композиции, содержащей клетки-предшественники сетчатки человека, в которой в этих клетках-предшественниках сетчатки человека экспрессируются один или более маркеров, выбираемых из группы, состоящей из нестина, Sox2, Ki-67, белков МНС класса I и Fas/CD95, и в которой нестин экспрессируется более чем в 90% клеток популяции, Sox2 экспрессируется более чем в 80% клеток популяции, Ki-67 экспрессируется более чем в 30% клеток популяции, белки МНС класса I экспрессируются более чем в 70% клеток популяции, Fas/CD95 экспрессируется более чем в 30% клеток популяции, и при необходимости количественное определение изменений зрения у указанного индивида, таким образом осуществляя лечение заболевания или состояния сетчатки.

15. Способ по п.14, в котором состав указанной композиции предназначен для инъекции в полость стекловидного тела или в подсетчаточное пространство указанному индивиду.

16. Способ по п.14, в котором заболевания или состояния сетчатки, подлежащие лечению по данному изобретению, включают пигментный ретинит, врожденный амавроз Лебера, болезнь Штаргардта, хориодермию, синдром Ушера, дистрофию фоторецепторов, цилиопатию, митохондриальные расстройства, прогрессирующую атрофию сетчатки, дегенеративные заболевания сетчатки, старческую макулярную дегенерацию, сухую и влажную формы макулярной дегенерации, географическую атрофию, семейную или приобретенную макулопатию, поражения фоторецепторов, заболевания, обусловленные патологией пигментного эпителия сетчатки, диабетическую ретинопатию, кистозный отек макулы, увеит, отслоение сетчатки, травматические повреждения сетчатки, ятрогенные повреждения сетчатки, перфорацию макулы, телеангиэктазии макулы, поражения ганглиозных клеток, поражения зрительного нерва, глаукому, оптическую нейропатию, ишемические поражения сетчатки, ретинопатию недоношенных, закупорку сосудов сетчатки, семейную макроаневризму сетчатки, поражения сосудов сетчатки, поражения сосудов глаза, заболевания сосудов, ишемическую нейропатию зрительного нерва.

17. Способ по п.14, в котором в клетках в составе композиции также экспрессируются один или более маркеров, выбираемых из группы, состоящей из виментина, CD9, CD81, AQP4, CXCR4, CD15/LeX/SSEA1, ганглиозида GD2, CD133, β3-тубулина, МАР2, GFAP, OPN/SPP1, PTN, KDR и TEK.

18. Препарат, содержащий гетерогенную смесь клеток-предшественников сетчатки человека, полученную способом по п.3.

19. Препарат по п.17, в котором способ получения гетерогенной смеси эмбриональных нервных клеток сетчатки дополнительно включает:

(а) отбор эмбриональных нервных клеток сетчатки по маркерам клеточной поверхности или по генетическим маркерам, при необходимости отбор клеток до культивирования (перспективно) или после культивирования или и до, и после культивирования,

причем маркеры клеточной поверхности или генетические маркеры включают CD15/LeX/SSEA1 и/или ганглиозид GD2; при необходимости CD9, CD81, CD133 или AQP4, CXCR4; или

(b) отбор эмбриональных нервных клеток сетчатки по составу транскриптома, протеома и/или генома.

20. Способ лечения заболевания или состояния сетчатки, включающий:

(а) предоставление препарата, продукта или композиции по любому из пп.18 или 19;

(b) введение препарата, продукта или композиции по п.(а) путем инъекции в полость стекловидного тела или в подсетчаточное пространство,

в котором при необходимости полость стекловидного тела или подсетчаточное пространство принадлежат человеку, или кошке, или собаке; в котором при необходимости применяется стандартная процедура интраокулярной инъекции; причем при необходимости указанный способ включает парацентез передней камеры глаза и таким образом лечится заболевание или состояние сетчатки, которые при необходимости включают синдром Ушера, пигментный ретинит, дегенеративные заболевания сетчатки, старческую макулярную дегенерацию, сухую и влажную формы старческой макулярной дегенерации, географическую атрофию, поражения фоторецепторов, диабетическую ретинопатию, кистозный отек макулы, увеит, отслоение сетчатки, повреждения сетчатки, перфорацию макулы, макулярные телеангиэктазии, травматические или ятрогенные повреждения сетчатки, поражения ганглиозных клеток или зрительного нерва, глаукому или нейропатию зрительного нерва, ишемические поражения сетчатки, например ретинопатию недоношенных, закупорку сосудов сетчатки или ишемическую нейропатию зрительного нерва.

21. Способ улучшения фотопического (дневного) зрения, или для коррекции остроты зрения, или для улучшения функции макулы, или для улучшения показателей поля зрения, или для улучшения скотопического (ночного) зрения, включающий:

(а) предоставление препарата, продукта или композиции по любому из пп.18 или 19;

(b) введение препарата, продукта или композиции по п.(а) путем инъекции в полость стекловидного тела или в подсетчаточное пространство,

в котором при необходимости полость стекловидного тела или подсетчаточное пространство принадлежат человеку, или кошке, или собаке; в котором при необходимости применяется стандартная процедура интраокулярной инъекции; причем при необходимости указанный способ включает также парацентез передней камеры глаза, и таким образом повышается безопасность процедуры; таким образом, достигается улучшение фотопического (дневного) зрения, или коррекция остроты зрения, или улучшение функции макулы, или улучшение показателей поля зрения.

Увеличить масштаб


наверх