Бюллетень ЕАПВ "Изобретения (евразийские заявки и патенты)"
Бюллетень 02´2017

  

(11) 

025990 (13) B1       Разделы: A B C D E F G H    

(21) 

201200398

(22) 

2010.09.02

(51) 

C07D 307/50 (2006.01)
C11D 3/386
(2006.01)
C12N 9/02
(2006.01)
C12P 7/44
(2006.01)

(31) 

09169227.7; 09172555.6

(32) 

2009.09.02; 2009.10.08

(33) 

EP

(43) 

2012.09.28

(86) 

PCT/EP2010/062896

(87) 

WO 2011/026913 2011.03.10

(71) 

(73) ПЮРАК БИОХЕМ Б.В. (NL)

(72) 

Реёссенарс Хералд Йохан, Виркс Ник Йоханнес Петрус, Копман Франк Ваутер, Стратхоф Адрианус Йоханнес Йозеф, Винде де Йоханнес Хендрик (NL)

(74) 

Воробьева Е.В. (RU)

(54) 

ПОЛИПЕПТИДЫ С ОКСИДОРЕДУКТАЗНОЙ АКТИВНОСТЬЮ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

(57) 1. Полипептид с оксидоредуктазной активностью класса EC1.1 и ЕС1.2 в отношении как спиртовой, так и альдегидной группы, находящихся в положении С2 или С5 фуранового цикла, содержащий аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 70% идентичную последовательности SEQ ID NO: 3, или аминокислотную последовательность, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 4.

2. Молекула нуклеиновой кислоты, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид по п.1.

3. Молекула нуклеиновой кислоты, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид по п.1 и выбранную из группы, включающей:

(a) нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 4;

(b) нуклеотидную последовательность, которая избирательно гибридизируется с полинуклеотидом, который комплементарен SEQ ID NO: 4;

(c) нуклеотидную последовательность, идентичную по меньшей мере на 66% нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 4;

(d) последовательность, которая является вырожденной вследствие избыточности генетического кода по отношению к последовательности, определенной в любом из (а), (b) или (с); или

(e) нуклеотидную последовательность, комплементарную нуклеотидной последовательности, определенной в (а), (b), (с) или (d).

4. Конструкция, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид по п.1, где нуклеотидная последовательность функционально соединена с регуляторной последовательностью.

5. Вектор, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты по любому из пп.2, 3 или конструкцию по п.4.

6. Клетка, содержащая молекулу нуклеиновой кислоты по любому из пп.2, 3, конструкцию по п.4 или вектор по п.5.

7. Клетка по п.6, представляющая собой бактерию, выбранную из группы, состоящей из родов Escherichia, Anabaena, Caulobacter, Gluconobacter, Rhodobacter, Pseudomonas, Paracoccus, Bacillus, Brevibacterium, Corynebacterium, Rhizobium (Sinorhizobium), Flavobacterium, Klebsiella, Enterobacter, Lactobacillus, Lactococcus, Methylobacterium, Staphylococcus или Streptomyces; или видов В. subtilis, В. amyloliquefaciens, В. licheniformis, В. puntis, В. megaterium, В. halodurans, В. pumilus, G. oxydans, Caulobacter crescentus CB 15, Methylobacterium extorquens, Rhodobacter sphaeroides, Pseudomonas putida, Paracoccus zeaxanthinifaciens, Paracoccus denitrificans, E.coli, C. glutamicum, Staphylococcus carnosus, Streptomyces lividans, Sinorhizobium melioti и Rhizobium radiobacter.

8. Клетка по п.6, представляющая собой дрожжевую клетку, выбранную из группы, состоящей из родов Candida, Hansenula, Kluyveromyces, Pichia, Saccharomyces, Schizosaccharomyces или Yarrowia; или видов Kluyveromyces lactis, S. cerevisiae, Hansenula polymorpha, Yarrowia lipolytica и Pichia pastoris, или клетку мицелиального гриба, выбранную из группы родов Aspergillus, Chrysosporium, Penicillium, Talaromyces или Trichoderma; или видов Aspergillus niger, Aspergillus awamori, Aspergillus foetidus, Aspergillus sojae, Aspergillus fumigatus, Talaromyces emersonii, Aspergillus oryzae, Chrysosporium lucknowense, Trichoderma reesei или Penicillium chrysogenum.

9. Способ получения полипептида по п.1, включающий культивирование клетки по любому из пп.6-8 в условиях, обеспечивающих экспрессию указанного полипептида.

10. Полипептид по п.1, полученный способом по п.9.

11. Способ получения 2,5-фурандикарбоновой кислоты (FDCA), согласно которому один или несколько фурановых предшественников FDCA превращают в FDCA взаимодействием с окислителем в присутствии оксидоредуктазного катализатора, содержащего полипептид по п.1 или 10.

12. Способ по п.11, где фурановый предшественник FDCA выбирают из группы, состоящей из 5-гидроксиметилфурфураля (HMF), 2,5-дигидроксиметилфурана (HMF-спирта) и 5-гидроксиметил-2-фуранкарбоновой кислоты (HMF-кислоты), предпочтительно фурановый предшественник представляет собой HMF.

13. Способ по п.11 или 12, где фурановым предшественником FDCA является HMF, который получают из одного или нескольких сахаров-гексоз путем нагревания в присутствии кислоты.

14. Способ по п.13, где один или несколько сахаров-гексоз получают из лигноцеллюлозной биомассы.

15. Способ получения 5-гидроксиметил-2-фуранкарбоновой кислоты (HMF-кислоты), согласно которому один или несколько фурановых предшественников HMF-кислоты превращают в HMF-кислоту взаимодействием с окислителем в присутствии оксидоредуктазного катализатора, содержащего полипептид по п.1 или 10.

16. Способ по п.15, где фурановый предшественник HMF-кислоты выбирают из группы, состоящей из 5-гидроксиметилфурфураля (HMF) и 2,5-дигидроксиметилфурана (HMF-спирта).

17. Способ по любому из пп.11-16, где фурановый предшественник FDCA превращают в FDCA или фурановый предшественник HMF-кислоты превращают в HMF-кислоту в присутствии одного или нескольких коферментов, представляющих собой никотинамидадениндинуклеотид (NAD+), и/или пирролохинолинхинолон (PQQ), и/или флавинадениндинуклеотид (FAD).

18. Способ по любому из пп.11-17, где оксидоредуктазный катализатор представляет собой бесклеточный экстракт клетки, содержащий полипептид по п.1 или 10.

19. Способ по любому из пп.11-17, где оксидоредуктазный катализатор является цельноклеточным биокатализатором, представляющим собой клетку, содержащую полипептид по п.1 или 10.


наверх