Бюллетень ЕАПВ "Изобретения (евразийские заявки и патенты)"
Бюллетень 02´2017

  

(11) 

025843 (13) B1       Разделы: A B C D E F G H    

(21) 

200970925

(22) 

2008.04.03

(51) 

C12N 15/82 (2006.01)
C12N 9/00
(2006.01)
C12N 9/88
(2006.01)
A01H 5/00
(2006.01)
A01H 5/10
(2006.01)

(31) 

60/910,008

(32) 

2007.04.04

(33) 

US

(43) 

2010.04.30

(86) 

PCT/IB2008/002645

(87) 

WO 2009/031031 2009.03.12

(71) 

(73) БАСФ СЕ (DE); ВАЙТЕРРА, ИНК. (CA)

(72) 

Яо Кенинг, Поттс Дерек, Мэйлс Дарил (CA)

(74) 

Медведев В.Н. (RU)

(54) 

УСТОЙЧИВОЕ К ГЕРБИЦИДУ РАСТЕНИЕ BRASSICA JUNCEA, СПОСОБ БОРЬБЫ С СОРНЯКАМИ И СПОСОБЫ ПОЛУЧЕНИЯ И ИДЕНТИФИКАЦИИ УСТОЙЧИВОГО К ГЕРБИЦИДУ РАСТЕНИЯ BRASSICA JUNCEA

(57) 1. Устойчивое к гербициду растение Brassica juncea, содержащее

геном А, включающий ген большой субъединицы синтазы ацетогидроксикислот (AHASL) генома A Brassica, кодирующий первый устойчивый к гербициду полипептид (AHASL), имеющий замещение на лейцин в положении 556 в последовательности SEQ ID NO:6, и геном В, включающий ген AHASL генома В Brassica, кодирующий второй устойчивый к гербициду полипептид AHASL, который имеет замещение на аспарагин в положении 638 в последовательности SEQ ID NO:2, где первый и второй устойчивые к гербициду полипептиды AHASL, оба вместе, обеспечивают синергический уровень резистентности к AHAS-ингибирующему гербициду указанному растению Brassica juncea.

2. Устойчивое к гербициду растение Brassica juncea, содержащее геном А, включающий ген большой субъединицы синтазы ацетогидроксикислот (AHASL), кодирующий первый устойчивый к гербициду полипептид субъединицы синтазы ацетогидроксикислот (AHASL), который имеет замещение на треонин в положении 104 в последовательности SEQ ID NO:5, и геном В, включающий ген AHASL генома В Brassica, кодирующий второй устойчивый к гербициду полипептид (AHASL), который имеет замещение на аспарагин в положении 638 в последовательности SEQ ID NO:2, где первый и второй устойчивые к гербициду полипептиды AHASL, оба вместе, предоставляют указанному растению Brassica juncea синергический уровень резистентности к AHAS-ингибирующему гербициду.

3. Устойчивое к гербициду растение Brassica juncea по п.2, где ген AHASL в геноме А локализирован в локусе AHASL генома А.

4. Устойчивое к гербициду растение Brassica juncea по любому из пп.1-3, где устойчивое к гербициду растение Brassica juncea обладает по меньшей мере или примерно на 10% более высокой резистентностью по сравнению с аддитивными уровнями резистентности для растения Brassica juncea, содержащего первый ген AHASL, и растения Brassica juncea, содержащего второй ген AHASL.

5. Устойчивое к гербициду растение Brassica juncea по п.4, где устойчивое к гербициду растение Brassica juncea обладает по меньшей мере или примерно на 20% более высокой резистентностью по сравнению с аддитивными уровнями резистентности для растения Brassica juncea, содержащего первый ген AHASL, и растения Brassica juncea, содержащего второй ген AHASL.

6. Устойчивое к гербициду растение Brassica juncea по п.5, где устойчивое к гербициду растение Brassica juncea обладает по меньшей мере или примерно на 30% более высокой резистентностью по сравнению с аддитивными уровнями резистентности для растения Brassica juncea, содержащего первый ген AHASL, и растения Brassica juncea, содержащего второй ген AHASL.

7. Часть устойчивого к гербициду растения Brassica juncea по любому из пп.1-6, где часть растения содержит гены AHASL, кодирующие устойчивые к гербициду полипептиды AHASL, раскрытые в пп.1, 2, и часть растения выбрана из каллусов растений, протопластов растений, культур растительных клеток, стеблей, листьев, корней, соцветий, цветов, цветов компактного соцветия, плодов, цветоножек, плодоножек, тычинок, пыльников, рылец, столбиков, завязей, лепестков, чашелистиков, плодолистиков, кончиков корня, корневых чехликов, корневых волосков, волосков семени, пыльцевых зерен, микроспор, зародышей, семяпочек, семядолей, гипокотилей, эпикотилей, ксилем, флоэм, паренхим, эндоспермов, клеток-спутниц, замыкающих клеток.

8. Часть растения по п.7, где часть растения выбрана из пыльцы, протопластов и завязей.

9. Клетка устойчивого к гербициду растения Brassica juncea по любому из пп.1-6, где клетка растения содержит гены AHASL, кодирующие устойчивые к гербициду полипептиды AHASL, раскрытые в пп.1, 2.

10. Семя устойчивого к гербициду растения Brassica juncea по любому из пп.1-6, где семя растения содержит гены AHASL, кодирующие устойчивые к гербициду полипептиды AHASL, раскрытые в пп.1, 2.

11. Семя по п.10, где семя обработано препаратом для обработки семян, содержащим AHAS-ингибирующий гербицид.

12. Семя по п.11, где препарат для обработки семян включает один или несколько гербицидов, выбранных из имидазолинонового гербицида, сульфонилмочевиного гербицида, триазолопиримидинового гербицида и пиримидинилоксибензоатового гербицида.

13. Семя по п.12, где препарат для обработки семян включает имидазолиноновый гербицид.

14. Семя по п.13, где имидазолиноновый гербицид включает один или несколько гербицидов, выбранных из имазетапира, имазапика, имазамокса, имазахина и имазапира.

15. Способ борьбы с сорняками, растущими на поле с растениями рода Brassica, где указанный способ включает выращивание на поле устойчивого к гербициду растения Brassica juncea по любому из пп.1-6 и приведение в контакт указанного растения Brassica juncea и сорняков, растущих на поле, с эффективным количеством гербицида, ингибирующего AHAS, к которому растение Brassica juncea является устойчивым, осуществляя тем самым борьбу с сорняками.

16. Способ по п.15, в котором гербицид включает один или несколько гербицидов, выбранных из имидазолинонового гербицида, сульфонилмочевинного гербицида, триазолопиримидинового гербицида и пиримидинилоксибензоатного гербицида.

17. Способ по п.16, в котором гербицид включает имидазолиноновый гербицид.

18. Способ по п.17, где имидазолиноновый гербицид включает один или несколько гербицидов, выбранных из имазетапира, имазапика, имазамокса, имазахина и имазапира.

19. Способ борьбы с сорняками, растущими на поле в непосредственной близости от семян растений рода Brassica, где указанный способ включает посев обработанного семени по любому из пп.11-13.

20. Способ по п.19, в котором гербицид, ингибирующий AHAS, включает один или несколько гербицидов, выбранных из имидазолинонового гербицида, сульфонилмочевиного гербицида, триазолопиримидиного гербицида и пиримидинилоксибензоатного гербицида.

21. Способ по п.20, в котором гербицид включает имидазолиноновый гербицид.

22. Способ по п.21, где имидазолиноновый гербицид включает один или несколько гербицидов, выбранных из имазетапира, имазапика, имазамокса, имазахина и имазапира.

23. Семя по п.11, где семя обработано одним из следующих способов: опрыскивание семени, нанесение покрытия на семя, окатывание семени, опыление семени, пропитка семени, пеллетизация семени, или их комбинация.

24. Семя по п.11, где семя обработано перед посевом семени и/или после проращивания семени.

25. Способ отбора устойчивого к гербициду растения Brassica juncea из множества растений Brassica, включающий

предоставление множества растений Brassica, которое может включать устойчивое к гербициду растение Brassica juncea по любому из пп.1-6;

нанесение эффективного количества AHAS-ингибирующего гербицида на указанное растение Brassica juncea и

идентификацию растения Brassica juncea, способного расти в присутствии указанного гербицида, осуществляя тем самым отбор растения Brassica juncea, устойчивого к гербициду.

26. Способ по п.25, в котором гербицид включает один или несколько гербицидов, выбранных из имидазолинонового гербицида, сульфонилмочевинного гербицида, триазолопиримидинового гербицида и пиримидинилоксибензоатного гербицида.

27. Способ по п.26, в котором гербицид включает имидазолиноновый гербицид.

28. Способ по п.27, где имидазолиноновый гербицид включает один или несколько гербицидов, выбранных из имазетапира, имазапика, имазамокса, имазахина и имазапира.

29. Экспрессирующий вектор, содержащий:

(a) первую молекулу полинуклеотида, большой субъединицы синтазы ацетогидроксикислот (AHASL), кодирующую первый устойчивый к гербициду полипептид AHASL, имеющий замещение на лейцин в положении 556 в последовательности SEQ ID NO:6, и вторую молекулу полинуклеотида AHASL, кодирующую второй устойчивый к гербициду полипептид AHASL, который имеет замещение на аспарагин в положении 638 в последовательности SEQ ID NO:2, или

(b) первую молекулу полинуклеотида большой субъединицы синтазы ацетогидроксикислот (AHASL), кодирующую первый устойчивый к гербициду полипептид AHASL, имеющий замещение на треонин в положении 104 в последовательности SEQ ID NO:5, и вторую молекулу полинуклеотида AHASL, кодирующую второй устойчивый к гербициду полипептид AHASL, который имеет замещение на аспарагин в положении 638 в последовательности SEQ ID NO:2.

30. Трансформированное растение, которое трансформировано экспрессирующим вектором по п.29 и имеет повышенную устойчивость к AHAS-ингибирующему гербициду.

31. Растение по п.30, где гербицид выбран из группы, состоящей из имидазолиноновых гербицидов, сульфонилмочевинных гербицидов, триазолопиримидиновых гербицидов и пиримидинилоксибензоатовых гербицидов.

32. Растение по п.31, где растение выбрано из В. juncea, В. napus, В. rapa, В. carinata, В. oleracea и В. nigra.

33. Способ получения трансгенного растения, имеющего повышенную устойчивость к AHAS-ингибирующим гербицидам, включающий стадии

трансформации растительной клетки экспрессирующим вектором по п.29 и

регенерации из растительной клетки трансгенного растения, которое экспрессирует полипептиды AHASL.

34. Способ идентификации или отбора устойчивой к гербициду трансформированной растительной клетки, растительной ткани или растения или его части из множества трансформированных растительных клеток, растительной тканей или растений или его частей, включающий

получение множества трансформированных растительных клеток, растительной ткани или растений или его частей, которые могут включать трансформированную растительную клетку, растительную ткань или растение или его часть, которые содержат полинуклеотиды AHASL экспрессирующего вектора по п.29, причем полинуклеотиды AHASL кодируют мутантные полипептиды AHASL, которые обеспечивают устойчивость к AHAS-ингибирующему гербициду трансформированной растительной клетке, растительной ткани или растению или его части, экспрессирующие данные полипептиды, причем полипептиды используются в качестве селективных маркеров;

осуществление контакта трансформированных растительных клеток, растительных тканей, растений или их частей по меньшей мере с одним AHAS-ингибирующим гербицидом;

определение того, подвергается ли растительная клетка, растительная ткань, растение или его часть действию AHAS-ингибирующего гербицида; и

идентификацию или отбор устойчивой к гербициду трансформированной растительной клетки, растительной ткани, растения или его части, которые содержат полинуклеотиды AHASL экспрессирующего вектора по п.29.

35. Способ получения устойчивого к AHAS-ингибирующему гербициду растения, включающий скрещивание первого растения, которое является резистентным к гербициду, со вторым растением, которое не является устойчивым к гербициду, при этом первое растение является растением по любому из пп.1-6, и отбор растения-потомка, которое устойчиво к гербициду.

36. Устойчивое к AHAS-ингибирующему гербициду растение, полученное способом по п.35.

37. Семя растения по п.36, где семя содержит гены AHASL первого растения.

38. Способ получения устойчивого к AHAS-ингибирующему гербициду семени растения Brassica, при этом способ включает

скрещивание первого растения Brassica со вторым растением Brassica с получением растения-потомка, где первое растение Brassica представляет собой устойчивое к гербициду растение Brassica juncea по любому из пп.1-6;

получение семян от растения-потомка.

39. Применение семени по любому из пп.10 и 37 для получения масла из семени.

40. Применение семени по любому из пп.10 и 37 для получения пищевого продукта на основе семени.

41. Способ идентификации растения по любому из пп.1-6, включающий:

а) получение биологического материала из растения,

b) осуществление ПЦР или исследования на основе гибридизации генов AHASL указанного биологического материала с целью определения (i) содержит ли его геном А ген AHASL, который кодирует первый полипептид AHASL, раскрытый в любом из пп.1-6, и (ii) содержит ли его геномом В ген AHASL, который кодирует второй полипептид AHASL, раскрытый в любом из пп.1, 2, и

c) идентификацию растения, упомянутого на стадии а), имеющего признаки растения по любому из пп.1-6, основываясь на полученных результатах стадии b).

42. Способ по п.41, где указанным биологическим материалом является семя растения.

43. Способ по п.42, где гербицид включает один или несколько гербицидов, выбранных из имидазолинонового гербицида, сульфонилмочевиного гербицида, триазолопиримидинового гербицида, пиримидинилоксибензоатного гербицида.

44. Способ по п.43, где гербицид включает имидазолиноновый гербицид.

45. Способ по п.44, где имидазолиноновый гербицид включает один или несколько гербицидов, выбранных из имазетапира, имазапика, имазамокса, имазахина и имазапира.

46. Способ получения устойчивого к гербициду растения Brassica juncea, где способ включает трансформацию клетки растения Brassica:

(а) первым экспрессирующим вектором, содержащим первую молекулу полинуклеотида большой субъединицы синтазы ацетогидроксикислот (AHASL), кодирующую первый устойчивый к гербициду полипептид AHASL, имеющий замещение на лейцин в положении 556 в последовательности SEQ ID NO:6, и вторым экспрессирующим вектором, содержащим вторую молекулу полинуклеотида AHASL, кодирующую второй устойчивый к гербициду полипептид AHASL, который имеет замещение на аспарагин в положении 638 в последовательности SEQ ID NO:2, или

(b) первым экспрессирующим вектором, содержащим первую молекулу полинуклеотида большой субъединицы синтазы ацетогидроксикислот (AHASL), кодирующую первый устойчивый к гербициду полипептид AHASL, имеющий замещение на лейцин в положении 104 в последовательности SEQ ID NO:5, и вторым экспрессирующим вектором, содержащим вторую молекулу полинуклеотида AHASL, кодирующую второй устойчивый к гербициду полипептид AHASL, который имеет замещение на аспарагин в положении 638 в последовательности SEQ ID NO:2, и

регенерацию из растительной клетки растения Brassica, которое экспрессирует первый и второй полипептиды AHASL.

47. Способ получения устойчивого к гербициду растения Brassica juncea, где способ включает

трансформацию клетки растения Brassica экспрессирующим вектором и

регенерацию из растительной клетки Brassica растения Brassica, которое экспрессирует по крайней мере два устойчивых к гербициду полинуклеотида, представляющие собой большую субъединицу синтазы ацетогидроксикислот (AHASL), где:

(a) растительная клетка изначально содержит молекулу полинуклеотида AHASL, кодирующую устойчивый к гербициду полипептид AHASL, имеющий замещение на лейцин в положении 556 в последовательности SEQ ID NO:6, и указанная клетка трансформирована экспрессирующим вектором, содержащим молекулу полинуклеотида AHASL, кодирующую устойчивый к гербициду полипептид AHASL, который имеет замещение на аспарагин в положении 638 в последовательности SEQ ID NO:2,

(b) растительная клетка изначально содержит молекулу полинуклеотида AHASL, кодирующую устойчивый к гербициду полипептид AHASL, имеющий замещение на аспарагин в положении 638 в последовательности SEQ ID NO:2, и указанная клетка трансформирована экспрессирующим вектором, содержащим молекулу полинуклеотида AHASL, кодирующую устойчивый к гербициду полипептид AHASL, который имеет замещение на лейцин в положении 556 в последовательности SEQ ID NO:6,

(c) растительная клетка изначально содержит молекулу полинуклеотида AHASL, кодирующую устойчивый к гербициду полипептид AHASL, имеющий замещение на треонин в положении 104 в последовательности SEQ ID NO:5, и указанная клетка трансформирована экспрессирующим вектором, содержащим молекулу полинуклеотида AHASL, кодирующую устойчивый к гербициду полипептид AHASL, который имеет замещение на аспарагин в положении 638 в последовательности SEQ ID NO:2, или

(d) растительная клетка изначально содержит молекулу полинуклеотида AHASL, кодирующую устойчивый к гербициду полипептид AHASL, имеющий замещение на аспарагин в положении 638 в последовательности SEQ ID NO:2, и указанная клетка трансформирована экспрессирующим вектором, содержащим молекулу полинуклеотида AHASL, кодирующую устойчивый к гербициду полипептид AHASL, который имеет замещение на треонин в положении 104 в последовательности SEQ ID NO:5.


наверх