Бюллетень ЕАПВ "Изобретения (евразийские заявки и евразийские патенты)"
Бюллетень 01´2017

  

(11) 

025732 (13) B1       Разделы: A B C D E F G H    

(21) 

201170490

(22) 

2009.09.24

(51) 

C12N 9/88 (2006.01)
C12N 15/60
(2006.01)
C12N 15/82
(2006.01)
A01H 5/00
(2006.01)
A01H 5/10
(2006.01)

(31) 

61/100,541

(32) 

2008.09.26

(33) 

US

(43) 

2011.12.30

(86) 

PCT/US2009/058169

(87) 

WO 2010/036771 2010.04.01

(71) 

(73) БАСФ АГРОКЕМИКАЛ ПРОДАКТС Б.В. (NL)

(72) 

Битхэм Питер, Карлсон Дейл, Гоукал Грег, Мак Элвер Джон, Пирс Джеймс, Шопке Кристиан, Сингх Биджай, Уолкер Кит (US)

(74) 

Беляева Е.Н. (BY)

(54) 

РЕЗИСТЕНТНЫЕ К ГЕРБИЦИДАМ AHAS-МУТАНТЫ И СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ

(57) 1. Рекомбинантная или подвергнутая мутагенезу молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая белок большой субъединицы синтазы ацетогидроксикислот III (AHASLIII) Brassica napus, содержащая замену аланина на треонин в положении, соответствующем положению А122 последовательности SEQ ID NO:23, и замену серина на аспарагин в положении, соответствующем положению S653 последовательности SEQ ID NO:23, причем кодируемый белок AHASL III Brassica napus является резистентным к ингибированию имидазолиноновым гербицидом, где указанный белок AHASL III проявляет синергетический уровень резистентности к ингибированию имидазолиноновым гербицидом по сравнению с аддитивными уровнями белка AHASL III Brassica napus, имеющего единичную мутацию А122Т, и белка AHASL III Brassica napus, имеющего единичную мутацию S653N, причем AHASL III белок имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO:21 или ее зрелую форму, где положения 122 и 653 последовательности SEQ ID NO:23 соответствуют положениям 104 и 635 соответственно последовательности SEQ ID NO:21.

2. Молекула нуклеиновой кислоты по п.1, имеющая последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO:16.

3. Экспрессирующий вектор, содержащий изолированную молекулу нуклеиновой кислоты по п.1.

4. Растение Brassica, содержащее молекулу нуклеиновой кислоты по п.1, где растение Brassica является резистентным по меньшей мере к одному имидазолиноновому гербициду.

5. Растение Brassica по п.4, выбранное из В. napus, В. rapa и В. juncea.

6. Растение Brassica по п.4, представляющее собой Brassica napus, которое является нетрансгенным.

7. Растение Brassica по п.4, содержащее вторую молекулу нуклеиновой кислоты AHASL, которая кодирует второй устойчивый к имидазолиноновому гербициду белок AHASL, имеющий по крайней мере одну замену, выбранную из А122Т, P197S, A205V, W574L, S653N последовательности SEQ ID NO:23, соответствующих положениям 104, 179, 187, 556 и 635 последовательности SEQ ID NO:21.

8. Семя растения Brassica, полученное из растения Brassica по п.4.

9. Семя по п.8, где растение Brassica выбрано из В. napus, В. rapa и В. juncea.

10. Семя по п.9, где растение Brassica представляет собой Brassica napus, которое является нетрансгенным.

11. Семя по п.8, обработанное имидазолиноновым гербицидом.

12. Семя по п.11, где имидазолиноновый гербицид выбран из имазамокса, имазапика, имазапира, имазетапира и их смесей.

13. Семя, полученное из растения Brassica по п.7.

14. Способ борьбы с сорняками, растущими вблизи растения Brassica, где указанный способ включает применение эффективного количества по меньшей мере одного имидазолинонового гербицида по отношению к сорнякам и растению Brassica, где растение Brassica содержит в своем геноме по меньшей мере одну молекулу нуклеиновой кислоты по п.1.

15. Способ по п.14, где растение Brassica выбрано из В. juncea, В. napus, В. rapa, В. carinata, В. oleracea и В. nigra.

16. Способ по п.14, где имидазолиноновый гербицид выбран из имазамокса, имазапика, имазапира, имазетапира и их смесей.

17. Способ по п.14, где растение Brassica является нетрансгенным.

18. Способ по п.14, где растением Brassica является Brassica napus.

19. Способ по п.14, где растение дополнительно содержит вторую молекулу нуклеиновой кислоты AHASL, которая кодирует второй устойчивый к имидазолиноновому гербициду белок AHASL, имеющий по крайней мере одну замену, выбранную из А122Т, P197S, A205V, W574L, S653N последовательности SEQ ID NO:23, соответствующих положениям 104, 179, 187, 556 и 635 последовательности SEQ ID NO:21.

20. Растительная клетка, содержащая молекулу нуклеиновой кислоты по п.1, где растительная клетка является устойчивой по меньшей мере к одному имидазолиноновому гербициду.

21. Растительная клетка по п.20, представляющая собой растительную клетку Brassica.

22. Растительная клетка по п.20, которая является нетрансгенной клеткой Brassica napus.

23. Растительная клетка по п.20, дополнительно содержащая вторую молекулу нуклеиновой кислоты AHASL, которая кодирует второй устойчивый к имидазолиноновому гербициду белок AHASL.

24. Способ борьбы с сорняками, включающий контактирование семян растения Brassica, содержащего молекулу нуклеиновой кислоты по п.1 перед посевом и/или после предварительного проращивания с имидазолиноновым гербицидом.

25. Способ по п.24, где растение дополнительно содержит вторую молекулу нуклеиновой кислоты AHASL, которая кодирует второй устойчивый к имидазолиноновому гербициду белок AHASL, имеющий по крайней мере одну замену, выбранную из А122Т, P197S, A205V, W574L, S653N последовательности SEQ ID NO:23, соответствующих положениям 104, 179, 187, 556 и 635 последовательности SEQ ID NO:21.

26. Способ по п.24, где имидазолиноновый гербицид выбран из имазамокса, имазапика, имазапира, имазетапира и их смесей.

27. Способ идентификации молекулы нуклеиновой кислоты AHASL III по п.1 в биологическом образце, включающий

получение смеси растительного биологического образца (i), содержащего ДНК, и набора праймеров нуклеиновых кислот (ii), включающего по меньшей мере один первый и второй праймер, способный амплифицировать молекулу нуклеиновой кислоты AHASL III по п.1, где по меньшей мере один из указанных праймеров содержит любую последовательность из SEQ ID NO:1-10;

обеспечение взаимодействия смеси компонентов в условиях, которые позволяют в результате полимеразной цепной реакции (ПЦР) амплифицировать молекулу нуклеиновой кислоты AHASL III по п.1 с использованием первого и второго праймера; и

выявление наличия или отсутствия амплифицированной молекулы нуклеиновой кислоты AHASL III по п.1.

28. Способ идентификации молекулы нуклеиновой кислоты AHASL III по п.1 в биологическом образце, содержащий

получение смеси растительного биологического образца (i), содержащего ДНК, и зонда молекулы нуклеиновой кислоты (ii), способного специфично гибридизоваться с молекулой нуклеиновой кислоты AHASL III по п.1;

обеспечение взаимодействия смеси компонентов в условиях, которые позволяют зонду молекулы нуклеиновой кислоты специфично гибридизоваться с молекулой нуклеиновой кислоты AHASL III по п.1;

выявление гибридизации зонда молекулы нуклеиновой кислоты с молекулой нуклеиновой кислоты AHASL III по п.1 в образце, где наличие гибридизации указывает на присутствие указанной молекулы нуклеиновой кислоты AHASL.

29. Рекомбинантная или подвергнутая мутагенезу молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая белок большой субъединицы синтазы ацетогидроксикислот III (AHASLIII) Brassica, содержащая замену аланина на треонин в положении, соответствующем положению А122 последовательности SEQ ID NO:23, и замену серина на аспарагин в положении, соответствующем положению S653 последовательности SEQ ID NO:23, причем указанный белок AHASL является резистентным к ингибированию имидазолиноновым гербицидом, где указанный белок AHASL проявляет синергетический уровень резистентности к ингибированию имидазолиноновым гербицидом по сравнению с аддитивными уровнями белка AHASL III Brassica, имеющего единичную мутацию А122Т, и белка AHASL III Brassica, имеющего единичную мутацию S653N, причем указанный AHASL III белок имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO:21 или ее зрелую форму или последовательность SEQ ID NO:21, дополнительно содержащую консервативную аминокислотную замену, где положения 122 и 653 последовательности SEQ ID NO:23 соответствуют положениям 104 и 635 соответственно последовательности SEQ ID NO:21.

30. Способ борьбы с сорняками, растущими вблизи растения Brassica, где указанный способ включает применение эффективного количества по меньшей мере одного имидазолинонового гербицида по отношению к сорнякам и растению Brassica, где растение Brassica содержит в своем геноме по меньшей мере одну молекулу нуклеиновой кислоты по п.29.

31. Способ борьбы с сорняками, включающий контактирование семян растения Brassica, содержащих молекулу нуклеиновой кислоты по п.29, с имидазолиноновым гербицидом перед посевом и/или после предварительного проращивания.

Увеличить масштаб


наверх