Бюллетень ЕАПВ "Изобретения (евразийские заявки и евразийские патенты)"
Бюллетень 07´2016

  

(11) 

023945 (13) B1       Разделы: A B C D E F G H    

(21) 

201300876

(22) 

2012.01.30

(51) 

C12N 9/42 (2006.01)
C12N 9/24
(2006.01)

(31) 

11152691.9; 61/437,804

(32) 

2011.01.31

(33) 

EP; US

(43) 

2013.12.30

(86) 

PCT/EP2012/051416

(87) 

WO 2012/104239 2012.08.09

(71) 

(73) ДСМ АйПи АССЕТС Б.В. (NL)

(72) 

Лан Ван Дер Ян Метске, Схоневелд-Бергманс Маргот Элизабет Франсуаз, Якобс Денисе Ильсе (NL)

(74) 

Воробьева Е.В. (RU)

(54) 

МУТАНТНАЯ ЦЕЛЛОБИОГИДРОЛАЗА

(57) 1. Мутантная целлобиогидролаза, являющаяся мутантом SEQ ID NO:1, содержащая замену в положении N247(I,F,H,W) согласно SEQ ID NO:1, при этом целлобиогидролаза идентична по меньшей мере на 50% последовательности SEQ ID NO:1 и обладает активностью CBH-I.

2. Мутантная целлобиогидролаза по п.1, которая содержит замену N247F.

3. Мутантная целлобиогидролаза по п.1, которая содержит замену N247H.

4. Мутантная целлобиогидролаза по любому из пп.1-3, в которой CBH-I имеет аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO:1, а указанный мутант содержит замену или делецию в положении, соответствующем одному или нескольким остаткам из числа F427, K163, G357, S36, D77 и/или Q232.

5. Мутантная целлобиогидролаза по п.4, которая содержит одну или несколько из следующих замен: F427I, K163N, G357R, S36E, D77M и/или Q232A.

6. Мутантная целлобиогидролаза по любому из пп.1-5, где CBH-I имеет аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:1, и указанный мутант содержит замену или делецию в положении, соответствующем одному или нескольким из числа остатков Т52, V101, S192, Т198, Т246, Т344, D346, А375 и/или А376.

7. Мутантная целлобиогидролаза по п.6, которая содержит одну или несколько из числа следующих замен: T52(G,M,Y,D,H,K,R), V101(T,I,F,H), S192(A,I,F,Q,H), T198(A,C,V,P,D,H), T246(G,A,Y,N,H), T344(A,S,C,L,I,Y,W), D346(P,F,G,R), A375(G,I,W,Y,H,K,R) и/или A376(T,V,L,Y,W,D).

8. Мутантная целлобиогидролаза по п.7, которая содержит одну или несколько из числа следующих замен: T52(M,D,R), V101(I,F), S192F, Т198(А,Н), T246N, T344(Y,C,L), D346(R,G), A375(Y,H) и/или A376(Y,W).

9. Мутантная целлобиогидролаза по п.8, которая содержит одну или несколько из числа следующих замен: T52D, V101F, S192F, Т198Н, T246N, T344Y, D346G, A375Y и/или A376Y.

10. Мутантная целлобиогидролаза по любому из пп.1-9, которая содержит одну или несколько или делеций в положении, соответствующем одному или нескольким остаткам из числа А6, Т7, L34, V41,Y47, T48, S99, V144, S171, L177, N194, N195, А196, I200, S205, Т243, Y244, S245, Y249, Р255, Q337, D343, Н350, V367, D372, Т393 и/или V396.

11. Мутантная целлобиогидролаза по п.8, содержащая замену С, Р, G, А, V, L, I, M, F, W, Y, H, S, T, N, Q, D, Е, K, R или делецию в любом из положений.

12. Полинуклеотид, кодирующий мутантную целлобиогидролазу по любому из пп.1-11.

13. Нуклеотидная конструкция, содержащая полинуклеотид по п.12.

14. Клетка-хозяин, трансформированная нуклеотидной конструкцией по п.13.

15. Способ получения мутантной СВН, включающий стадии:

(a) культивирования трансформированной клетки-хозяина по п.14 в подходящей культуральной среде в условиях, подходящих для получения мутантной целлобиогидролазы;

(b) получения указанной продуцируемой мутантной целлобиогидролазы; и при необходимости

(c) очистки указанной мутантной целлобиогидролазы для получения очищенной мутантной целлобиогидролазы.

16. Ферментная композиция, содержащая одну или несколько мутантных целлобиогидролаз по любому из пп.1-11 или полученная согласно способу по п.15.

17. Способ деградации лигноцеллюлозного или гемицеллюлозного материала, в котором лигноцеллюлозный или гемицеллюлозный материал приводят в контакт с ферментной композицией по п.16.

18. Способ по п.17, в котором вырабатывается один или несколько сахаров.

19. Способ по п.18, в котором выработанный сахар ферментируют для получения продукта ферментации.

20. Способ по п.19, в котором продукт ферментации является одним или несколькими из числа этанола, бутанола, молочной кислоты, пластика, органической кислоты, растворителя, добавки к кормам для животных, фармацевтического препарата, витамина, аминокислоты, фермента или химического сырья.


наверх