Бюллетень ЕАПВ "Изобретения (евразийские заявки и евразийские патенты)"
Бюллетень 07´2016

  

(11) 

023885 (13) B1       Разделы: A B C D E F G H    

(21) 

200801074

(22) 

2006.09.20

(51) 

C12N 15/63 (2006.01)
C12N 15/82
(2006.01)
C12N 15/87
(2006.01)
C12N 15/90
(2006.01)
A01H 1/00
(2006.01)
A01H 5/00
(2006.01)
A01H 5/10
(2006.01)

(31) 

60/726,106; 60/836,246

(32) 

2005.10.13; 2006.08.07

(33) 

US

(43) 

2008.10.30

(86) 

PCT/US2006/036847

(87) 

WO 2007/047016 2007.04.26

(71) 

(73) МОНСАНТО ТЕКНОЛОДЖИ, ЭлЭлСи (US)

(72) 

Аллен Эдвардс, Гилбертсон Ларри А., Хумард Нэнси М., Хуанг Шихшиех, Ивашута Сергей И., Робертс Джеймс К. (US)

(74) 

Медведев В.Н., Павловский А.Н. (RU)

(54) 

КОНСТРУКЦИЯ РЕКОМБИНАНТНОЙ ДНК ДЛЯ ИНДУЦИРОВАНИЯ СТЕРИЛЬНОСТИ В ТРАНСГЕННОМ РАСТЕНИИ, СТЕРИЛЬНЫЕ ТРАНСГЕННЫЕ РАСТЕНИЯ И СПОСОБЫ ПОЛУЧЕНИЯ ГИБРИДНЫХ СЕМЯН

(57) 1. Конструкция рекомбинантной ДНК для индуцирования стерильности в трансгенном растении, которое экспрессирует указанную рекомбинантную конструкцию ДНК, где указанная рекомбинантная конструкция ДНК содержит промотор, функционально связанный с последовательностью ДНК, которая кодирует РНК, содержащую:

(a) по меньшей мере один экзогенный участок распознавания мкРНК, распознаваемый эндогенной зрелой мкРНК, которая специфически экспрессируется либо в мужской репродуктивной ткани, либо в женской репродуктивной ткани указанного трансгенного растения; и

(b) матричную РНК, кодирующую белок, обеспечивающий устойчивость к гербициду, где экспрессия указанной эндогенной зрелой мкРНК супрессирует экспрессию указанного белка либо в мужской репродуктивной ткани, либо женской репродуктивной ткани, таким образом индуцируя стерильность в указанном трансгенном растении при нанесении на него указанного гербицида.

2. Конструкция рекомбинантной ДНК по п.1, где указанная эндогенная зрелая мкРНК специфически экспрессируется в мужской репродуктивной ткани указанного трансгенного растения и указанная стерильность представляет собой мужскую стерильность.

3. Конструкция рекомбинантной ДНК по п.1, где указанная эндогенная зрелая мкРНК специфически экспрессируется в женской репродуктивной ткани указанного трансгенного растения и указанная стерильность представляет собой женскую стерильность.

4. Конструкция рекомбинантной ДНК по п.1, где указанный по меньшей мере один экзогенный участок распознавания мкРНК расположен, по меньшей мере, в пределах одной из следующих областей:

(a) 5'-нетранслируемой области указанной матричной РНК;

(b) 3'-нетранслируемой области указанной матричной РНК и

(c) кодирующей области указанной матричной РНК.

5. Конструкция рекомбинантной ДНК по п.1, где

указанная эндогенная зрелая мкРНК представляет собой по меньшей мере одну мкРНК, выбранную из группы, состоящей из

Увеличить масштаб

или где указанная эндогенная зрелая мкРНК имеет последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:184, 187, 190, 193, 196, 297, 302, 314, 319, 323, 328, 333, 338.

6. Конструкция рекомбинантной ДНК по п.1, где указанный экзогенный участок распознавания мкРНК имеет последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-19, 20-175, 185, 188, 191, 194, 197, 200-296, 298-301, 303-313, 315-318, 320-322, 324-327, 329-332, 334-337 и 339-343.

7. Конструкция рекомбинантной ДНК по п.1, где указанный промотор представляет собой конститутивный промотор.

8. Конструкция рекомбинантной ДНК по п.1, где указанный белок, обеспечивающий устойчивость к гербициду, выбран из группы, состоящей из 5-енолпирувилшикимат-3-фосфатсинтазы, предпочтительно из штамма Agrobacterium tumefaciens CP4, глифосатоксидоредуктазы, глифосатацетилтрансферазы, глифосатдекарбоксилазы, pat, bar, монооксигеназы дикамбы, дегалогеназы 2,2-дихлорпропионовой кислоты, синтазы ацетогидроксикислот, ацетолактатсинтазы, галоарилнитрилазы, модифицированной карбоксилазы ацетил-кофермента А, дигидроптероатсинтазы, полипептида фотосистемы II массой 32 кДа, антранилатсинтазы, синтетазы дигидродипиколиновой кислоты, фитоендесатуразы, гидроксифенилпируватдиоксигеназы, модифицированной протопорфириногеноксидазы I и арилоксиалканоатдиоксигеназы.

9. Конструкция рекомбинантной ДНК по п.1, где указанный гербицид выбран из группы, состоящей из глифосата, дикамбы, глуфосината, сульфонилкарбамидов, имидазолинонов, бромоксинила, 2,2-дихлорпропионовой кислоты, ингибиторов ацетолактатсинтазы, циклогександиона, арилоксифеноксипропионата, сульфонамидных гербицидов, триазиновых гербицидов, 5-метилтриптофана, аминоэтилцистеина, пиридазиноновых гербицидов, циклопропилизоксазоловых гербицидов, ингибиторов протопорфириногеноксидазы и гербицидов, содержащих арилоксиалканоатную группу.

10. Конструкция рекомбинантной ДНК по п.8, где указанный белок, обеспечивающий устойчивость к гербициду, представляет собой 5-енолпирувилшикимат-3-фосфатсинтазу.

11. Индуцибельно стерильное трансгенное растение, экспрессирующее конструкцию рекомбинатной ДНК по п.1, где стерильность указанного трансгенного растения индуцируется нанесением указанного гербицида на указанное трансгенное растение.

12. Индуцибельно стерильное трансгенное растение по п.11, где указанная эндогенная зрелая мкРНК специфически экспрессируется в мужской репродуктивной ткани указанного трансгенного растения, а указанная стерильность представляет собой мужскую стерильность.

13. Индуцибельно стерильное трансгенное растение по п.11, где указанная эндогенная зрелая мкРНК специфически экспрессируется в женской репродуктивной ткани указанного трансгенного растения, а указанная стерильность представляет собой женскую стерильность.

14. Индуцибельно стерильное трансгенное растение по п.11, выбранное из группы, состоящей из кукурузы, пшеницы, хлопка и сои.

15. Индуцибельно стерильное трансгенное растение по п.12, где указанный белок, обеспечивающий устойчивость к гербициду, представляет собой 5-енолпирувилшикимат-3-фосфатсинтазу.

16. Индуцибельно стерильное трансгенное растение по п.15, где (а) эндогенная зрелая мкРНК представляет собой miR393, и белок, обеспечивающий устойчивость к гербициду, представляет собой 5-енолпирувилшикимат-3-фосфатсинтазу из штамма Agrobacterium tumefaciens СР4, или (b) эндогенная зрелая мкРНК представляет собой miR156j, и белок, обеспечивающий устойчивость к гербициду, представляет собой 5-енолпирувилшикимат-3-фосфатсинтазу из штамма Agrobacterium tumefaciens CP4, или (с) эндогенная зрелая мкРНК представляет собой miR395, и белок, обеспечивающий устойчивость к гербициду, представляет собой 5-енолпирувилшикимат-3-фосфатсинтазу из штамма Agrobacterium tumefaciens CP4.

17. Способ получения гибридных семян из индуцибельно стерильного трансгенного растения по п.11, причем

(а) эндогенная зрелая мкРНК специфически экспрессируется в мужской репродуктивной ткани указанного трансгенного растения, и где мужская стерильность индуцируется в указанном трансгенном растении нанесением указанного гербицида на указанное трансгенное растение, и где полученное обладающее мужской стерильностью трансгенное растение скрещивают с нормально фертильным растением для получения гибридного семени, или

(b) указанная эндогенная зрелая мкРНК специфически экспрессируется в женской репродуктивной ткани указанного трансгенного растения, и где женская стерильность индуцируется в указанном трансгенном растении нанесением указанного гербицида на указанное трансгенное растение, и где полученное обладающее женской стерильностью трансгенное растение скрещивают с нормально фертильным растением для получения гибридного семени.

18. Способ по п.17, где указанное индуцибильно стерильное трансгенное растение и указанное нормально фертильное растение представляют собой (а) растения кукурузы, (b) растения сои, (с) растения хлопка или (d) растения пшеницы.

19. Способ по п.17, где указанная эндогенная зрелая мкРНК специфически экспрессируется в мужской репродуктивной ткани указанного трансгенного растения, и указанный белок, обеспечивающий устойчивость к гербициду, представляет собой 5-енолпирувилшикимат-3-фосфатсинтазу, где мужская стерильность индуцируется в указанном трансгенном растении нанесением глифосата на указанное трансгенное растение, и где полученное обладающее мужской стерильностью трансгенное растение скрещивают с нормально фертильным растением с получением гибридного семени.

20. Способ индуцирования стерильности трансгенного растения, экспрессирующего конструкцию рекомбинантной ДНК по п.1, включающий нанесение гербицида на трансгенное растение, причем указанный гербицид наносят в количестве, достаточном для индуцирования стерильности в указанном трансгенном растении.

21. Способ по п.20, где указанная эндогенная зрелая мкРНК специфически экспрессируется в мужской репродуктивной ткани указанного трансгенного растения, и указанная стерильность представляет собой мужскую стерильность.

22. Обладающее мужской стерильностью трансгенное растение, полученное способом по п.21.

23. Способ по п.20, где указанная эндогенная зрелая мкРНК специфически экспрессируется в женской репродуктивной ткани указанного трансгенного растения, и указанная стерильность представляет собой женскую стерильность.

24. Обладающее женской стерильностью трансгенное растение, полученное способом по п.23.

25. Способ по п.20, где указанный гербицид представляет собой системный гербицид.

26. Способ по п.20, где белок, обеспечивающий устойчивость к гербициду, выбран из группы, состоящей из 5-енолпирувилшикимат-3-фосфатсинтазы, предпочтительно из штамма Agrobacterium tumefaciens CP4, глифосатоксидоредуктазы, глифосатацетилтрансферазы, глифосатдекарбоксилазы, pat, bar, монооксигеназы дикамбы, дегалогеназы 2,2-дихлорпропионовой кислоты, синтазы ацетогидроксикислот, ацетолактатсинтазы, галоарилнитрилазы, модифицированной карбоксилазы ацетилкофермента А, дигидроптероатсинтазы, полипептида фотосистемы II массой 32 кДа, антранилатсинтазы, синтетазы дигидродипиколиновой кислоты, фитоендесатуразы, гидроксифенилпируватдиоксигеназы, модифицированной протопорфириногеноксидазы I и арилоксиалканоатдиоксигеназы.

27. Способ по п.20, где указанное трансгенное растение выбрано из группы, состоящей из кукурузы, сои, хлопка и пшеницы.


наверх