Бюллетень ЕАПВ "Изобретения (евразийские заявки и евразийские патенты)"
Бюллетень 07´2016

  

(11) 

023811 (13) B1       Разделы: A B C D E F G H    

(21) 

201270577

(22) 

2010.10.20

(51) 

C12N 7/02 (2006.01)

(31) 

61/279,487

(32) 

2009.10.20

(33) 

US

(43) 

2012.12.28

(86) 

PCT/IB2010/054752

(87) 

WO 2011/048560 2011.04.28

(71) 

(73) НОВАРТИС АГ (CH)

(72) 

Дормитцер Филип, Кайнер Бьерн, Суфафифат Пирада, Франти Майкл, Мейсон Питер (US), Улендорфф Дженнифер, Матросович Михаил (DE)

(74) 

Медведев В.Н. (RU)

(54) 

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВИРУСА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ КОНСТРУКЦИИ, КОДИРУЮЩЕЙ ВИРУСНУЮ РНК

(57) 1. Способ получения вируса, включающий стадии:

(i) трансфекции культуры клеток-хозяев по меньшей мере одной экспрессионной конструкцией, кодирующей вирусную молекулу РНК;

(ii) добавления клеток, которые не были трансфицированы экспрессионной конструкцией, кодирующей вирусную молекулу РНК, примененной в стадии (i), к трансфицированным клеткам-хозяевам со стадии (i) для получения смеси клеток, при этом клетки-хозяева и клетки, добавляемые после трансфекции, относятся к одной и той же клеточной линии; и

(iii) культивирования смеси клеток с целью продуцирования вируса.

2. Способ получения вируса, включающий стадии:

(i) трансфекции культуры клеток MDCK по меньшей мере одной экспрессионной конструкцией, кодирующей вирусную молекулу РНК;

(ii) добавления клеток MDCK, которые не были трансфицированы, кодирующей вирусную молекулу РНК, примененной в стадии (i), к трансфицированным клеткам MDCK (i) для получения смеси клеток MDCK; и

(iii) культивирования смеси клеток MDCK с целью продуцирования вируса.

3. Способ получения вируса для изготовления вакцины, включающий стадии:

(i) трансфекции культуры клеток-хозяев по меньшей мере одной экспрессионной конструкцией, кодирующей вирусную молекулу РНК;

(ii) добавления клеток, которые не были трансфицированы, кодирующей вирусную молекулу РНК, примененной в стадии (i), к трансфицированным клеткам-хозяевам со стадии (i) для получения смеси клеток, при этом клетки-хозяева и клетки, добавляемые после трансфекции, относятся к одной и той же клеточной линии;

(iii) культивирования смеси клеток с целью продуцирования вируса; и

(iv) очистки вируса, полученного на стадии (iii).

4. Способ получения вируса для изготовления вакцины, включающий стадии:

(i) трансфекции культуры клеток MDCK по меньшей мере одной экспрессионной конструкцией, кодирующей вирусную молекулу РНК;

(ii) добавления клеток MDCK, которые не были трансфицированы, кодирующей вирусную молекулу РНК, примененной в стадии (i), к трансфицированным клеткам MDCK (i) для получения смеси клеток MDCK;

(iii) культивирования смеси клеток MDCK с целью продуцирования вируса;

(iv) очистки вируса, полученного на стадии (iii).

5. Способ по п.1 или 3, в котором клеткой-хозяином является клетка VERO, PER.C6 или MDCK.

6. Способ по пп.2, 4 или 5, в котором клетка MDCK принадлежит клеточной линии MDCK 33016 (DSM ACC2219).

7. Способ по любому из пп.1-6, в котором клетки культивируют в суспензии.

8. Способ по любому из пп.1-6, в котором клетки культивируют адгезивно.

9. Способ по любому из пп.1-8, в котором вирусом является вирус с фрагментированным геномом.

10. Способ по любому из пп.1-9, в котором вирусом является РНК-вирус с отрицательно заряженной нитью.

11. Способ по п.10, в котором вирусом является вирус гриппа.

12. Способ по любому из пп.1-9, в котором вирусом является вирус с двухцепочечной РНК.

13. Способ по п.12, в котором вирусом является ротавирус.

14. Способ по любому из пп.1-8 или 12, в котором вирусом является вирус с нефрагментированным геномом.

15. Применение вируса, полученного способом по любому из пп.3-6, для получения вакцины.


наверх