Бюллетень ЕАПВ "Изобретения (евразийские заявки и евразийские патенты)"
Бюллетень 07´2016

  

(11) 

023689 (13) B1       Разделы: A B C D E F G H    

(21) 

201101155

(22) 

2011.04.15

(51) 

A61K 35/14 (2006.01)

(31) 

12/821,214; 12/957,430; 13/013,850

(32) 

2010.06.23; 2010.12.01; 2011.01.26

(33) 

US

(43) 

2012.07.30

(86) 

PCT/US2011/032595

(87) 

WO 2011/162863 2011.12.29

(71) 

(73) БИЛЛИОН КИНГ ИНТЕРНЭШНЛ ЛИМИТЕД (HK)

(72) 

ВОН БИН ЛОУ (US); КВОК СУЙ И (HK)

(74) 

Вахнина Т.А. (RU)

(54) 

СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩЕЙ ТЕПЛОСТОЙКИЙ ПЕРЕНОСЧИК КИСЛОРОДА

(57) 1. Способ приготовления высокоочищенной фармацевтической композиции, содержащей теплостойкий переносчик кислорода, который включает в себя гемоглобин, состоящий из неполимерного, перекрестно-сшитого тетрамерного гемоглобина, включающий:

a) использование цельной крови млекопитающих, включающей в себя, по меньшей мере, эритроциты и плазму;

b) отделение эритроцитов от плазмы в цельной крови млекопитающих;

c) фильтрацию эритроцитов, которые были отделены от плазмы с целью получения отфильтрованной фракции эритроцитов;

d) промывание отфильтрованной фракции эритроцитов с целью удаления примесей белка из плазмы, с целью получения промытых эритроцитов;

e) разрушение промытых эритроцитов посредством точного и контролируемого гипотонического лизиса в течение 2-30 с или в течение иного периода времени, достаточного для лизирования эритроцитов в устройстве мгновенного цитолиза, с целью создания раствора, содержащего лизат разрушенных эритроцитов при скорости потока 50-1000 л/ч;

f) проведение фильтрации с целью удаления по меньшей мере части отработанного ретентата из лизата с получением первого раствора гемоглобина;

g) проведение первого процесса ультрафильтрации с использованием фильтра для ультрафильтрации, сконфигурированного для удаления примесей, имеющих более высокую молекулярную массу, чем гемоглобин, для дополнительного удаления любых вирусов и остаточного отработанного ретентата из первого раствора гемоглобина с целью получения второго раствора гемоглобина;

h) проведение проточной колоночной хроматографии на очищенном растворе гемоглобина с целью удаления примесей белка;

i) проведение второго процесса ультрафильтрации с использованием фильтра для ультрафильтрации, сконфигурированного для удаления примесей, имеющих молекулярную массу меньше, чем у гемоглобина, и концентрации очищенного раствора гемоглобина;

j) перекрестное сшивание, по меньшей мере, α-α субъединиц гемоглобина посредством бис-3,5-дибромсалицил фумарата для образования перекрестно-сшитого гемоглобина в дезоксигенированной среде, в которой перекрестно-сшитый гемоглобин является неполимерным перекрестно-сшитым тетрамерным гемоглобином;

k) замену пригодного физиологического буфера для перекрестно-сшитого тетрамерного гемоглобина;

l) удаление любых остаточных химических веществ посредством тангенциальной фильтрации потока;

m) термообработку перекрестно-сшитого гемоглобина в дезоксигенированной среде с целью денатурирования и осаждения любого остаточного непрореагировавшего гемоглобина, нестабилизированного гемоглобина (димера) и любых других примесей белка, таким образом, чтобы полученный теплостойкий перекрестно-сшитый тетрамерный гемоглобин имел необнаружимую концентрацию димера и состоял, по существу, из неполимерного перекрестно-сшитого тетрамерного гемоглобина, где термообработку проводят согласно процессу "высокая температура - короткое время" при температуре от 70 до 95°С в течение от 30 с до 3 ч с последующим незамедлительным охлаждением;

n) добавление N-ацетилцистеина в количестве 0,2-0,4% немедленно после охлаждения термообработанного перекрестно-сшитого тетрамерного гемоглобина или добавление N-ацетилцистеина в количестве 0,2-0,4% до термообработки перекрестно-сшитого тетрамерного гемоглобина с последующим немедленным охлаждением термообработанного перекрестно-сшитого тетрамерного гемоглобина с целью поддержания низкого уровня метгемоглобина;

о) удаление осадка посредством центрифугирования или фильтрационного устройства с целью создания чистого раствора и

р) добавление очищенного и теплостойкого перекрестно-сшитого тетрамерного гемоглобина в фармацевтически приемлемый носитель.

2. Способ приготовления фармацевтической композиции, содержащей высокоочищенный и теплостойкий переносчик кислорода по п.1, в котором цельной кровью является человеческая, бычья, свиная, собачья или лошадиная цельная кровь.

3. Способ приготовления высокоочищенной фармацевтической композиции, содержащей высокоочищенный и теплостойкий переносчик кислорода по п.1, в котором колоночная хроматография проводится с использованием одной или нескольких катионообменных колонок или анионообменных колонок.

4. Способ приготовления фармацевтической композиции, содержащей высокоочищенный и теплостойкий переносчик кислорода по п.3, в котором хроматографическая колонка представляет собой одну или несколько DEAE колонок, СМ колонок и/или гидроксиапатитовых колонок.

5. Способ приготовления высокоочищенной фармацевтической композиции, содержащей теплостойкий переносчик кислорода по п.1, в котором фармацевтически приемлемым носителем является физиологический буфер или вода.

6. Высокоочищенная фармацевтическая композиция, содержащая теплостойкий переносчик кислорода, содержащий гемоглобин, состоящий из неполимерного перекрестно-сшитого тетрамерного гемоглобина, полученного посредством процесса по п.1.

7. Способ приготовления высокоочищенной фармацевтической композиции, содержащей теплостойкий переносчик кислорода, включающей в себя гемоглобин, состоящий из неполимерного перекрестно-сшитого тетрамерного гемоглобина, способ содержит:

a) использование цельной крови млекопитающих, включающей в себя, по меньшей мере, эритроциты и плазму;

b) отделение эритроцитов от плазмы в цельной крови млекопитающих;

c) фильтрацию эритроцитов, которые были отделены от плазмы с получением отфильтрованной фракции эритроцитов;

d) промывание отфильтрованной фракции эритроцитов с удалением примесей белка из плазмы для получения промытых эритроцитов;

e) разрушение промытых эритроцитов посредством точного и контролируемого гипотонического лизиса в течение 2-30 с или в течение иного периода времени, достаточного для лизирования эритроцитов в устройстве мгновенного цитолиза, с целью создания раствора, содержащего лизат разрушенных эритроцитов при скорости потока 50-1000 л/ч;

f) проведение фильтрации с целью удаления по меньшей мере части отработанного ретентата из лизата и получение первого раствора гемоглобина;

g) проведение первого процесса ультрафильтрации с использованием фильтра для ультрафильтрации, сконфигурированного для удаления примесей, имеющих более высокую молекулярную массу, чем гемоглобин, для дополнительного удаления любых вирусов и остаточного отработанного ретентата из первого раствора гемоглобина с получением второго раствора гемоглобина;

h) проведение проточной колоночной хроматографии на очищенном растворе гемоглобина с целью удаления примесей белка;

i) проведение второго процесса ультрафильтрации при использовании фильтра для ультрафильтрации, сконфигурированного для удаления примесей, имеющих меньшую молекулярную массу, чем у гемоглобина, и концентрации очищенного раствора гемоглобина;

j) перекрестное сшивание, по меньшей мере, α-α субъединиц гемоглобина посредством бис-3,5-дибромсалицил фумарата для образования перекрестно-сшитого гемоглобина в дезоксигенированной среде, в которой гемоглобин является неполимерным перекрестно-сшитым тетрамерным гемоглобином;

k) замену пригодного физиологического буфера для перекрестно-сшитого тетрамерного гемоглобина;

l) удаление любых остаточных химических веществ посредством тангенциальной фильтрации потока;

m) термообработку перекрестно-сшитого гемоглобина при температуре примерно от 90 до 95°С с целью денатурирования и осаждения любого остаточного непрореагировавшего гемоглобина, нестабилизированного гемоглобина (димера) и любых других примесей белка, таким образом, чтобы полученный теплостойкий перекрестно-сшитый тетрамерный гемоглобин имел необнаружимую концентрацию димера и состоял, по существу, из неполимерного перекрестно-сшитого тетрамерного гемоглобина, термообработку проводят в течение от 30 с до 3 ч с последующим незамедлительным охлаждением до температуры примерно 25°С;

n) добавление N-ацетилцистеина в количестве от 0,2 до 0,4% немедленно после охлаждения термообработанного перекрестно-сшитого тетрамерного гемоглобина или добавление N-ацетилцистеина в количестве 0,2-0,4% до термообработки перекрестно-сшитого тетрамерного гемоглобина с последующим немедленным охлаждением термообработанного перекрестно-сшитого тетрамерного гемоглобина с целью поддержания низкого уровня метгемоглобина;

о) удаление осадка посредством центрифугирования или фильтрационного устройства с целью создания чистого раствора и

р) добавление очищенного и теплостойкого перекрестно-сшитого тетрамерного гемоглобина в фармацевтически приемлемый носитель.

8. Способ приготовления высокоочищенной фармацевтической композиции, содержащей теплостойкий переносчик кислорода по п.7, в котором термообработка проводится в дезоксигенированной среде.

9. Способ приготовления высокоочищенной фармацевтической композиции, содержащей теплостойкий переносчик кислорода по п.7, в котором цельной кровью является человеческая, бычья, свиная, собачья или лошадиная цельная кровь.

10. Способ приготовления высокоочищенной фармацевтической композиции, содержащей теплостойкий переносчик кислорода по п.7, в котором колоночную хроматографию проводят с одной или несколькими катионообменными колонками или анионообменными колонками.

11. Способ приготовления высокоочищенной фармацевтической композиции, содержащей теплостойкий переносчик кислорода по п.10, в котором хроматографическая колонка представляет собой одну или несколько DEAE колонок, СМ колонок и/или гидроксиапатитовых колонок.

12. Фармацевтическая высокоочищенная композиция, содержащая теплостойкий переносчик кислорода, содержащий гемоглобин, состоящий из неполимерного перекрестно-сшитого тетрамерного гемоглобина, полученного посредством процесса по п.7.

13. Способ приготовления высокоочищенной фармацевтической композиции, содержащей теплостойкий переносчик кислорода, включающей в себя гемоглобин, состоящий главным образом из неполимерного перекрестно-сшитого тетрамерного гемоглобина, включающий:

a) использование цельной крови млекопитающих, включающей в себя, по меньшей мере, эритроциты и плазму;

b) отделение эритроцитов от плазмы в цельной крови млекопитающих;

c) фильтрацию эритроцитов, которые были отделены от плазмы с целью получения отфильтрованной фракции эритроцитов;

d) промывание отфильтрованной фракции эритроцитов с целью удаления примесей белка из плазмы, с целью получения промытых эритроцитов;

e) разрушение промытых эритроцитов посредством точного и контролируемого гипотонического лизиса в течение от 2 до 30 с или в течение иного периода времени, достаточного для лизирования эритроцитов в устройстве мгновенного цитолиза, с целью создания раствора, содержащего лизат разрушенных эритроцитов при скорости потока 50-1000 л/ч;

f) проведение фильтрации с целью удаления по меньшей мере части отработанного ретентата из лизата;

g) проведение первого процесса ультрафильтрации с использованием фильтра для ультрафильтрации, сконфигурированного для удаления примесей, имеющих более высокую молекулярную массу, чем гемоглобин, для дополнительного удаления любых вирусов и остаточного отработанного ретентата из первого раствора гемоглобина с целью получения второго раствора гемоглобина;

h) проведение проточной колоночной хроматографии на очищенном растворе гемоглобина с целью удаления примесей белка;

i) проведение второго процесса ультрафильтрации с использованием фильтра для ультрафильтрации, сконфигурированного для удаления примесей, имеющих меньшую молекулярную массу, чем у гемоглобина, и концентрации очищенного раствора гемоглобина;

j) перекрестное сшивание, по меньшей мере, α-α субъединиц гемоглобина посредством бис-3,5-дибромсалицил фумарата для образования перекрестно-сшитого гемоглобина в дезоксигенированной среде, в которой перекрестно-сшитый гемоглобин является неполимерным перекрестно-сшитым тетрамерным гемоглобином;

k) замену пригодного физиологического буфера для перекрестно-сшитого тетрамерного гемоглобина;

l) удаление любых остаточных химических веществ посредством тангенциальной фильтрации потока;

m) добавление N-ацетилцистеина к перекрестно-сшитому тетрамерному гемоглобину и термообработку перекрестно-сшитого гемоглобина при температуре от 70 до 95°С в дезоксигенированной среде с целью денатурирования и осаждения любого остаточного непрореагировавшего гемоглобина, нестабилизированного гемоглобина (димера) и любых других примесей белка, таким образом, чтобы полученный теплостойкий перекрестно-сшитый тетрамерный гемоглобин имел необнаружимую концентрацию димера и состоял, по существу, из неполимерного перекрестно-сшитого тетрамерного гемоглобина, термообработку проводят в течение от 30 с до 3 ч с последующим незамедлительным охлаждением до температуры 25°С;

n) добавление N-ацетилцистеина в количестве приблизительно 0,2-0,4% незамедлительно после охлаждения термообработанного перекрестно-сшитого тетрамерного гемоглобина с целью поддержания низкого уровня метгемоглобина;

о) удаление осадка посредством центрифугирования или фильтрационного устройства с получением чистого раствора и

р) добавление очищенного и теплостойкого перекрестно-сшитого тетрамерного гемоглобина в фармацевтически приемлемый носитель.

14. Способ приготовления высокоочищенной фармацевтической композиции, содержащей теплостойкий переносчик кислорода по п.13, в котором количество добавления N-ацетилцистеина до термообработки составляет примерно 0,2%.

15. Способ приготовления высокоочищенной фармацевтической композиции, содержащей теплостойкий переносчик кислорода по п.13, в котором цельной кровью является человеческая, бычья, свиная, собачья или лошадиная цельная кровь.

16. Фармацевтическая высокоочищенная композиция, содержащая теплостойкий переносчик кислорода, содержащий гемоглобин, состоящий из неполимерного перекрестно-сшитого тетрамерного гемоглобина, полученного посредством процесса по п.13.

Увеличить масштаб


наверх