Бюллетень ЕАПВ "Изобретения (евразийские заявки и патенты)"
Бюллетень 2´2015

  

(11) 

020891 (13) B1       Разделы: A B C D E F G H    

(21) 

201101154

(22) 

2011.08.31

(51) 

A61K 38/42 (2006.01)
C07K 1/36
(2006.01)

(31) 

13/097,183

(32) 

2011.04.29

(33) 

US

(43) 

2012.10.30

(71) 

(72)(73) ВОН БИН ЛОУ (US); КВОК СУЙ И (HK)

(74) 

Вахнина Т.А. (RU)

(54) 

СПОСОБ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ВЫСОКООЧИЩЕННОЙ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ КОМПОЗИЦИИ

(57) 1. Способ изготовления высокоочищенной фармацевтической композиции, содержащей термостабильный переносчик кислорода на основе гемоглобина, включающий перекрестно-сшитый гемоглобин, состоящий из

(а) заготовки цельной крови, содержащей, по меньшей мере, эритроциты и плазму;

(b) отделения эритроцитов от плазмы и белков плазмы в цельной крови путем фильтрования для получения отфильтрованной фракции эритроцитов;

(с) лизирования эритроцитов с целью получения раствора, содержащего лизат разрушенных эритроцитов;

(d) экстрагирования гемоглобина из лизата разрушенных эритроцитов с получением первого раствора гемоглобина;

(е) проведения одной или нескольких процедур очистки для удаления любых не гемоглобиновых примесей из первого гемоглобинового раствора для получения очищенного раствора гемоглобина;

(f) перекрестного сшивания тетрамеров гемоглобина в очищенном гемоглобиновом растворе для получения второго раствора, содержащего перекрестно-сшитый полимерный гемоглобин, включающий два или более перекрестно-сшитых тетрамера гемоглобина;

(g) термообработки второго раствора гемоглобина, содержащего перекрестно-сшитый полимерный гемоглобин, в деоксигенированной среде при температуре от 85 до 95°С в течение не более чем 40 мин с целью денатурации и выделения в осадок остаточного непрореагировавшего гемоглобина, нестабилизированного гемоглобина (димеров) и прочих примесей, в результате чего получается термостабильный раствор, содержащий перекрестно-сшитый полимерный гемоглобин с невыявляемой концентрацией димеров;

(h) охлаждения термостабильного раствора до температуры не выше 25°С за приблизительно 2 мин или меньше во избежание образования метгемоглобина;

(i) удаления осадка путем центрифугирования или при помощи фильтра с получением раствора очищенного термостабильного гемоглобина, содержащего перекрестно-сшитый полимерный гемоглобин.

2. Способ по п.1, предусматривающий добавление N-ацетилцистеина сразу после термообработки.

3. Способ по п.1, предусматривающий охлаждение на стадии (h) в течение менее чем 1 мин.

4. Способ по п.1, где нагревание на стадии (g) проводят в температурном диапазоне от 85 до 90°С в течение 8-30 мин.

5. Способ по п.1, где нагревание на стадии (g) проводят при температуре около 90°С в течение 45-150 с.

6. Способ по п.1, где нагревание на стадии (g) проводят при температуре около 95°С в течение 30-100 с.

7. Способ по п.1, предусматривающий добавление N-ацетилцистеина непосредственно перед термообработкой.

8. Способ по п.2, в котором добавление N-ацетилцистеина осуществляется непосредственно перед термообработкой.

9. Способ по п.1, в котором одна или несколько процедур очистки на стадии (е) для получения чистого гемоглобинового раствора включают ультрафильтрацию.

10. Способ по п.1, в котором одна или несколько совершаемых процедур очистки на стадии (е) включают хроматографию.

11. Термостабильная фармацевтическая композиция, содержащая переносчик кислорода на основе гемоглобина, включающий перекрестно-сшитый полимерный гемоглобин, изготовленный способом по п.1.


наверх