Бюллетень ЕАПВ "Изобретения (евразийские заявки и патенты)"
Бюллетень 09´2013

  

(11) 

018577 (13) B1       Разделы: A B C D E F G H    

(21) 

201000255

(22) 

2006.01.13

(51) 

C12N 15/55 (2006.01)
C12N 9/42
(2006.01)
C12N 15/11
(2006.01)
C12N 15/63
(2006.01)
C12N 1/21
(2006.01)
C12N 1/15
(2006.01)
C12N 5/10
(2006.01)
C12P 21/00
(2006.01)
A23K 1/00
(2006.01)
A23L 1/00
(2006.01)
A23L 2/00
(2006.01)
C12P 7/10
(2006.01)

(31) 

60/662,224

(32) 

2005.03.15

(33) 

US

(43) 

2010.08.30

(62) 

200701981; 2006.01.13

(71) 

(73) ВЕРЕНИУМ КОРПОРЕЙШН (US)

(72) 

Блум Дэвид, Гемсч Джослин, Дикайко Марк (US)

(74) 

Медведев В.Н. (RU)

(54) 

ЦЕЛЛЮЛАЗЫ, НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ, КОДИРУЮЩИЕ ИХ, И СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ

(57) 1. Выделенная или рекомбинантная нуклеиновая кислота, содержащая:

(a) последовательность нуклеиновой кислоты, имеющую по меньшей мере 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более либо полную идентичность последовательности с SEQ ID NO:59, SEQ ID NO:63, SEQ ID NO:67, SEQ ID NO:71, SEQ ID NO:75, SEQ ID NO:77, SEQ ID NO:79, SEQ ID NO:81, SEQ ID NO:103, SEQ ID NO:105, SEQ ID NO:107, SEQ ID NO:111, SEQ ID NO:149, SEQ ID NO:151, SEQ ID NO:153, SEQ ID NO:155, SEQ ID NO:157 или SEQ ID NO:161, или ее ферментативно активный фрагмент,

где нуклеиновая кислота кодирует по меньшей мере один полипептид, имеющий активность целлюлазы, и идентичность последовательностей необязательно определяется посредством анализа с помощью алгоритма сравнения последовательностей или посредством визуальной проверки;

и необязательно алгоритм сравнения последовательностей представляет собой алгоритм BLAST version 2.2.2, где настройки фильтра настраиваются как blastall -p blastp -d "nr pataa" -F F и все остальные опции настраиваются по умолчанию, или

(b) последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид, имеющий последовательность, как приведено в SEQ ID NO:60, SEQ ID NO:64, SEQ ID NO:72, SEQ ID NO:76, SEQ ID NO:78, SEQ ID NO:104, SEQ ID NO:106, SEQ ID NO:108, SEQ ID NO:150, SEQ ID NO:152 или SEQ ID NO:154, или ее ферментативно активный фрагмент, или

(c) последовательность нуклеиновой кислоты, комплементарную (а) или (b);

где активность целлюлазы необязательно включает в себя активность эндоглюканазы; активность целлюлазы необязательно включает в себя активность целлобиогидролазы; активность целлюлазы необязательно включает в себя активность бета-глюкозидазы или маннаназы; активность целлюлазы необязательно включает в себя активность эндоцеллюлазы; активность целлюлазы необязательно включает в себя гидролиз глюкана с получением более низкомолекулярного полисахарида или олигомера; активность целлюлазы необязательно включает в себя катализ гидролиза 1,4-бета-D-гликозидных связей; необязательно активность эндоцеллюлазы включает в себя активность эндо-1,4-бета-эндоцеллюлазы; активность по отношению к 1,4-бета-D-гликозидной связи необязательно включает в себя гидролиз 1,4-бета-D-гликозидной связи в целлюлозе, производном целлюлозы, лихенине или зерновой культуре; производное целлюлозы необязательно включает в себя карбоксиметилцеллюлозу или гидроксиэтилцеллюлозу; зерновая культура необязательно содержит бета-D-глюкан или ксилоглюкан; активность целлюлазы необязательно включает в себя катализ гидролиза связей глюканазы; активность целлюлазы необязательно включает в себя катализ гидролиза связей бета-1,4- и/или бета-1,3-глюканазы; активность целлюлазы необязательно включает в себя катализ гидролиза связей эндоглюканазы; активность целлюлазы необязательно включает в себя катализ гидролиза эндо-1,4-бета-D-глюкан 4-глюканогидролазы; активность целлюлазы необязательно включает в себя катализ гидролиза внутренних связей эндо-бета-1,4-глюканазы и/или связей бета-1,3-глюканазы; активность целлюлазы необязательно включает в себя катализ гидролиза внутренних бета-1,3-глюкозидных связей; активность целлюлазы необязательно включает в себя гидролиз полисахаридов, содержащих глюкопиранозу; активность целлюлазы необязательно включает в себя гидролиз полисахаридов, содержащих 1,4-бета-глюкозидсвязанные D-глюкопиранозы; активность целлюлазы необязательно включает в себя гидролиз целлюлозы, производного целлюлозы или гемицеллюлозы; активность целлюлазы необязательно включает в себя гидролиз целлюлозы или гемицеллюлозы в древесине или бумажной пульпе или в продукте из древесины или бумаги; активность целлюлазы необязательно включает в себя катализ гидролиза глюкана в корме, пищевом продукте или напитке; корм, пищевой продукт или напиток необязательно включают в себя корм для животных на основе зерновых культур, сусло или пиво, тесто, фрукт или овощ; активность целлюлазы необязательно включает в себя катализ гидролиза глюкана в микробной клетке, в клетке грибка, в клетке млекопитающего, в клетке растения или в любом растительном материале, содержащем целлюлозную часть; активность целлюлазы необязательно является термостабильной; полипептид необязательно поддерживает активность целлюлазы при условиях, включающих в себя диапазон температур от примерно 37 до примерно 95°С, или от примерно 55 до примерно 85°С, или от примерно 70 до примерно 75°С, или от примерно 70 до примерно 95°С, или от примерно 90 до примерно 95°С, или поддерживает активность целлюлазы при температуре в пределах от примерно 1 до примерно 5°С, от примерно 5 до примерно 15°С, от примерно 15 до примерно 25°С, от примерно 25 до примерно 37°С или от примерно 37 до примерно 95, 96, 97, 98 или 99°С; активность целлюлазы необязательно является термотолерантной и где полипептид необязательно поддерживает активность целлюлазы после экспонирования для температуры в пределах от более чем 37 до примерно 95°С, от более чем 55 до примерно 85°С, или от примерно 70 до примерно 75°С, или от более чем 90 до примерно 95°С, или после экспонирования для температуры в пределах от примерно 1 до примерно 5°С, от примерно 5 до примерно 15°С, от примерно 15 до примерно 25°С, от примерно 25 до примерно 37°С или от примерно 37 до примерно 95, 96, 97, 98 или 99°С.

2. Выделенная и рекомбинантная нуклеиновая кислота по п.1, в которой последовательность нуклеиновой кислоты содержит последовательность, как приведено в SEQ ID NO:59, SEQ ID NO:63, SEQ ID NO:67, SEQ ID NO:71, SEQ ID NO:75, SEQ ID NO:77, SEQ ID NO:79, SEQ ID NO:81, SEQ ID NO:103, SEQ ID NO:105, SEQ ID NO:107, SEQ ID NO:111, SEQ ID NO:149, SEQ ID NO:151, SEQ ID NO:153, SEQ ID NO:155, SEQ ID NO:157 или SEQ ID NO:161.

3. Зонд на основе нуклеиновой кислоты для идентификации нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид с активностью целлюлазы, где зонд содержит по меньшей мере 20, 30, 40, 50, 60, 75, 100 или 150 либо более последовательных оснований последовательности по п.1, где зонд идентифицирует нуклеиновую кислоту посредством связывания или гибридизации; зонд необязательно содержит олигонуклеотид, содержащий по меньшей мере примерно 10-50, примерно 20-60, примерно 30-70, примерно 40-80, примерно 60-100 или примерно 50-150 последовательных оснований; зонд необязательно содержит последовательные основания последовательности, как приведено в SEQ ID NO:59, SEQ ID NO:63, SEQ ID NO:67, SEQ ID NO:71, SEQ ID NO:75, SEQ ID NO:77, SEQ ID NO:79, SEQ ID NO:81, SEQ ID NO:103, SEQ ID NO:105, SEQ ID NO:107, SEQ ID NO:111, SEQ ID NO:149, SEQ ID NO:151, SEQ ID NO:153, SEQ ID NO:155, SEQ ID NO:157 или SEQ ID NO:161.

4. Кассета экспрессии, вектор или носитель клонирования, содержащие нуклеиновую кислоту, содержащую последовательность по п.1, где носитель клонирования необязательно включает в себя вирусный вектор, плазмиду, фаг, фагемиду, космиду, фосмиду, бактериофаг или искусственную хромосому, и вирусный вектор необязательно включает в себя аденовирусный вектор, ретровирусный вектор или вектор аденоассоциированного вируса, и носитель клонирования необязательно включает в себя искусственную бактериальную хромосому (ВАС), плазмиду, вектор, полученный из бактериофага PI (РАС), искусственную хромосому дрожжей (YAC) или искусственную хромосому млекопитающего (MAC).

5. Трансформированная клетка, содержащая нуклеиновую кислоту, содержащую последовательность по п.1 или кассету экспрессии, вектор или носитель клонирования по п.4, где клетка необязательно представляет собой бактериальную клетку, клетку млекопитающего, клетку грибка, клетку дрожжей, клетку насекомого или клетку растения.

6. Выделенный или рекомбинантный полипептид:

(i) имеющий последовательность аминокислот, имеющую по меньшей мере 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более либо 100% идентичность последовательности с SEQ ID NO:60, SEQ ID NO:64, SEQ ID NO:72, SEQ ID NO:76, SEQ ID NO:78, SEQ ID NO:104, SEQ ID NO:106, SEQ ID NO:108, SEQ ID NO:150, SEQ ID NO:152 или SEQ ID NO:154, или ее ферментативно активный фрагмент, где идентичность последовательностей необязательно определяется посредством анализа с помощью алгоритма сравнения последовательностей или посредством визуальной проверки и алгоритм сравнения последовательностей необязательно представляет собой алгоритм BLAST version 2.2.2, где настройки фильтра настраиваются как blastall -p blastp -d "nr pataa" -F F и все остальные опции настраиваются по умолчанию;

(ii) имеющий последовательность аминокислот, кодируемую нуклеиновой кислотой по п.1, где полипептид имеет активность целлюлазы или имеет иммуногенную активность, при которой он способен генерировать антитело, которое специфично связывается с полипептидом, имеющим последовательность, как приведено в SEQ ID NO:60, SEQ ID NO:64, SEQ ID NO:72, SEQ ID NO:76, SEQ ID NO:78, SEQ ID NO:104, SEQ ID NO:106, SEQ ID NO:108, SEQ ID NO:150, SEQ ID NO:152 или SEQ ID NO:154;

(iii) имеющий последовательность аминокислот, как приведено в (i) или (ii), или полипептид, кодируемый нуклеиновой кислотой по п.1 и содержащий по меньшей мере одну консервативную замену аминокислотного остатка,

где консервативная замена необязательно включает в себя замену алифатической аминокислоты другой алифатической аминокислотой; замену серина треонином или наоборот; замену кислотного остатка другим кислотным остатком; замену остатка, несущего амидную группу, другим остатком, несущим амидную группу; замену основного остатка другим основным остатком или замену ароматического остатка другим ароматическим остатком, или их сочетание, и

алифатический остаток необязательно включает в себя аланин, валин, лейцин, изолейцин или их синтетический эквивалент; кислотный остаток включает в себя аспарагиновую кислоту, глютаминовую кислоту или их синтетический эквивалент; остаток, содержащий амидную группу, включает в себя аспарагиновую кислоту, глютаминовую кислоту или их синтетический эквивалент; основной остаток включает в себя лизин, аргинин или их синтетический эквивалент, или ароматический остаток включает в себя фенилаланин, тирозин или их синтетический эквивалент;

(iv) полипептид, как приведено в (i), (ii) или (iii), где полипептид не имеет сигнальной или лидерной последовательности или препропоследовательности, или

(v) полипептид, как приведено в (i), (ii), (iii) или (iv), имеющий гетерологичную сигнальную или лидерную последовательность или гетерологичную препропоследовательность,

где активность целлюлазы необязательно включает в себя активность эндоглюканазы; активность целлюлазы необязательно включает в себя активность целлобиогидролазы; активность целлюлазы необязательно включает в себя активность бета-глюкозидазы или маннаназы; активность целлюлазы необязательно включает в себя активность эндоцеллюлазы; активность целлюлазы необязательно включает в себя гидролиз глюкана с получением более низкомолекулярного полисахарида или олигомера; активность целлюлазы необязательно включает в себя катализ гидролиза 1,4-бета-D-гликозидных связей; необязательно активность эндоцеллюлазы включает в себя активность эндо-1,4-бета-эндоцеллюлазы; активность по отношению к 1,4-бета-D-гликозидной связи необязательно включает в себя гидролиз 1,4-бета-D-гликозидной связи в целлюлозе, производном целлюлозы, лихенине или зерновой культуре; производное целлюлозы необязательно включает в себя карбоксиметилцеллюлозу или гидроксиэтилцеллюлозу; зерновая культура необязательно содержит бета-D-глюкан или ксилоглюкан; активность целлюлазы необязательно включает в себя катализ гидролиза связей глюканазы; активность целлюлазы необязательно включает в себя катализ гидролиза связей бета-1,4- и/или бета-1,3-глюканазы; активность целлюлазы необязательно включает в себя катализ гидролиза связей эндоглюканазы; активность целлюлазы необязательно включает в себя катализ гидролиза эндо-1,4-бета-D-глюкан 4-глюканогидролазы; активность целлюлазы необязательно включает в себя катализ гидролиза внутренних связей эндо-бета-1,4-глюканазы и/или связей бета-1,3-глюканазы; активность целлюлазы необязательно включает в себя катализ гидролиза внутренних бета-1,3-глюкозидных связей; активность целлюлазы необязательно включает в себя гидролиз полисахаридов, содержащих глюкопиранозу; активность целлюлазы необязательно включает в себя гидролиз полисахаридов, содержащих 1,4-бета-глюкозидсвязанные D-глюкопиранозы; активность целлюлазы необязательно включает в себя гидролиз целлюлозы, производного целлюлозы или гемицеллюлозы; активность целлюлазы необязательно включает в себя гидролиз целлюлозы или гемицеллюлозы в древесине или бумажной пульпе или в продукте из древесины или бумаги; активность целлюлазы необязательно включает в себя катализ гидролиза глюкана в корме, пищевом продукте или напитке; корм, пищевой продукт или напиток необязательно включают в себя корм для животных на основе зерновых культур, сусло или пиво, тесто, фрукт или овощ; активность целлюлазы необязательно включает в себя катализ гидролиза глюкана в микробной клетке, в клетке грибка, в клетке млекопитающего, в клетке растения или в любом растительном материале, содержащем целлюлозную часть; активность целлюлазы необязательно является термостабильной; полипептид необязательно поддерживает активность целлюлазы при условиях, включающих в себя диапазон температур от примерно 37 до примерно 95°С, или от примерно 55 до примерно 85°С, или от примерно 70 до примерно 75°С, или от примерно 70 до примерно 95°С, или от примерно 90 до примерно 95°С, или поддерживает активность целлюлазы при температуре в пределах от примерно 1 до примерно 5°С, от примерно 5 до примерно 15°С, от примерно 15 до примерно 25°С, от примерно 25 до примерно 37°С или от примерно 37 до примерно 95, 96, 97, 98 или 99°С; активность целлюлазы необязательно является термотолерантной и где полипептид необязательно поддерживает активность целлюлазы после экспонирования для температуры в пределах от более чем 37 до примерно 95°С, от более чем 55 до примерно 85°С, или от примерно 70 до примерно 75°С, или от более чем 90 до примерно 95°С либо после экспонирования для температуры в пределах от примерно 1 до примерно 5°С, от примерно 5 до примерно 15°С, от примерно 15 до примерно 25°С, от примерно 25 до примерно 37°С или от примерно 37 до примерно 95, 96, 97, 98 или 99°С; активность целлюлазы необязательно включает в себя удельную активность при примерно 37°С в пределах от примерно 100 до примерно 1000 ед. на 1 мг белка, от примерно 500 до примерно 750 ед. на 1 мг белка, от примерно 500 до примерно 1200 ед. на 1 мг белка или от примерно 750 до примерно 1000 ед. на 1 мг белка;

термотолерантность необязательно включает в себя сохранение, по меньшей мере, половины удельной активности целлюлозы при 37°С после нагрева до повышенной температуры или где термотолерантность включает в себя удерживание удельной активности при 37°С в пределах от примерно 500 до примерно 1200 ед. на 1 мг белка после нагрева до повышенной температуры; полипептид необязательно содержит по меньшей мере один сайт гликозилирования; гликозилирование необязательно представляет собой N-связанное гликозилирование и полипептид необязательно гликозилируется после экспрессирования в P. pastoris или S. Pombe; полипептид необязательно сохраняет активность целлюлазы при условиях, включающих в себя рН примерно 6,5, 6,0, 5,5, 5,0, 4,5 или 4,0 либо более кислотный, или после экспонирования для условий, включающих в себя рН примерно 6,5, 6,0, 5,5, 5,0, 4,5 или 4,0 либо более кислотный, и где полипептид необязательно сохраняет активность целлюлазы при условиях, включающих в себя рН примерно 7,5, 8,0, 8,5, 9, 9,5, 10 или 10,5 либо более основной, или после экспонирования для условий, включающих в себя рН примерно 7,5, 8,0, 8,5, 9, 9,5, 10 или 10,5 либо более основной.

7. Композиция, содержащая полипептид по п.6.

8. Способ получения рекомбинантного полипептида, включающий:

(a) обеспечение нуклеиновой кислоты по п.1 и

(b) экспрессию нуклеиновой кислоты со стадии (а) в условиях, которые делают возможной экспрессию полипептида, с получением рекомбинантного полипептида, где способ необязательно дополнительно включает в себя трансформирование клетки-хозяина с помощью нуклеиновой кислоты из стадии (а) с последующей экспрессией нуклеиновой кислоты со стадии (а) с получением рекомбинантного полипептида в трансформированной клетке.

9. Способ генерирования варианта нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид с активностью целлюлазы, включающий:

(a) обеспечение матричной нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность по п.1; и

(b) модифицирование, делецию или добавление одного или более нуклеотидов в шаблонной последовательности или их сочетания с генерированием варианта матричной нуклеиновой кислоты,

где способ необязательно дополнительно включает экспрессию варианта нуклеиновой кислоты с генерированием варианта полипептида целлюлазы, и модификации, добавления или делеции необязательно вводятся посредством способа, включающего в себя ошибочно направленную PCR, шаффлинг, олигонуклеотид-направленный мутагенез, сборку посредством PCR, мутагенез посредством половой PCR, мутагенез in vivo, кассетный мутагенез, рекурсивный групповой мутагенез, экспоненциальный групповой мутагенез, сайт-специфичный мутагенез, перестановку генов, насыщающий мутагенез генных сайтов (GSSM), перестановку искусственным лигированием (SLR), рекомбинацию, рекурсивную рекомбинацию последовательности, мутагенез фосфотиоат-модифицированной ДНК, мутагенез урацилсодержащих шаблонов, дуплексный мутагенез с разрывами, мутагенез с репарациями точечных несовпадений, мутагенез штамма-хозяина с дефицитом репарационной способности, химический мутагенез, радиогенный мутагенез, делеционный мутагенез, рестрикционно-селекционный мутагенез, мутагенез с применением рестрикции и очистки, синтез искусственных генов, групповой мутагенез, создание мультимеров химерных нуклеиновых кислот и их сочетания, и способ необязательно итеративно повторяют до тех пор, пока не будет получена целлюлаза, имеющая измененную или иную активность или измененную или иную стабильность по сравнению с полипептидом, кодируемым матричной нуклеиновой кислотой, где необязательно вариант полипептида целлюлазы:

(а) является термотолерантным и поддерживает некоторую активность после экспонирования для повышенной температуры;

(b) имеет повышенное гликозилирование по сравнению с целлюлазой, кодируемой матричной нуклеиновой кислотой; или

(с) имеет активность целлюлазы при высокой температуре, где целлюлаза, кодируемая матричной нуклеиновой кислотой, не является активной при высокой температуре, и

где способ необязательно повторяют итеративно до тех пор, пока

(а) не будет получена последовательность, кодирующая целлюлазу, имеющую измененное использование кодона по сравнению с матричной нуклеиновой кислотой, или

(b) не будет получен ген целлюлазы, имеющий более высокий или более низкий уровень экспрессии мессенджера или стабильности по сравнению с шаблонной нуклеиновой кислотой.

10. Выделенная, или рекомбинантная сигнальная, или лидерная последовательность, состоящая из последовательности аминокислот, как приведено в аминоконцевых остатках 1-14, 1-15, 1-16, 1-17, 1-18, 1-19, 1-20, 1-21, 1-22, 1-23, 1-24, 1-25, 1-26, 1-27, 1-28, 1-28, 1-30, 1-31, 1-32, 1-33, 1-34, 1-35, 1-36, 1-37, 1-38, 1-40, 1-41, 1-42, 1-43 или 1-44, из:

(a) последовательности аминокислот по п.6 или

(b) последовательности аминокислот, как приведено в SEQ ID NO:60, SEQ ID NO:64, SEQ ID NO:72, SEQ ID NO:76, SEQ ID NO:78, SEQ ID NO:104, SEQ ID NO:106, SEQ ID NO:108, SEQ ID NO:150, SEQ ID NO:152 или SEQ ID NO:154.

11. Способ гидролиза, разрушения или разрыва связей глюкан-, целлюлозо- и/или гемицеллюлозосодержащей композиции, включающий:

(a) обеспечение полипептида, имеющего активность целлюлазы по п.6, или полипептида, кодируемого нуклеиновой кислотой по п.1;

(b) обеспечение композиции, содержащей целлюлозу, гемицеллюлозу и/или глюкан; и

(c) приведение полипептида со стадии (а) в контакт с композицией из стадии (b) при условиях, где целлюлаза гидролизирует, разрушает или разрывает связи глюкан-, целлюлозо- или гемицеллюлозосодержащей композиции,

где композиция необязательно включает в себя клетку растения, бактериальную клетку, клетку дрожжей, клетку насекомого или клетку животного и полипептид необязательно имеет активность эндоглюканазы, целлобиогидролазы, маннаназы и/или бета-глюкозидазы.

12. Способ получения пищи или корма, включающий приведение пищи, корма, пищевого продукта или кормового продукта в контакт по меньшей мере с одним полипептидом по п.6 или полипептидом, кодируемым нуклеиновой кислотой по п.1, в условиях, достаточных для нужного обращения с пищей, кормом, пищевым продуктом или кормовым продуктом.

13. Способ получения напитка, включающий введение по меньшей мере одного полипептида по п.6 или полипептида, кодируемого нуклеиновой кислотой по п.1, в напиток или предшественник напитка, в условиях, достаточных для уменьшения вязкости напитка, где напиток или предшественник напитка необязательно представляет собой сусло или пиво.

14. Способ получения топлива, включающий приведение композиции, содержащей глюкан, целлюлозу, гемицеллюлозу и/или ферментируемый сахар, в контакт с полипептидом по п.6 или полипептидом, кодируемым нуклеиновой кислотой по п.1, где композиция, содержащая глюкан, целлюлозу, гемицеллюлозу и/или ферментируемый сахар, необязательно включает в себя растение, продукт растения или производное растения и растение или продукт растения необязательно включают в себя растения или продукты растений сахарного тростника, свеклы или сахарной свеклы, пшеницы, кукурузы, сои, картофеля, риса или ячменя, и полипептид необязательно имеет активность, включающую в себя активность целлюлазы, эндоглюканазы, целлобиогидролазы, маннаназы и/или бета-глюкозидазы, и топливо необязательно включает в себя биоэтанол или смесь бензин-этанол.

15. Комбинация ферментов для деполимеризации глюкановых, целлюлозных и/или гемицеллюлозных полимеров до метаболизируемых углеродных остатков, содержащая полипептид по п.6 или полипептид, кодируемый нуклеиновой кислотой по п.1, где полипептид необязательно имеет активность, включающую в себя активность целлюлазы, эндоглюканазы, целлобиогидролазы, маннаназы и/или бета-глюкозидазы.

16. Способ обработки материала биологической массы, включающий приведение материала биологической массы, содержащего глюкан, целлюлозу, гемицеллюлозу и/или ферментируемый сахар, в контакт с полипептидом по п.6 или полипептидом, кодируемым нуклеиновой кислотой по п.1, где материал биологической массы необязательно происходит из сельскохозяйственной культуры, представляет собой побочный продукт производства пищевых продуктов или кормов, представляет собой продукт лигноцеллюлозных отходов или представляет собой остаток растения, или использованную бумагу, или использованный бумажный продукт и полипептид необязательно имеет активность, включающую в себя активность целлюлазы, эндоглюканазы, целлобиогидролазы, маннаназы и/или бета-глюкозидазы, и остаток растения необязательно включает стебли, листья, кожуру, шелуху, кочерыжки, древесину, древесные стружки, древесную пульпу и опилки, и использованная бумага необязательно включает в себя испорченную или использованную фотобумагу, бумагу для компьютерных принтеров, бумагу блокнотов, писчую бумагу, бумагу для пишущих машинок, газеты, журналы, картон и упаковочные материалы на основе бумаги, и переработка материала биологической массы необязательно генерирует биоэтанол.

Увеличить масштаб


наверх