Бюллетень ЕАПВ "Изобретения (евразийские заявки и евразийские патенты)"
Бюллетень 2´2007

  

(11)

008353 (13) B1       Разделы: A B C D E F G H   

(21)

200501653

(22)

2004.04.22

(51)

C07K 16/46 (2006.01)
A61K 39/395
(2006.01)

(31)

2003-0092

(32)

2003.04.23

(33)

CU

(43)

2006.06.30

(86)

PCT/CU2004/000006

(87)

WO 2004/094477 2004.11.04

(71)(73)

СЕНТРО ДЕ ИНМУНОЛОГИЯ МОЛЕКУЛАР (CU)

(72)

Роке Наварро Лоудес Татьяна, Матео Де Акоста Дель Рио Кристина Мария, Родригес Гонсалес Мабель, Рохас Дорантес Гертрудис, Талавера Перес Арьель, Морено Фриас Эрнесто (CU)

(74)

Медведев В.Н., Павловский А.Н. (RU)

(54)

РЕКОМБИНАНТНЫЕ АНТИТЕЛА И ФРАГМЕНТЫ, УЗНАЮЩИЕ N-ГЛИКОЛИЛ GM3 ГАНГЛИОЗИД И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ В ДИАГНОСТИКЕ И ЛЕЧЕНИИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЕЙ

(57) 1. Рекомбинантное антитело, полученное из мышиного моноклонального антитела 14F7, продуцируемое гибридомой с инвентарным номером ЕСАСС 98101901, характеризуемое последовательностями гипервариабельных областей (CDR) тяжелой и легкой цепей, приведенных ниже.

ТЯЖЕЛАЯ ЦЕПЬ

CDR1: SYWIH

CDR2: YIDPATAYTESNQKFKD

CDR3: ESPRLRRGIYYYAMDY

ЛЕГКАЯ ЦЕПЬ

CDR1: RASQSISNNLH

CDR2: YASQSIS

CDR3: QQSNRWPLT

2. Антитело по п.1, отличающееся тем, что является химерным вариантом антитела 14F7, содержащим CDR и каркасные области (FR) тяжелой и легкой цепей указанного антитела 14F7, константную область тяжелой цепи человеческого IgG1, константную область Сk человеческой легкой цепи с указанными ниже последовательностями каркасных областей (FR) тяжелой и легкой цепей:

ТЯЖЕЛАЯ ЦЕПЬ

FR1: QVQLQQSGNELAKPGASMKMSCRASGYSFT

FR2: WLKQRPDQGLEWIG

FR3 : KAILTADRSSNTAFMYLNSLTSEDSAVYYCAR

FR4: WGQGTTVTVSS

ЛЕГКАЯ ЦЕПЬ

FR1: DLVLTQSPATLSVTPGDSVSFSC

FR2: WYQQRTHESPRLLIK

FR3: GIPSRFSGSGSGTDFTLSIISVETEDFGMYFC

FR4: FGAGTKLELKRA

3. Антитело по пп.1 и 2, отличающееся тем, что является гуманизированным вариантом моноклонального антитела 14F7, содержащим точечные мутации в каркасных областях (FR) тяжелой и легкой цепей для снижения иммуногенности.

4. Антитело по п.3, отличающееся тем, что является гуманизированным вариантом моноклонального антитела 14F7, каркасные области тяжелых и легких цепей которого содержат любые из указанных ниже мутаций:

ТЯЖЕЛАЯ ЦЕПЬ:

Позиция 5 Qвместо V

Позиция 9 N вместо АПозиция 11 L вместо V

Позиция 12 А вместо V

Позиция 18 М вместо V

Позиция 19 K вместо R

Позиция 20 М вместо V

Позиция 40 R вместо А

Позиция 42 D вместо G

ЛЕГКАЯ ЦЕПЬ:

Позиция 39 R вместо K

Позиция 40 Т вместо Р

Позиция 41 Н вместо G

Позиция 42 Е вместо Q

5. Одноцепочечный фрагмент Fv, полученный из мышиного моноклонального антитела 14F7, продуцируемого гибридомой с инвентарным номером ЕСАСС 98101901, отличающийся тем, что содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи мышиного моноклонального антитела 14F7 и вариабельную область легкой цепи мышиного антитела.

6. Одноцепочечный фрагмент Fv по п.5, отличающийся тем, что вариабельная область легкой цепи представляет собой само антитело 14F7.

7. Одноцепочечный фрагмент Fv по п.6, отличающийся тем, что последовательности гипервариабельных областей (CDR) тяжелой и легкой цепей представляют собой последовательности, указанные ниже:

ТЯЖЕЛАЯ ЦЕПЬ

CDR1: SYWIH

CDR2: YIDPATAYTESNQKFKD

CDR3: ESPRLRRGIYYYAMDY

ЛЕГКАЯ ЦЕПЬ

CDR1: RASQSISNNLH

CDR2: YASQSIS

CDR3: QQSNRWPLT

8. Одноцепочечный фрагмент Fv по п.7, отличающийся тем, что содержит гипервариабельные области (CDR) и каркасные области (FR) тяжелой и легкой цепей указанного антитела 14F7, последовательности каркасных областей (FR) тяжелой и легкой цепей которого представляют собой указанное ниже:

ТЯЖЕЛАЯ ЦЕПЬ

FR1: QVQLQQSGNELAKPGASMKMSCRASGYSFT

FR2: WLKQRPDQGLEWIG

FR3 : KAILTADRSSNTAFMYLNSLTSEDSAVYYCAR

FR4: WGQGTTVTVSS

ЛЕГКАЯ ЦЕПЬ

FR1: DLVLTQSPATLSVTPGDSVSFSC

FR2: WYQQRTHESPRLLIK

FR3: GIPSRFSGSGSGTDFTLSIISVETEDFGMYFC

FR4: FGAGTKLELKRA

9. Одноцепочечный фрагмент Fv по п.8, который содержит точечные мутации каркасных областей (FR) тяжелой и легкой цепей для снижения иммуногенности.

10. Одноцепочечный фрагмент Fv по п.9, каркасные области тяжелой и легкой цепей которого содержат любые из указанных ниже мутаций:

ТЯЖЕЛАЯ ЦЕПЬ:

Позиция 5 Qвместо V

Позиция 9 N вместо АПозиция 11 L вместо V

Позиция 12 А вместо R

Позиция 18 М вместо V

Позиция 19 K вместо R

Позиция 20 М вместо V

Позиция 40 R вместо А

Позиция 42 D вместо G

ЛЕГКАЯ ЦЕПЬ:

Позиция 39 R вместо K

Позиция 40 Т вместо Р

Позиция 41 Н вместо G

Позиция 42 Е вместо Q

11. Одноцепочечный фрагмент Fv по п.5, полученный из мышиного моноклонального антитела 14F7, продуцируемого гибридомой с инвентарным номером ЕСАСС 98101901, отличающийся тем, что содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи моноклонального антитела 14F7 и вариабельную область легкой цепи, последовательность которых представляют собой указанное ниже:


12. Одноцепочечный фрагмент Fv по п.5, полученный из мышиного моноклонального антитела 14F7, продуцируемого гибридомой с инвентарным номером ЕСАСС 98101901, отличающийся тем, что содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи мышиного моноклонального антитела 14F7 и вариабельную область легкой цепи, последовательности которых представляют собой указанное ниже:


13. Одноцепочечный фрагмент Fv, полученный из мышиного моноклонального антитела 14F7, продуцируемого гибридомой с инвентарным номером ЕСАСС 98101901, отличающийся тем, что содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи мышиного моноклонального антитела 14F7 и вариабельную область легкой цепи антитела человека.

14. Одноцепочечный фрагмент Fv по п.13, отличающийся тем, что содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи мышиного моноклонального антитела 14F7 и вариабельную область легкой цепи, последовательность которого представляет собой указанное ниже:



15. Одноцепочечный фрагмент Fv по п.13, отличающийся тем, что содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи мышиного моноклонального антитела 14F7 и вариабельную область легкой цепи, последовательность которого представляет собой указанное ниже:



16. Одноцепочечный фрагмент Fv по п.13, отличающийся тем, что содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи мышиного моноклонального антитела 14F7 и вариабельную область легкой цепи, последовательность которого представляет собой указанное ниже:


17. Клеточная линия, отличающаяся тем, что экспрессирует рекомбинантное антитело по любому из пп.1-4.

18. Клеточная линия, отличающаяся тем, что экспрессирует одноцепочечный фрагмент Fv по любому из пп.5-16.

19. Фармацевтическая композиция для лечения злокачественных опухолей, отличающаяся тем, что содержит рекомбинантное антитело по любому из пп.1-4.

20. Фармацевтическая композиция для лечения злокачественных опухолей, отличающаяся тем, что содержит одноцепочечный фрагмент Fv по любому из пп.5-16 и соответствующий наполнитель.

21. Применение фармацевтической композиции по п.19 для лечения злокачественных опухолей молочной железы, и меланом, и их метастазов и рецидивов.

22. Применение фармацевтической композиции по п.20 для лечения злокачественных опухолей молочной железы, и меланом, и их метастазов и рецидивов.

23. Реагент для определения локализации и идентификации in vivo злокачественных опухолей, отличающийся тем, что содержит рекомбинантное антитело по любому из пп.1-4 и соответствующий маркер.

24. Реагент по п.23, отличающийся тем, что может использоваться для определения локализации и идентификации in vivo злокачественных опухолей молочной железы, и меланом, и их метастазов и рецидивов.

25. Реагент для определения локализации и идентификации in vivo злокачественных опухолей, отличающийся тем, что содержит одноцепочечный фрагмент Fv по любому из пп.5-16 и соответствующий маркер.

26. Реагент по п.25, отличающийся тем, что может использоваться для определения локализации и идентификации in vivo злокачественных опухолей молочной железы, и меланом, и их метастазов и рецидивов.


наверх